抗核抗体和抗核抗体谱联合检测在自身免疫性疾病诊断和筛查中的应
【摘要】 目的：探讨抗核抗体（ANA）和抗核抗体谱（ANAs）联合检测在自身免疫性疾病诊断和筛查中的应用价值。
方法：回顾性分析2014年1月—2015年1月本院门诊和住院部已确诊的80例自身免疫性疾病（AID）患者的临床资料，并选取20例健康体检者作为对照组。
ANA检测采用酶联免疫吸附试验（ELISA），而ANAs检测采用免疫印迹法（IBT），统计分析各检测结果及其相互关系。
结果：ANA在各种AID中均有一定的阳性检出率，以在系统性红斑狼疮（SLE）的阳性率最高，为93.75%；而ANA在类风湿性关节炎（RA）、干燥综合征（SS）、特发性血小板减少性紫癜（ITP）、混合性结缔组织病（MCTD）、系统性硬化病（PSS）及对照组中的阳性率分别为25.00%、66.67%、50.00%、62.50%、50.00%和0；ANAs中的自身抗体在不同AID中均有不同的阳性检出率。
结论：ANA敏感性好，但缺乏特异性，可作为AID的初筛试验，而ANAs中的自身抗体在不同的AID中有不同的阳性检出率，特异性好。
两者联合检测在AID诊断中具有互补性，可提高阳性检出率，对AID的诊断有着重要的临床意义。
毕业论文网 【关键词】 抗核抗体； 抗核抗体谱； 自身免疫性疾病； 诊断 【Abstract】 Objective：To discuss the clinical application of antinuclear antibodies（ANA） and antinuclear antibodies spectrum（ANAs）and in the diagnosis and screening of autoimmune diseases.Method：Clinical data of 80 patients with autoimmune diseases form January 2014 to January 2015 in outpatient department and in—patient department were reviewed retrospectively while 20 healthy people were taken as the control group.ANA was detected quantitatively by enzyme—linked immuno sorbent assay while ANAs detected by immunoblotting technique，Counted and analyzed the detected result and it’s correlation.Result：ANA has certain positive rate in all kinds of AID，but in SLE had the highest positive rate（93.75%）.The positive rate of RA，SS，ITP，MCTD，PSS and healthy people were 25.00%，66.67%，50.00%，62.50%，50.00% and 0.The autoantibody in ANAs in different autoimmune diseases with different positive rate.Conclusion：ANA with good sensitivity but lack of specificity，which is appropriate for primary screening test.ANAs with good specificity，and the autoantibody in ANAs in different autoimmune diseases with different positive rate.The co—detections of ANA and ANAs are complementary with each other，upgrade the detectable rate and have important clinical value in the diagnosis and screening of autoimmune diseases. 【Key words】 Antinuclear antibodies； Antinuclear antibodies spectrum； Autoimmune diseases； Diagnosis First—author’s address：Chaoyang District Dafeng Hospital of Shantou City，Shantou 515154，China doi：10.3969/j.issn.1674—4985.2016.24.017 自身免疫性疾病（AID）是指机体对自身抗原发生免疫反应而导致自身组织损害所引起的疾病，临床表现为器官特异性自身免疫病和系统性自身免疫疾病。
研究显示，抗核抗体（ANA）对很多AID均有一定的诊断价值，酶联免疫吸附试验（ELISA）是常用的ANA筛查方法，操作简单快捷，重复性好，且还能避免人为主观判断的影响[1]。
近年来，随着免疫印迹法（IBT）的推广应用，抗核抗体谱（ANAs）检测应用于AID诊断和筛选的热点已受到广泛的关注[2]。
本研究旨在探讨ANA和ANAs联合检测在AID诊断和筛查中的应用价值，现报道如下。
1 资料与方法 1.1 一般资料 回顾性分析2014年1月—2015年 1月本院门诊和住院部已确诊的80例AID患者的临床资料，其中男31例，女49例，年龄4～79岁，平均（43.52±1.02）岁，系统性红斑狼疮（SLE）32例，类风湿性关节炎（RA）28例，干燥综合征（SS）6例，特发性血小板减少性紫癜（ITP） 2例，混合性结缔组织病（MCTD）8例，系统性硬化病（PSS）4例。
