尿液中检测HIV－1抗体进行男同性恋HIV病毒感染筛查的研究
作者：宋丹 陶晓燕 蔡文德 魏安业。
【关键词】 尿液。
摘要：目的：用酶联免疫吸附试验（ELASA）进行男同性恋者尿液中艾滋病病毒Ⅰ型（HIV—1）抗体检测，并与血清学检测结果进行比较，探讨采用尿液检测HIV抗体进行特殊人群HIV感染筛查的可行性。方法：平行采集受检男同性恋者的外周静脉血及尿液标本，分别用血液和尿液ELISA法检测HIV抗体,阳性血清标本采用WB法确认。结果：检测109人，血清学检测结果3人阳性，并经WB实验确认为HIV病毒感染，尿液检测3人为阳性，与血清学实验对照，准确性为100%。结论：尿液检测HIV—1抗体结果可靠，可作HIV病毒感染的筛查。
关键词：男同性恋;酶联免疫吸附试验; 艾滋病病毒Ⅰ型。
Analysis of HIV—1 Antibody in Urine Samples for MSM AIDS Infection Test。
Abstract: Objective： To compare the consistency of result of detecting HIV—1 antibody in MSM urine samples and serum specimens by ELISA. Method：The grouped urine and serum samples of MSM were collected and HIV—1 antibodies in them were screened by urine and serum ELISA kits , respectively. The positive serum specimens were retested by western—blot test. Result：Of the 109 serum samples , 3 samples showed positive reaction; The results were confirmed by western—blot. Of the 109 urine samples , 3 showed positive reaction. The consistency of testing results was 100%.Conclusion: Urine specimen can be used to screen the HIV—1 antibody.
Key words:MSM；ELISA；HIV—1 目前,中国常用酶联免疫吸附试验( ELISA) 法检测血液中艾滋病病毒I 型(HIV—1) 抗体的方法筛查HIV 感染者,采集标本时对病人造成针刺损伤,给被检者带来痛苦和不便，不利于标本的采集，给大规模特殊人群的筛查带来一定的困难，不利于预防工作的开展。本研究引进尿液检测HIV抗体的方法，平行检测尿液、血液标本，以血液检测结果为对照，评估尿液检测结果的准确性，为开展人群HIV—1抗体筛查作出准备。
1 材料与方法。
1.1 检测对象：采集深圳市各酒吧及娱乐场所中109名男同性恋并愿意接受HIV—1抗体检测者的尿液及静脉血，同一人的尿液标本及血液标本编号统一对应。尿液每份留8ml，转入一次性朔料试管封口后，保存于4℃。将静脉血离心后分离血清，转入一次性塑料试管封口保存于—20℃，待检。
1.2 尿液检测方法：使用美国Calypte Biomedical Corporation 公司生产的Calypte TM HIV—1 尿酶免疫试剂盒。检测严格按说明书操作。在550型酶标仪上判读,计算Cut off 值,判定结果。
1.3 血液检测方法：采用北京金豪生物技术有限公司生产的血液HIV抗体ELISA 试剂盒，按说明书操作。阳性血清标本用WB确证实验进行确诊。
2 结果。
在收集的109份男同性恋的尿液标本中，经Calypte TM HIV—1 尿酶免疫试剂ELISA方法检测，检测出3份标本为阳性，血清标本ELISA方法检测，3人为阳性，阳性标本经WB确认试剂检测，确认为HIV—1病毒感染。以血清学检测结果为准，尿液ELISA检测HIV—1抗体感染的准确性及符合率为100%。深圳市男同性恋HIV—1病毒感染率为2.75%。
3 讨论。
目前,中国最常用检测HIV 抗体的方法是用ELISA 法检测血液中的HIV 抗体,并以蛋白印迹法 (WB) 加以确证。ELISA 法的基本原理为免疫反应物通过化学或免疫学的方法形成酶结合物。用酶标记法检测样品时,酶结合物能与待检样品中相应的抗原或抗体结合成为免疫复合物,然后加入酶底物,经酶的催化或水解作用,无色底物产生颜色,用肉眼、分光光度计、普通光学显微镜和电子显微镜观察结果。在ELISA检测中,酶的催化有放大作用,故这种技术特异性强,灵敏度高,半衰期较长。蛋白印迹试验(WB) 常用于鉴别抗特异抗原决定簇的抗体,敏感性和特异性均较其它方法高,本法现作为HIV 感染的确诊实验。基本原理是HIV 全病毒抗原经过SDS — PAGE电泳,将分子量大小不等的蛋白带分离开来,然后将通过电泳转移技术转入硝酸纤维膜上。将此膜切割成条状,每条膜上均含有经电泳分离过的HIV 病毒抗原。待检血清用稀释液稀释,再直接加到硝酸纤维膜上使其充分接触,如血清中含有抗—HIV ,此时就会与膜条上的抗原结合,冲洗除去多余抗体,再加入抗人—IgG酶结合物并孵育,经洗涤后滴加底物,抗原、抗体结合条带呈紫褐色为阳性反应。由于不同带型的出现在诊断中意义不同,因此,严格的阳性指标应该是env、gag 和POL 三种基因产物各有条带出现。