浅谈肝肾双排法对染铅大鼠排铅作用

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摘要： 目的 探讨肝肾双排法对染铅大鼠排铅作用。方法 运用醋酸铅灌胃制作铅中毒模型，实验大鼠随机分为8组，利胆补肾颗粒高、中、低剂量组、依地酸钙钠组、依地酸钙钠＋利胆醇组、利胆醇组、模型组、空白对照组。药物治疗5周后，观察治疗前后各组大鼠血、尿、粪中铅的含量变化。结果 在降低血铅含量和增加尿铅排出量中，疗效依次为依地酸钙钠＋利胆醇组、依地酸钙钠组和利胆醇组；在增加粪铅排出量方面，疗效依次为依地酸钙钠＋利胆醇组、利胆醇组、依地酸钙钠组。利胆补肾颗粒高、中剂量组排铅作用优于西药组；其疗效与中药含量呈正相关。结论 肝肾双排法具有促进铅毒由肾－尿道及肝－肠道两条途径排泄，从而降低血铅含量，增加尿、粪铅的排出量。 关键词： 铅中毒； 血液/分析； 尿分析; 粪便/分析； 动物,实验 铅是一种造成人体多系统、多器官损伤的重金属元素，尤其是神经毒性最为明显。由于儿童自身生长发育特点，铅代谢与成人明显不同。在同一环境相同接触水平中，儿童对铅接触途径多，易感性强，吸收率比成人高6倍［1］,排泄率相对较低，而且骨骼中的铅向血液和软组织流动性大，更易造成铅在体内的蓄积，由此可见铅对儿童的危害更为明显［2］。因此,预防和治疗儿童铅中毒，减少铅损害，具有重要的现实意义。笔者以铅的排泄途径为切入点，在由肾脏经尿道排铅的基础上，提出促使肝细胞分泌胆汁，增加肠道排铅的新途径，结合中医基础理论，创立肝肾双排新治法，并据此研究出利胆补肾颗粒。本文以动物实验为基础，通过观察肝肾双排法对染铅大鼠驱铅效果，初步探讨肝肾双排法的驱铅作用及驱铅途径，为临床广泛应用提供实验依据。

论文代写 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 实验动物 SPF级健康SD大鼠96只，雌雄各半，体质量（455）g，购自解放军军事医学科学院实验动物中心（动物许可证号：SCXK（军）2002001）。分笼饲养，自由饮食，控制室温在25 ℃左右，湿度55％左右。适应性喂养7 d后开始实验。 1.1.2 实验药品 醋酸铅（分析纯，天津市瑞金特化学品有限公司，批号：20070208）：用去离子水配成铅含量为4 g/L的溶液；利胆补肾颗粒(主要成分：茵陈、柴胡、大黄、茯苓、泽泻、郁金、枸杞子、何首乌、甘草，天津中医药大学第一附属医院药剂部)：按照高、中、低给药剂量用去离子水配成，生药含量分别为2.025，1.350，0.675 g/mL的溶液；依地酸钙钠（天津鑫耀氨基酸有限公司，国药准字：H12020890，批号：0511241）；利胆醇［广州星群（药业）股份有限公司，国药准字：H44023173，批号：20060403］。 1.1.3 实验器材及检测设备 聚四氟乙烯消化罐（成都科林分析技术有限公司），MILESTONE ETHOS 1型微波消解器（意大利Milestone公司），IRIS Advantage等离子发射光谱仪（美国热电公司）。 论文网 1.1.4 主要试剂 水合氯醛（分析纯，天津福晨化学制剂厂）；浓硝酸（优纯级，天津市化学试剂五厂）；双氧水（分析纯，天津市赢达稀贵化学试剂厂）；1 g/L铅标准溶液（GBW08619）、1 g/L钙标准溶液［GBW(E)080118］、1 g/L锌标准溶液（GBW08620）、1 g/L铁标准溶液（GBW08616）、1 g/L镁标准溶液［GBW(E)080126］、1 g/L铜标准溶液（GBW08165）均购自国家标准物质研究中心。 1.2 实验方法 1.2.1 模型制作 将96只大鼠按随机数字表法选出12只作为空白对照组，用去离子水按10 mL/kg灌胃，每日1次，持续5周。其余大鼠用醋酸铅溶液按10 mL/kg灌胃染铅，每日1次，持续5周。染铅结束后用毛细玻璃管取大鼠目内眦静脉血。将血放入经过去离子水处理过的盛有肝素钠的炮弹管中，微波消化，测定血铅含量。若血铅含量＞100 g/L，证明铅中毒造模成功。 1.2.2 动物分组 将84只大鼠按随机数字表法分为7组，利胆补肾颗粒高、中、低剂量组、依地酸钙钠组、利胆醇组、依地酸钙钠+利胆醇组、模型组，每组12只。 1.2.3 给药方法 利胆补肾颗粒高、中、低剂量组：将利胆补肾颗粒水溶液按照20.25，13.50，6.75 g/kg灌胃，每日1次，持续5周。依地酸钙钠组：将依地酸钙钠按照0.05 g/kg腹腔注射，每周连续4 d，停3 d，持续5周。利胆醇组：将利胆醇按照0.02 mL/kg灌胃，每日1次，持续5周。依地酸钙钠+利胆醇组：按照依地酸钙钠组和利胆醇组给药方法分别给药。模型组：去离子水按照10 mL/kg灌胃，每日1次，持续5周。

