高效液相色谱法测定二丁颗粒中总黄酮的含量
【摘要】 目的建立二丁颗粒中总黄酮的含量测定。方法色谱柱为Kromasil C18；以甲醇水醋酸（45∶53∶2）为流动相；检测波长359 nm；外标法定量。结果总黄酮在0.052 8～0.316 8 μg/μl范围内呈良好的线性关系，Y=16 714X—82.436,r=0.999 4，平均回收率为96.19%，RSD=1.2%，（n=6）。结论所用方法简便、灵敏、准确，可用于二丁颗粒的质量控制。
Abstract:ObjectiveTo establish a method for determination of the total flavonoid in Erding Granules.MethodsA Kromasil C18 column was used with methanolwateracetic acid(45∶53∶2) as mobile phase.The content of ferulic acid was detected at a wavelength of 359 nm.ResultsThe linear range was 0.052 8 ～0.316 8 μg(r=0.999 4). The average recovery was 96.19% with RSD of 1.2% (n=6).ConclusionThe method is simple, sensitive and accurate. It can be used to control the quality of Erding Granules.
Key words:Total flavonoid; Erding Granules; HPLC 二丁颗粒是由紫花地丁、蒲公英、板蓝根、半边莲4味药材组成的中药复方制剂，具有清热解毒、利湿、退黄的功能。用于热疖痈毒、咽喉肿痛、风热火眼、湿热黄疸等的治疗。收载于《中国药典》2005年版Ⅰ部［1］。测定采用HPLC法，以芦丁为对照品，对二丁颗粒中蒲公英的总黄酮进行了含量测定。方法简便，重现性较好。
1.1 仪器。
日本高效液相色谱系统（日本HITACHI系列）；UV757紫外可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）;KQ—100A型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；XS205DU电子天平（梅特勒—托利多）。
1.2 试药。
芦丁对照品（中国生物制品检定所）；二丁颗粒由修正药业集团股份有限公司提供，20 g/袋，（批号：051005,053006,054003）；空白对照药材购于东北大药房锦州分店；甲醇：一级色谱纯（天津市登峰化学试剂厂），水为双蒸水，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果。
2.1 色谱条件色谱柱为Kromasil C18（5 μm,4.6 mm×250 mm）；流动相为甲醇水醋酸（45∶53∶2）；流速：0.8 ml/min；检测波长359 nm；进样10 μl；柱温30℃；室温操作。精密称取芦丁对照品0.1 mg,用甲醇稀释，温热溶解，并用甲醇定容至50 ml容量瓶中，摇匀，使用UV757紫外分光光度计在200～500 nm范围内扫描，测得芦丁在254 nm,359 nm处有两个吸收峰，由于254 nm杂质峰较大，而359 nm则较小，且易分离，故选择检测波长为359 nm。