野葡萄根、猕猴桃根对高脂血症大鼠血脂等影响的实验研究

作者：吴大梅，万安霞，杨长福，张小容，樊同涛，徐中贵，俞昌琪。

【摘要】 目的观察高脂血症大鼠应用野葡萄根、猕猴桃根治疗后血清中血脂的变化及一氧化氮(NO)和内皮素(ET)的水平，以探讨野葡萄根、猕猴桃根治疗高脂血症的机理。方法将55只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组，高脂模型组，野葡萄根、猕猴桃根组［8 g/（kg·d）］、复方葡猕汤组［11 g/（kg·d）］和辛伐他汀组［0.1 mg/（kg·d）］,每组11只，观察6周。实验中监测各组大鼠血脂及血清中NO和ET的含量。结果野葡萄根、猕猴桃根治疗组的血脂水平较高脂模型组明显降低( P 0. 05) ；血清中NO明显升高，而ET含量明显降低(P0.05，P0.01)。结论野葡萄根、猕猴桃根能明显降低血脂，提高血清中的NO水平并降低ET的水平。NO和ET的变化可能是其保护高脂血症大鼠血管内皮功能的重要机制之一，证实野葡萄根、猕猴桃根在治疗高脂血症及高血压病过程中起到一定的作用。

【关键词】 野葡萄根；猕猴桃根；高脂血症；一氧化氮；内皮素。

Abstract：ObjectiveTo evaluate the changes of serum lipids、 nitric oxide (NO) and endothelin (ET) after treatment with wild grape root and Kiwi root in rats fed with hypercholesterol emulsion. Methods55 male Wistar rats were randomly divided into control group ( n = 11 , normal diet) , hyperlipidemia group (n=11 , high—cholesterol emulsion ) and Chinese medicine group (every group n = 11, high—cholesterol emulsion plus corresponding Chinese medicine : (8g/kg/d , 11g/kg/d,). Western medicine group(n = 8 , high—cholesterol emulsion plus simvastatin). During 6 weeks of the experiment , serum lipids were compared among the 5 groups., the levels of NO and ET in serum were also measured. ResultsAfter 6 weeks of treatment with Ye Putao root and Kiwi root , the levels of serum lipids were all decreased as compared with hyperlipidemia group (all P0.05); the NO level in serum was increased significantly , while the ET level was markedly decreased as compared with hyperlipidemia group (P 0. 05,0.01) . Conclusion Wild grape root、Kiwi root could effectively decrease the level of serum lipids, increase NO and decrease ET. The changes of NO and ET may play a role in the progress of hyperlipidemia. It confirmed that wild grape root and Kiwi root have certain effect on the hyperlipidemia and hypertension.

Key words：Wild grape root； Kiwi root ; Hyperlipidemia; Nitric oxide ; Endothelin 　　据调查，民间用野葡萄根、猕猴桃根、葛根治疗高脂血症及高血压病，并取得一定疗效。葛根为常用中药，具有扩血管、促进微循环作用，而野葡萄根、猕猴桃根为贵州苗药，它们在治疗过程中有何作用尚未见报道。为探索这两味药材治疗高脂血症的机理，我们对高脂血症大鼠用相关的各种药物进行治疗，并观察治疗后大鼠血清中TC、TG浓度的变化，比较治疗前后各组大鼠血清中ET、NO的含量。现报道如下。

1 材料与方法。

1.1 药物、试剂、仪器。

复方葡猕汤为民间验方,由野葡萄根、猕猴桃根、葛根等组成；葡猕汤组成：野葡萄根、猕猴桃根。药材均购于贵阳市药材公司，按传统方法煎煮过滤，4℃冰箱保存备用。胆固醇(上海山浦化工有限公司)；三号胆盐（杭州微生物试剂有限公司）；丙硫氧嘧啶片(上海复星朝晖药业有限公司)；吐温—80(重庆川江化学试剂厂)；总胆固醇(TC)试剂盒（温州津玛生物科技有限公司）；甘油三脂(TG)试剂盒（温州津玛生物科技有限公司）；一氧化氮试剂盒（南京建成生物工程研究所）；内皮素试剂盒(上海卓康生物科技有限公司)。全自动生化分析仪（GLAMOUR1600），阿根廷S.A公司；分光光度计（721B），上海精密仪器仪表公司；普通离心机（TDL—5A），湖南星科科学仪器有限公司；低速自动平衡微型离心机（LD24—0.8A），北京医用离心机厂；自动酶标读数仪（ELx808IU），美国Bio Tek；二氧化碳培养箱（LRH—250A），广东医疗器械厂；鼓风干燥箱（型号：101—1），上海实验仪器总厂；恒温水浴锅（HH—S），江苏振兴仪器厂；电子天平（JA5003），上海天平仪器厂。

1.2 动物来源、分组、给药。

健康雄性Wistar 老龄大鼠55只，体质量（300±20）g，由贵阳中医学院实验动物研究所提供。适应性饲养1周后，随机分为5组，每组11只，分别为：正常空白对照组（简称正常对照组），高脂乳剂模型组（简称高脂模型组），野葡萄根、猕猴桃根组［8g/（kg·d），简称葡猕组］，复方葡猕汤组［11g/（kg·d），简称复方组］，辛伐他汀组［0.1mg/（kg·d），简称西药组］。除正常对照组外，余各组造模。造模成功后，给药组每天分别灌胃相应浓度药物3ml/300g；正常对照组、模型组灌胃3ml/（300g·d）的生理盐水。6周后做各项指标检测。在实验过程中，有7只大鼠因灌胃不当及腹泻原因死亡，高脂模型组、复方组各2只，葡猕组、对照组及辛伐他汀组各1只。

1.3 造模方法参照文献［1］。

方法制备高脂乳剂,即6%胆固醇、15%猪油、2%胆盐、0.2%甲基硫氧嘧啶、20%吐温—80加水至100%制成脂肪乳。除正常对照组外,其余各组均以高脂乳剂［10ml/（kg·d）］灌胃，1次/d,连续灌服2周,建立高脂血症模型。在明确造模成功后，给药组分别灌服相应浓度药物3ml/（300g·d）；正常对照组、模型组灌胃3ml/（300g·d）的生理盐水。6周后，各组动物股动脉取血，依据所测指标作不同的处理，分离血清，分别测定血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、一氧化氮（NO）、内皮素（ET）的含量。

1.4 实验室检测。

1.4.1 血液样品的采集与处理。

灌药4周，各组大鼠末次给药后禁食12 h，股动脉取血,分别装入10 ml塑料离心管中,用离心机3 000 r/min离心10 min，分别吸取血清，做好标记，—20℃保存待测。

1.4.2 检测方法血脂的检测：TG、TC检测采用酶法。 　　血清NO、ET的检测：NO含量的检测采用硝酸还原酶法；ET含量的检测采用酶联免疫法；血清NO、ET的检测严格按照试剂盒说明书操作。

1.5 统计学处理。

用SPSS11.5统计软件进行数据处理，实验结果以±s表示，组间比较采用单因素方差分析（经检验，符合正态分布和满足方差齐性，选用LSD法），以P0.05为有统计学意义。