毕业论文 1.2.4 检测方法 本实验中血、尿、粪样本的前处理采用微波消解法。血、尿、粪样本中的铅含量测定采用等离子原子发射光谱法。观测大鼠血、尿、粪中的铅含量。 1.3 统计学分析 实验数据用s表示，采用SPSS 13.0进行统计处理。实验数据组间比较均用单因素方差分析(oneway ANOVA)；治疗前后比较均用配对t检验（PairedSample T Test）。 2 结果 2.1 造模后血、尿、粪中铅的含量 见表1。表1 大鼠造模后血、尿、粪中铅的质量浓度注：与空白对照组比较，aP＜0.01；与模型组比较，bP＜0.05。 表1结果表明，造模后各组血铅、尿铅、粪铅质量浓度均显著高于空白对照组，差异有统计学意义（P＜0.01），说明造模成功。 2.2 治疗后血、尿、粪中铅的质量浓度 见表2。表2 造模大鼠治疗后血、尿、粪中铅的质量浓度注：与空白对照组比较，aP＜0.01；与模型组比较，bP＜0.05；与依地酸钙钠组比较，cP＜0.05；与利胆醇组比较，dP＜0.05；与依地酸钙钠＋利胆醇组比较，eP＜0.05；与利胆补肾颗粒低剂量组比较，fP＜0.05；与利胆补肾颗粒中剂量组比较，gP＜0.05。 表2结果表明，各治疗组治疗后血铅含量明显低于模型组，差异有统计学意义（P0.05）；除空白对照组外，其余各组大鼠血铅含量均比治疗前显著降低。各治疗组治疗后血铅含量均100 g/L，西依地酸钙钠＋利胆醇组和利胆补肾颗粒高剂量组血铅含量最小，中药各剂量组与血铅含量呈负相关，高剂量组和低剂量组差异有统计学意义（P0.05）；三组西药之间差异有统计学意义（P0.05），其中依地酸钙钠＋利胆醇组血铅含量最低，依地酸钙钠组次之，利胆醇组最高。 论文网 各治疗组经过肾—尿道排出的铅，各治疗组治疗后尿铅明显高于模型组，差异有统计学意义（P0.05），其中中药高剂量组最多，其次是中药中剂量组、依地酸钙钠＋利胆醇组和依地酸钙钠组，中药各剂量组与尿铅排出量呈正相关。 各治疗组经过肝—肠道排出的铅，除中药低剂量组外，各治疗组治疗后粪铅明显高于模型组，差异有统计学意义（P0.05），中药高剂量组、中剂量组排出量，优于依地酸钙钠组和利胆醇组，中药各剂量组与粪铅排出量呈正相关。西药粪铅排出量依次为依地酸钙钠＋利胆醇组、利胆醇组、依地酸钙钠组。 3 讨论 现代医学认为铅是一种造成人体多系统损害的重金属毒物，对儿童神经毒性尤为明显。其排泄途径为近2/3经肾脏由尿道排出，近1/3通过胆汁分泌由肠道排出［3］。肝细胞对铅具有主动通透作用，可从血浆中摄取铅而排入胆汁，胆汁中的铅含量是血中的40～100倍。 目前西医传统驱铅方法是使用螯合剂（如依地酸钠钙等）与血铅结合成可溶性络合物从肾脏由尿排出，对软组织、脑、肾中的铅有较强消除能力，但缺点是药物特异性差，排铅同时非特异性地排泄内源性必需微量元素（钙、锌等）及维生素，干扰机体正常生理和生化功能，剂量大时对肾脏亦有损害。而利胆醇为慢性胆囊炎的辅助治疗药，可促使肝细胞分泌胆汁，促进消化。 论文代写 笔者根据铅中毒儿童烦躁不安、任性冲动、注意力不集中等临床表现，认为其病机关键在肝失疏泄、肝胆郁滞，肾气不足、气化失常。铅邪内侵于肝，肝失疏泄，肝阳上亢，故见多动、冲动、急躁易怒；肝失疏泄，胆汁分泌排泄不利，铅邪不得外泄郁积体内，加重损害；肝失疏泄，还可致肾之气化、膀胱之开阖功能失常，从而影响铅邪由尿道排出。铅邪内侵于肾，更易致肾气不足，肾精化生乏源，髓海空虚、脑失所养，故见注意力不集中，学习困难、记忆力下降、智力减低等症；肾与膀胱相表里，肾气不足，气化失常，膀胱开阖失司，故影响铅邪的正常排泄。 因此本文采用疏肝利胆、补肾利水的肝肾双排法，一方面可直接促进胆汁的分泌与排泄，增加肠道排铅量；另一方面益肾填精，使肾气化充足，膀胱开阖有调，有利于铅邪由尿道排出，保障各脏腑器官正常的功能活动。据此研制了利胆补肾颗粒，方中柴胡调畅肝胆气机；茵陈除湿利胆退黄；大黄荡涤肠胃，通利水谷。郁金善调肝郁，行气利胆；泽泻、土茯苓利湿泻浊，助邪从小便出。何首乌养血益肝，固精益肾；枸杞子益肾填精，此二味固肝肾之本，甘草调和诸药。诸药合用，使肝疏泄有常，肾气化充足，气机畅和，二道得利，邪自得去。现代药理研究，柴胡、茵陈、大黄、郁金、甘草具有明显促进胆汁分泌和排胆作用，其中生大黄还能促进尿素氮和肌酐随尿排出体外，进而达到治疗铅性肾病的目的［4］；土茯苓、泽泻、茵陈有明显的利尿作用，因此为该药促进铅邪肝肾双排提供了依据。土茯苓亦有促智作用，柴胡、茵陈、大黄、枸杞子、泽泻等富含人体必需微量元素钙、锌、铁等，可与铅竞争肠道吸收过程中所需的转运蛋白，降低铅在肠道的吸收，阻断其肠肝循环；并有效地和铅竞争与组织细胞相结合，促进铅从组织细胞的排出；还能弥补西药在排铅的同时导致人体必需微量元素丢失的不足。