选取同期收治的20例门诊体检健康者作为对照组，男8例，女12例，年龄18～71岁，平均（44.62±2.23）岁。
两组患者年龄组成、性别结构等一般资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2 检测方法 抽取清晨空腹静脉血3 mL，不加抗凝剂，室温静置30 min后，离心分离血清。
（1）ANA检测采用ELISA法，试剂盒由上海泰诺中国公司公司提供，且操作须严格按照试剂盒要求进行，检测从0～24、25～200、201～300、>300 U/mL浓度水平进行统计分析，ANA≥25 U/mL，则为ANA检测阳性；（2）ANAs检测采用IBT，可检测抗nRNP、Sm、SS—A、SS—B、SCL—70、Jo—1、PM—Scl、CENP—B、Ro—52、PCNA、dsDNA、AMA—M2、核小体、组蛋白和核糖体P蛋白等15项特异性抗体。
试剂盒由德国欧蒙公司提供，且操作须严格按照试剂盒要求进行，观察检测的结果。
2 结果 2.1 80例AID患者和对照组健康体检者ANA检测结果 ANA在各种AID中均有一定的阳性检出率，在SLE的阳性率最高，为93.75%；而ANA在RA、SS、ITP、MCTD、PSS及对照组中的阳性率分别为25.00%、66.67%、50.00%、62.50%、50.00%和0。
见表1。
2.2 80例AID患者和对照组健康体检者ANAs检测结果比较 ANAs中的自身抗体在不同AID中有不同的阳性检出率。
抗Sm抗体仅在SLE中检出，阳性检出率为37.50%，而在其他AID中并未发现；抗ds—DNA抗体、抗核小体抗体在SLE患者中具有较高的阳性检出率，分别为62.50%、68.75%；抗nRNP、抗SS—A抗体、抗SS—B抗体、抗CENP—B抗体、抗CENP—B抗体、抗PCNA抗体、抗组蛋白抗体以及抗核糖体P蛋白抗体等均与SLE有一定的相关性；抗SS—A和抗SS—B抗体在SS中的阳性检出率分别为50.00%、33.33%，与SS密切相关；抗ds—DNA抗体、AMA—M2抗体和抗组蛋白抗体在RA有一定的检出；抗SCL—70抗体与ITP、MCTD和PSS亦有一定的相关性。
见表2。
3 讨论 抗核抗体（ANA）又称抗核酸抗原抗体，是一组将自身真核细胞的各种成分脱氧核糖核蛋白、可提取的核抗原、DNA和RNA等作为靶抗原的自身抗体的总称[3]。
研究显示，ANA在多种自身免疫疾病（AID）中均呈不同程度的阳性率，且发现ANA可在AID任何临床症状出现前10 d左右检测到[4—5]。
而不同的AID又有着不同的抗核抗体谱（ANAs）[6]，故临床上ANA和ANAs的检测在AID诊断和筛查中具有重要的应有价值。
ANA是AID重要的血清学指标之一，临床上ANA的检测常采用间接免疫荧光法（IIF），研究显示，IIF是检测ANA的金标准，亦是目前应用最为广泛的自身抗体筛查试验[7]。
本研究ANA的检测采用ELISA，取其操作简单快捷，费用低廉，重复性好的特点，且ELISA还可排除人为主观判断的影响。
而ANAs检测则采用操作简单快捷、易自动化和结果判读方便的IBT。
本研究结果显示，ANA在各种AID中均有一定的阳性检出率，而对照组健康体检者中均为ANA阴性。
而ANA以在SLE中的阳性检出率最高，高达93.75%，而在RA、SS、ITP、MCTD和PSS的阳性检出率分别为25.00%、66.67%、50.00%、62.50%和50.00%，研究结果与文献[8]报道相符，表明ANA与AID有着密切的联系，且ANA在各AID中具有较高的敏感性，有助于AID的临床诊断。
但ANA的特异性较差，常作为AID的初筛试验。
有研究亦表明，ANA不能作为某种AID的特异性指标，多作为筛查试验[9]。
ANA在SLE患者中具有较高的阳性检出率，对SLE的诊断和筛查具有一定的参考价值。
本研究结果亦显示，抗Sm抗体仅在SLE中检出，阳性检出率为37.50%，而在其他AID中并未发现。
研究表明，抗Sm不会在健康人群和SLE外的其他疾病中出现，可作为SLE的特异性指标[10—11]。
抗ds—DNA抗体、抗核小体抗体在SLE患者中阳性检出率分别为62.50%和68.75%，对SLE均具有较高的特异性。
有研究表明，抗ds—DNA抗体是SLE的特异性指标之一，可应用于SLE的诊断，且其抗体滴度与SLE活动相平行，亦可应用于SLE的治疗评估，而其它的特异性抗体如抗nRNP、抗SS—A抗体、抗SS—B抗体、抗CENP—B抗体、抗CENP—B抗体、抗PCNA抗体、抗组蛋白抗体以及抗核糖体P蛋白抗体等均与SLE有一定的相关性[12]。
抗ds—DNA抗体在RA和SS也有一定的检出，阳性检出率分别14.29%和16.67%，与文献[6]报道结果相符。
抗nRNP抗体在MCTD中的阳性检出率为62.50%，特异性高，可作为MCTD的特异性指标，且抗nRNP抗体还可应用于结缔组织病与非结缔组织病鉴别[13]。
文献[14]报道显示，抗nRNP抗体阳性SLE患者如果同时检出抗ds—DNA和抗Sm抗体，则患者表现为狼疮性肾炎的可能性会显著增大。
抗SS—A抗体和抗SS—B抗体在SS中的阳性检出率分别为50.00%和33.33%，与SS有着密切的联系。
有研究表明，抗SS—A抗体和抗SS—B抗体与SS密切相关，可作为SS的特异性指标[15]。
亦有研究显示，抗SS—A抗体敏感性强而抗SS—B抗体特异性高，两者联合检测可提高SS确诊率，对SS的诊断有着重要的意义[16—17]。
抗SCL—70抗体与ITP、MCTD和PSS有一定的相关性，有研究显示，抗SCL—70抗体为PSS的特异性指标，与皮肤硬化及肿瘤发生相关[18]。
此外，抗AMA—M2抗体、抗组蛋白抗体与RA亦有一定的相关性[19]。
综上所述，ANA敏感性好，但缺乏特异性，可作为AID的初筛试验，而ANAs中的自身抗体在不同的AID中有不同的阳性检出率，特异性好。
两者联合检测在AID诊断中具有互补性，可提高阳性检出率，对AID的诊断有着重要的临床意义。
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