款冬花止咳有效部位和紫菀配伍“相须”部位的研究
作者：张巧真, 张燕, 张勉*, 黄芳, 窦昌贵, 金育。
【摘要】 目的观察款冬花及其有效部位与紫菀不同部位配伍后对止咳作用的影响，寻找款冬花与紫菀配伍中紫菀止咳的相须部位。方法通过小鼠氨水引咳实验观察款冬花、款冬花与紫菀配伍的止咳作用。结果款冬花、款冬花与紫菀的配伍均能减少氨水引咳小鼠的咳嗽次数，其中款冬花水提物及其90％醇沉部位止咳效果最好；配伍实验显示，紫菀30％醇提物及其90％醇溶部位与款冬并配伍后，对氨水引咳小鼠的止咳作用最为明显。结论款冬花水提物的止咳效果优于乙醇提取物；水提物中90％醇沉部位效果最好，为款冬花止咳作用的有效部位。紫菀30％乙醇提取物对款冬花止咳的增效作用优于其他溶剂；而其90％醇溶部位与款冬花配伍后止咳作用的增强效果最为显著，确定该部位为配伍中紫菀的相须部位。
Abstract：ObjectiveTo search the antitussive part of Flos Farfarae (FF) and the reinforcement part of Radix Asteris (RA) in the paired drug (compound drug) of FF and RA. MethodsEvaluating the antitussive effect by cough times of mice caused by ammonia. ResultsBoth FF and the pair—drug of FF and RA can reduce the cough times of mice caused by ammonia .The aqueous extract (AE) of FF and its part of insoluble in 90% ethanol (90%insol—part) showed the best antitussive effects. The compound group of 30% ethanol extract (30%—EE) of RA with AE of FF showed obvious effect, and the groups of the part of soluble in 90% ethanol (90%sol—part) of RA with FF (AE and 90%insol—part, respectively) also showed the best antitussive effects.Conclusion The AE of FF is more effective than its ethanol extracts, and the 90%insol—part of FF is the effective antitussive part. In compound drugs, the 30%—EE and the 90%sol—part of RA can greatly reinforce the antitussive effect of FF. According to the compatibility theory of traditional Chinese medicine, the 90%sol—part of RA should be the promotional part to FF in the paired drug.
Key words：Flos Farfarae; Antitussive part; Radix Asteris; Compatibility; Promotional part 款冬花为菊科植物款冬Tussilago farfara L.的干燥花蕾，味辛、微苦，性温，归肺经，具有润肺下气、止咳化痰之功效［1］；紫菀为同科植物紫菀(Aster tataricus L. f.)的干燥根及根茎，味辛、苦，性温，归肺经，具有润肺下气、消痰止咳之功效［1］。《本草纲目》款冬花项下记载：“得紫菀良” ［2］，紫菀项下指出“款冬为之使” ［2］，《备急千金要方》、《太平圣惠方》等古代医籍中也均有款冬花与紫菀配伍使用的记载。传统配伍理论认为，紫菀长于化痰止咳，款冬花善于宣肺气而止咳，两者伍用符合相须配伍理论，是止咳化痰的常用药对，为古今众多方剂所采用。款冬花、紫菀单味药的止咳作用研究报道较多，而对两者配伍的研究未见报道。本课题组的前期研究［3］证实了该药对的相须作用，为了探索款冬花、紫菀相须作用的物质基础，本课题分别以款冬花（止咳）和紫菀（祛痰）的主要功效为指标，分别寻找款冬花和紫菀的有效部位及其相须部位。因为款冬花偏于止咳，本论文以止咳为药效指标，对款冬花的提取溶剂和有效部位进行了研究，并与紫菀的提取物和部位进行配伍，以期寻找紫菀止咳的“相须部位”，为进而研究相须作用的物质基础提供药效学依据。
1 材料。
1.1 动物昆明种小鼠，雄性，体重18～22 g，由南京市江宁区青龙山动物繁殖场提供。
1.2 药物款冬花、紫菀均购自河北安国药材市场，经中国药科大学生药学研究室张勉教授鉴定。款冬花为菊科植物款冬Tussilago farfara L.的花蕾，紫菀为同科植物紫菀Aster tataricus L.f.的根及根茎。 款冬花分别用10倍、8倍、8倍量的水，30％乙醇，50％乙醇，70％乙醇，90％乙醇各回流提取3次（1.5，1，1 h），过滤，合并滤液，减压回收溶剂后水浴蒸干。取款冬花水提液浓缩至2∶1（溶液体积∶生药量），加入无水乙醇至浓度达60％，过滤，滤渣水浴蒸干即为60%醇沉部位；滤液继续加无水乙醇至浓度达90％，过滤，滤渣水浴蒸干即为90％醇沉部位；滤液减压回收至干，即为90％醇溶部位。 紫菀分别用10倍、8倍、8倍量的水，30％乙醇，50％乙醇，70％乙醇，90％乙醇各回流提取3次（2，1，1 h），过滤，分别合并滤液，减压回收溶剂后水浴蒸干。取紫菀30％乙醇提取液浓缩至2∶1（溶液体积∶生药量），加入无水乙醇至乙醇浓度达60％，过滤，滤渣水浴蒸干即为60%醇沉部位；滤液继续加无水乙醇至浓度达90％，过滤，滤渣水浴蒸干即为90％醇沉部位；滤液减压回收至干，即为90％醇溶部位。 文中款冬花、紫菀及配伍的剂量单位（g/kg）均为生药量。
1.3 试剂与仪器氨水，南京化学试剂有限公司，批号：070430247。咳必清，金陵药业股份有限公司利民制药厂，批号：060211。旋转蒸发仪，瑞士Buchi实验仪器公司，型号：R—2000；数显恒温水浴锅，国华电器有限公司，型号：HH—4；电子天平，型号：PL303，Matter—Toledo Group；医用数控超声仪，型号：KQ—250DE，昆山超声仪器有限公司。
2 方法。
2.1 小鼠氨水引咳实验［6］ 取雄性昆明种小白鼠，称重后随机分组，每组10只。药物组均以0.2 ml/10 g量连续灌胃给药3 d，空白对照组给予等体积的蒸馏水（滴加1滴吐温80），咳必清作为阳性对照。末次给药1h后，分别迅速向500ml宽口瓶内喷入等浓度等体积的浓氨水，密封，饱和2 min后将小鼠单只迅速放入其中。观察从放入小鼠到首次出现咳嗽的时间（潜伏期）及小鼠在2min内的咳嗽次数。
2.2 药物的配制及分组。
2.2.1 款冬花不同溶剂提取物的制备分别将款冬花的水提物、30%醇提物、50%醇提物、70%醇提物和90%醇提物配制为1 ml含250 mg生药的水溶液，各水溶液均加吐温80混悬，备用。
2.2.2 款冬花不同部位的制备分别将款冬花的60％醇沉部位、90％醇沉部位和90％醇溶部位配制为1 ml含100 mg生药的水溶液，加吐温80混悬，备用。
2.2.3 款冬花与紫菀的配伍各配伍组均按款冬花－紫菀（1∶1，生药量）配伍，总提物配伍组为将款冬花水提物分别与紫菀的水提物、30%醇提物、50%醇提物、70%醇提物和90%醇提物混合配制为1 ml含75 mg生药的水溶液，加吐温80混悬，备用；部位配伍组为将款冬花水提物及其有效部位分别与紫菀60％醇沉部位、90％醇沉部位和90％醇溶部位混合配制为1 ml含125 mg生药的水溶液，加吐温80混悬，备用。
2.3 统计学处理实验数据采用T检验，P＜0.05表示差异有统计学意义。