兔脑出血模型的建立及其方法比较
【摘要】 目的 建立稳定、可靠、重复性好的兔脑内血肿模型。 方法 利用兔不抗凝自身血注入脑基底节区形成血肿。通过高磁场强MR序列评价两种注射法（缓慢匀速注射法和快速注射法）的差异。并通过神经功能缺损评分判断血肿对机体的影响。 结果 MR显示缓慢匀速注射法可形成较稳定、形态规则的血肿，与快速注射法形成血肿大小比较差异有显著性（P0.01）。神经功能评分可见缓慢匀速注射组得分(10.08±3.23)、快速注射组(15.32±2.48)，对照组未见明显神经功能异常，前两者差异有显著性（P0.05）。 结论 利用缓慢匀速注射法、不抗凝自身血注入兔脑基底节区可形成稳定、可靠、重复性好的脑内血肿模型。
【Abstract】 Objective To make a reproducible hemorrhage model in rabbits by injecting autologous blood slowly and gently. Methods Autologous blood was injected into caudate nucleus of rabbit slowly. Comparing the two injection methods by high field MR scanning. The neurologic deficit score were investigated. Results MRI revealed the stable and formula intracerebral hemorrhage in gently injection . Statistics showed significant difference between gently injected and fast injected（P0.01）. Neurologic deficit score showed significant difference between gentle injection (10.08±3.23) and fast injection(15.32±2.48)（P0.05）. Conclusion The stable and reproducible intracerebral hemorrhage could be made with autologous blood through gentle injection.
【Key words】 rabbit intracerebral hemorrhage magnetic resonance imaging animal experiment。
临床上脑出血的发病率及病死率均较高，对其研究也在不断深入。脑出血除了占位效应外，血肿引起的脑水肿及继发性损伤已受到重视［１］。因此，建立稳定可靠、重复性好的脑内出血动物模型将对临床、病理研究及影像学诊断提供很大帮助。作者介绍家兔自身血缓慢匀速注射法及快速注射法制作脑出血模型，并对两种方法进行比较。
1 材料与方法。
2003年12月至2005年2月采用体重2000～2500g健康家兔30只（浙江大学医学院实验动物中心提供）。随机分成三组，每组10只。分为缓慢匀速注射组、快速注射组及对照组。
1.2 模型制作方法。
(1)动物麻醉及穿刺定位：常温下给予家兔2.5％戊巴比妥钠，经耳缘静脉注射麻醉。麻醉成功后动物浅感觉消失，呼吸平稳。将动物固定于立体定向仪上（江湾Ⅱ型）。颅顶部脱毛、消毒。取兔眶上切迹后方11mm水平、正中矢状线旁开4.5mm处作为基底节区穿刺点。切开皮肤分离至骨膜，颅骨钻孔。(2)穿刺、注血：①缓慢匀速注血法：用1ml针筒在兔耳正中动脉抽血共500μl（不抗凝），立即经颅顶钻孔垂直穿刺入基底节区，深度11mm。穿刺到位后2min内缓慢匀速注入250μl自体血至基底节区形成血肿，注射完成后保留穿刺针8min，以防止血液自针道反流。②快速注血法：穿刺到位后快速（半分钟以内）注入自体血以形成脑内血肿，注射完成后保留穿刺针8min，以防止血液自针道反流。③对照组：第1组5只动物只钻孔不穿刺；第2组5只动物只穿刺，但不注血。
1.3 MR扫描并测量血肿大小。
采用GE Signa Horizon LX 1.5T 超导型磁共振机，相控振头线圈。扫描序列：T1 weighted imaging(T1WI)、T2 weighted imaging(T2WI)、gradient echo T2* weighted imaging(GRE T2*WI)。脑内血肿形成后30min、3、6、12、24h分别行T1WI、T2WI、 T2*WI序列扫描。观察血肿位置、形态，并测量血肿体积。
24h后观察实验兔神经功能情况，全部模型均出现不同程度神经功能障碍症状，如偏瘫、偏盲、反应迟钝等。用Gacia方法对实验兔进行神经功能评分，最高18分，分值越低功能障碍越重。
1.5 病理检查。
每组各5只实验兔于血肿形成后24h取病理组织检查。实验兔MR扫描后放血处死，取脑固定于9％甲醛24h，以针道为中心，2mm层厚切片。常规石蜡包埋、HE染色。
1.6 统计学处理。