维药欧芹根治疗大鼠肝损伤有效成分的筛选

【摘要】 目的 观察芹菜根8个流分对四氯化碳（CCl4）诱导急性肝损伤大鼠血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平的影响， 筛选出有效成分。

方法 110只小鼠， 随机分为模型组、8个流分组、阳性对照组、空白对照组， 共11组， 每组10只。

空白对照组和模型组预先灌胃生理盐水0.2 ml/10 g；芹菜根各流分组分别预先灌胃各提取部位50 mg/kg；阳性对照组预先灌胃150 mg/kg联苯双酯；以上各组均灌胃1次/d， 连续10 d， 所有动物第10天给药1 h后， 除空白对照组腹腔注射等量生理盐水外， 其他各组用四氯化碳（1 ml/kg）腹腔注射。

小鼠20 h后眼球取血， 离心， 分离血清， 分别测定ALT、AST。

毕业论文网 　　结果 模型组ALT和AST水平均明显高于空白对照组， 差异均具有统计学意义（P医药股份有限公司新昌制药厂）；四氯化碳（新疆医科大学分析测试中心， 分析纯）。

1. 3 方法 　　1. 3. 1 芹菜根各流分提取 将10 kg维药芹菜根用30%、50%、70%、95%乙醇回流提取2次， 1 h/次， 合并各乙醇液后减压浓缩， 得干浸膏2731 g。

将所得干浸膏用水混悬， 依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取， 减压浓缩后冷冻干燥， 得石油醚干膏384 g、氯仿干膏454.32 g、乙酸乙酯干膏397.92 g、正丁醇干膏532.8 g备用。

由于前期实验显示乙酸乙酯、正丁醇部位是其有效部位， 因此直接应用乙酸乙酯、正丁醇干膏。

取上述剩余乙酸乙酯部位浸膏约170 g， 正丁醇部位浸膏约420 g。

?⑺?得乙酸乙酯部位浸膏170 g， 与硅胶拌样， 湿法装柱， 以石油醚—乙酸乙酯（10：0—0：1）进行梯度洗脱， 按等体积 　　（250 ml）收集流分， 根据薄层色谱结果合并相同流分， 得3个流分， 分别约为20、14、11 mg。

将所得正丁醇部位浸膏420 g， 用大孔吸附树脂柱色谱法分离， 用水—乙醇梯度洗脱， 按等体积（250 ml）收集流分， 得到10%、30%、50%、70%、95%组分， 根据薄层色谱结果合并相同流分， 得5个流分， 分别为30、21、17、12、10 mg。

1. 3. 2 实验动物干预方法 空白对照组和模型组预先灌胃生理盐水0.2 ml/10 g；芹菜根各流分组分别预先灌胃各提取部位50 mg/kg；阳性对照组预先灌胃150 mg/kg联苯双酯；以上各组均灌胃1次/d， 连续10 d， 所有动物第10天给药1 h后， 除空白对照组腹腔注射等量生理盐水外， 其他各组用四氯化碳（1 ml/kg）腹腔注射。

小鼠20 h后眼球取血， 离心 　　（3000 r/min）， 分离血清， 分别测定ALT、AST。

1. 4 统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件对研究数据进行分析处理。

计量资料以均数±标准差（ x—±s）表示， 采用t检验。

P参考文献 　　[1] 陈妍， 乌莉娅?沙依提， 马亮英. 新疆维药欧芹根总黄酮的乙醇提取工艺优选及其大孔树脂筛选. 中国实验方剂学杂志， 2014， 20（15）：19—21. 　　[2] 乌莉娅?沙依提， 陈妍. 芹菜根提取物对CCl4所致急性小鼠肝损伤的保护作用. 华西药学杂志， 2008， 23（4）：411—412. 　　[3] 陈妍， 刘军， 林伊梅， 等. 芹菜根提取物对D—氨基半乳糖所致急性肝损伤的保护作用研究. 中国药房， 2011（35）：3272—3274. 　　[4] 乌莉娅?沙依提， 陈妍， 耿萍， 等.维药芹菜根化学成分的研究.中药材， 2007（12）：1535—1536. 　　[5] 陈妍， 缪娟， 高宏. 欧芹根对非酒精性脂肪肝大鼠的有效成分及机制研究. 陕西医学杂志， 2016， 45（9）：1112—1113. 　　[6] 谢婧雯， 陈妍， 贾蔓菁， 等. 欧芹根总黄酮对非酒精性脂肪性肝病大鼠的治疗作用及机制研究. 中国药业， 2016， 25（20）：29— 32. 　　[收稿日期：2017—12—13]。