代写论文 通过上述西药排铅实验可以看出肝肾双排法，明显优于其他疗法，如在降低血铅含量和增加尿铅排出量中，疗效为依地酸钙钠＋利胆醇组优于依地酸钙钠组和利胆醇组；在增加粪铅排出量方面，疗效依次为依地酸钙钠＋利胆醇组、利胆醇组、依地酸钙钠组。 笔者根据铅中毒患儿的临床表现和铅在人体的代谢特点，首次提出肝肾双排治法，并依法研制的利胆补肾颗粒经实验研究表明，排铅作用优于西药组；其疗效与中药含量呈正相关，利胆补肾颗粒药物作用机制还有待进一步的研究。

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【参考文献】 ［1］ 章丽娟.中国儿童铅中毒现状及其原因［J］.中国学校卫生,2004,25(6):771773. ［2］ Carrington CD,Sheehan DM,Bolger PM.Hazard assessment of lead［J］.Food Addit Contam,1993，10(3):325335. ［3］ 胡亚美,江载芳.诸福棠实用儿科学［M］.7版.北京：人民卫生出版社,2005:2448. ［4］ Chaurasia SS,Kar A.Protective effects of vitamin E against leadinduced deterioration of membrane associated typeI iodothyronine 5‘monodEiodinase (5‘DI) activity in male mice［J］.Toxicology,1997，124(3):203209.