东亚钳蝎提取物对四氯化碳诱导的小鼠肝损伤的保护作用
作者：黄迎春，张铁钢，林强，韩永平。
【摘要】 目的 研究东亚钳蝎提取物BmKE及其醇提部位（BmKEA）对四氯化碳诱导的小鼠肝损伤的保护作用及其作用机理。方法BmKE、BmKEA、阳性对照VE灌胃第5天，小鼠腹腔注射四氯化碳造成急性肝损伤，测定小鼠血清中丙氨酸转氨酶（ALT），天冬氨酸转氨酶（AST）的活性和丙二醛（MDA）含量的变化。结果BmKE及BmKEA预处理和治疗后，肝损伤小鼠血清中ALT，AST活性均有所下降，其中，BmKEA高、中剂量组达到显著性差异（P0.05）。BmKE低剂量组和BmKEA所有处理组血清中MDA含量极显著下降（P0.001）。结论BmK及BmKEA通过减少肝细胞ALT和AST的泄漏，减少脂质过氧化而保护肝脏免受损伤，BmKEA是抗氧化的活性部位。
AbstractObjectiveTo study the protective effect of extract from Buthus martensic Karch(BmKE) and the fraction separated using alcohol(BmKEA) on liver injury induced by carbon tetrachloride(CCl4) in mice and its mechanism. MethodsMice were administrated with BmKE and BmKEA with high,middle and low dosages, positive control(VitaminE) for 5d,respectively, and then acute liver injury was induced by 0.5% CCl4 ip 0.1 ml×kg—1. The mice were killed 36h after CCl4 treatment. Alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase(ALT and AST) activities in serum were measured. Maleic dialdehyde(MDA) in serum was detected.ResultsThe high and middle dosages of BmKEA significantly reduced the levels of ALT and AST(P0.05)in serum. BmKEA remarkedly decreased the content of MDA(P0.001) in serum.ConclusionThe BmkE and BmKEA can protect carbon tetrachloride—induced liver injury in mice by reducing the leakage of ALT and AST from the liver cells and lipid peroxidation. The BmKEA is active part of antioxidation.
Key wordsButhus martensic Karch; Liver injury; Antioxidation。
东亚钳蝎Buthus martensii Karsch，BmK，属节肢动物门，蛛形纲，蝎目，钳蝎科，是在中国蝎群中分布最为广泛的一种，是传统的药用动物，中医以完整的干燥虫体入药，称为“全蝎”或“全虫”。其性平、味腥、有毒，有祛风、止痉、通络、解毒功能，可治疗惊风抽搐、癫痫、中风、半身不遂、口眼歪斜、偏头痛、破伤风、淋巴结核和风疹疮肿等症。药理研究表明，蝎子对心脑血管疾病和多种类型的癌症也有一定的疗效，对预防许多慢性病有显著的效果［1］。由于受到中医“药食同源”的理论的影响，现在人们也把它作为一种功能食品搬上了餐桌。一般认为蝎子对机体作用的主要成分是蝎毒［2］。近年，有人研究蝎子生长过程中的代谢产物蝎皮，并且发现其蛋白组分具有免疫调节药理活性和对T/B淋巴细胞转化具有显著促进作用［3，4］。本研究在建立小鼠四氯化碳肝损伤模型的基础上，用去掉蝎尾毒腺的东亚钳蝎提取液（BmKE）及其醇提部位（BmKEA）进行预防和治疗，以观察BmKE和BmKEA的保肝降酶和抗氧化作用。
1 材料和方法。
首先用剪刀剪掉蝎子尾部的毒腺，将剩余的部分剪碎在液氮中研磨碎，然后加入10%的无菌葡萄糖溶液，充分摇匀，在0～3℃冷藏静置2 h，取上清液冷冻干燥，4℃冰箱保存，此为东亚钳蝎提取物（BmKE）。用50%乙醇在4℃抽提4 h，4℃，8000 r/min，离心20 min，取上清液冷冻干燥，4℃冰箱保存，此为BmKE醇提部位（BmKEA）。使用剂量， BmKE高剂量（36 g/kg）、中剂量（18 g/kg）、低剂量（9 g/kg），BmKEA是BmKE的1/36，高剂量（1 g/kg）、中剂量（0.5 g/kg）、低剂量（0.25 g/kg）。
1.2 动物。
ICR小鼠（二级），雄性，体重18～22 g，购自北京大学医学部实验动物科学部。饲养在洁净动物房，合格证号为：京动许字（1999）第042号，笼具用过氧乙酸溶液消毒，温度（22±2）℃，湿度40%～70%，自然光照，自由进食与饮水，饮用水为净化水。
1.3 阳性对照药。
维生素E，北京双鹤药业现代医药技术有限责任公司产品。生产批号030602，密封，在干燥处保存，用前用吐温80乳化，蒸馏水稀释。
1.4 急性肝损伤实验。
取健康ICR雄性小鼠，随机分为正常对照组，四氯化碳模型组，不同剂量的给药保护组，每组10只，实验开始先灌胃给药，1次/d。正常对照组，模型组小鼠分别用蒸馏水（0.3 ml/只），VE阳性药组予VE阳性药（0.1 mg/只），BmKEA组分为BmKEA大剂量组（20 mg/只），中剂量组（10 mg/只），小剂量组（5 mg/只）。实验第5 d，除正常组外，其余各组腹腔注射0.5%CCl4—橄榄油0.1 ml/kg。诱导产生小鼠急性肝损伤模型。造模型后36 h将小鼠全部处死。处死前15 h禁食，但不禁水，小鼠在末次给药后1 h取眼球放血处死，分离血清后测ALT，AST的活性和MDA含量。