脱镁叶绿酸分离及与萘普生交联物的制备
【摘要】 目的分离纯化脱镁叶绿酸，将脱镁叶绿酸与萘普生交联，合成一种易于在体内释放的新化合物。方法 以丙酮提取，乙醚萃取，盐酸脱镁，从中药蚕砂中分离出脱镁叶绿酸。用二氯亚砜将萘普生酰氯化，在氮气保护下与脱镁叶绿酸交联，以硅胶柱层析分离产物。以高效液相色谱（HPLC）测定其纯度，以红外光谱判断其交联成功性。结果HPLC测定其纯度为98％，红外光谱显示脱镁叶绿酸和萘普生形成了酸酐交联。结论脱镁叶绿酸与萘普生的交联反应是可行的。
Abstract：ObjectiveTo purify Phaephorbide from silkworm droppings, synthesize a new compound easily dissected in vivo through the conjugation of Phaeophorbide and Naproxen. MethodsPhaephorbide was extracted by acetone, ether and hydrochloric acid step by step from silkworm droppings. Naproxin was treated by thionyl chloride, then conjugated to Phaeophorbide under protection of N2. The compound was purified by silica gel column. Its purity was determined by HPLC, its structure was judged by IR. ResultsThe purity of compound was 98%. IR showed Naproxin was conjugated to Phaeophorbide in acid anhydride.ConclusionIt is practicable that conjugated reaction takes place among Naproxin and Phaeophorbide.
Key words：Phaeophorbide; Naproxin; Conjugated reaction。
脱镁叶绿酸(Pheophorbide)是由叶绿素分子脱去镁离子后进一步水解而形成的化合物，具有显著的抗炎、抗肿瘤、保护胃肠粘膜等药理作用［1］。萘普生(Naproxin)是一种非甾体解热抗炎镇痛药物，但对胃肠道具有一定刺激作用［2］。基于该两种物质特性，设计脱镁叶绿酸与萘普生的交联化合物，使之在体内易于释放。两者共同作用，既提高药物的抗炎镇痛作用效果，又减少药物的副作用。此类化合物研究尚无报道。本实验从中药蚕砂中分离出脱镁叶绿酸，并利用二氯亚砜中间导合［3］，设计了脱镁叶绿酸与萘普生的交联物的合成。
1 仪器与试剂。
1.1 仪器 HPLC，Agilent 1100，美国安捷伦公司制造；傅立叶变换红外光谱仪EQU1NOX55，德国Bruker公司；薄层层析硅胶板，青岛海洋化工厂；旋转蒸发仪RC—52型，上海亚荣生化仪器厂。
1.2 试药 蚕砂，广州同仁堂医药公司；萘普生，广州市东红化工厂；二氯亚砜、丙酮、甲醇等均为分析纯。
2 方法。
2.1 脱镁叶绿酸的制备 参照文献［4］方法，取中药材蚕砂150 g，加水软化2 h，取丙酮420 ml，在70 ℃回流提取80 min，抽滤，保留滤液，向滤渣中加入100 ml蒸馏水，250 ml丙酮，在70℃下回流提取约70 min，抽滤，合并滤液，用旋转蒸发仪在50 ℃下蒸出丙酮。将浓缩液用100 ml乙醚分多次洗涤后，移至1 000 ml容量的分液漏斗，加入200 ml乙醚，150 ml 30%HCl萃取制备(剧烈振摇5 min左右)，静置分离。保留下层水溶液，放入冰水浴中用饱和NaOH溶液调pH至2.5～3，期间必须不断地快速搅拌，析出沉淀即为脱镁叶绿酸。将脱镁叶绿酸在60℃下真空烘干至粉末状，得脱镁叶绿酸2 g，提取率为1.33%。
2.2 脱镁叶绿酸与萘普生的合成反应 称取800 mg脱镁叶绿酸粉末，加入25 ml丙酮充分溶解，再加入500 mg萘普生搅拌使之溶解。缓慢通入氮气保护，滴加10 ml二氯亚砜(SOCl2)，充分搅拌并缓慢加热至65℃，冷凝回流反应2 h，生成墨绿色液体。在50℃水浴温度下，利用旋转蒸发仪减压除去溶剂和过量的氯化亚砜，得产物1 250 mg。
2.3 硅胶柱层析纯化 将合成反应产物1 000 mg，硅胶柱层析，洗脱液正己烷∶丙酮=3∶2。薄层跟踪，收集相同组分，浓缩干燥，获得纯化产物510 mg。
2.4 HPLC纯度测定 采用文献［5］方法。色谱柱cosmosil (250 mm×4.6 mm, 5 μm)，流动相为甲醇∶甲酸（10∶0.1），进样量10 μl，流速1.000 ml/min， 26.0℃，检测波长400 nm。
2.5 IR分析 取纯化产物与KBr混合压片，进行IR扫描。