大鼠抗胸腺细胞血清性肾炎早期凋亡病变的观察

【摘要】 目的：研究大鼠系膜增生性肾炎，即抗胸腺细胞血清性肾炎(ATSN)早期凋亡的病变。方法：利用兔抗大鼠胸腺细胞抗血清(ATS)复制大鼠ATSN模型，实验40 min、24 h和7 d分别取各组大鼠肾皮质切片用末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记(Tunel)技术和电镜检查方法观察其肾小球系膜细胞(MC)早期凋亡病变。结果：实验40 min，ATSN大鼠出现明显的肾小球MC胞核染色质固缩，聚集于核膜呈现边缘化改变，核膜多处凸起。肾小球系膜区细胞 Tunel染色呈阳性，荧光强度均可达+++～++++。结论：ATSN发病早期（1 h内），肾小球MC可发生凋亡，随着时间的延长，逐渐出现MC溶解。

【关键词】 抗胸腺细胞血清性肾炎 凋亡 大鼠 肾小球。

系膜增生性肾小球肾炎（mesangial proliferative glomerulonephritis, MPGN）是肾小球肾炎最常见的病理类型之一，患者可因肾小球系膜细胞（mesangial cell, MC）过度增生及细胞外基质（extracellular matrix, ECM）异常分泌导致肾小球纤维化诱发肾功能衰竭，预后较差，危害极大。大鼠抗胸腺细胞血清性肾炎（antithymocyte serum nephritis, ATSN）是MPGN理想的动物模型之一［1］。本研究在成功复制大鼠ATSN模型的基础上，观察抗胸腺细胞血清性肾炎(ATSN)早期凋亡的病变。

1 材料和方法。

1.1 主要材料。

低龄雄性和雌性SD大鼠及雄性新西兰兔购自南京医科大学实验动物中心。Tunel试剂盒来源于Roche公司。

1.2 兔抗大鼠胸腺细胞抗血清的制备及大鼠ATSN模型的复制。

方法详见参考文献［2］。

1.3 肾小球组织病理学检查。

实验40 min、24 h活检大鼠肾皮质（每次取4只），7 d时处死取肾，标本分别作石蜡切片以及电镜切片。

1.4 肾小球MC凋亡的检查。

取各组大鼠40 min、24 h和7 d肾组织石蜡切片，常规脱蜡、水化，抗原修复，0.01 mol/L pH 7.4 PBS洗涤3次后加末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记（Tunel）反应液，37℃孵育1 h，洗涤后置荧光显微镜下观察。Tunel染色荧光强度以—～++++表示。详细操作流程参见Tunel试剂盒说明书。

1.5 统计学处理。

实验数据以均数±标准差(±s)表示，结果均在SPSS软件上处理。