[转录因子NF—YA真核表达载体的构建及转染HeLa细胞中的表达]真核转染
前言 NF—Y(nuclear factor Y)是一个高度保守的转录因子,由A、B、C三个亚基组成。
在NF—Y三聚体复合物中,B和c亚基先形成二聚体,然后再与A亚基结合。
NF—Y与DNA的序列特异性结合是由A亚基决定的,细胞中的功能性NF—Y因子水平也受到A亚基浓度的调控,B和c亚基随之表达,因此NF—YA是关键的调控亚基。
人类NF—YA基因定位于6号染色体p21.3,包含10个外显子。
基因转录后调控产生了大、小两个转录本,小转录本中外显子3被剪切掉而形成了29个氨基酸截短的NF—YAS蛋白。
本文成功构建了NF—YA两个转录本的真核表达载体pAAV—NF—YAL和pAAV—NF—YAS,为后续转录因子NF—Y的功能研究提供了便利。
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