二维三七桂利嗪胶囊对急性脑缺血的保护作用
作者：肖湘华，邓秀玲，王燕，刘俊田，王竹筠;。
摘要：目的; 观察二维三七桂利嗪胶囊对于急性脑缺血的影响。方法; ICR小鼠分别用420mg/kg、210mg/kg、105mg/kg的二维三七桂利嗪胶囊灌胃10d，观察断头后小鼠的喘息时间；SD大鼠分别用292mg/kg、146mg/kg、73mg/kg的二维三七桂利嗪胶囊灌胃10d，线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型，然后进行神经行为指标评分、脑梗死范围测定和病理学观察。结果; 二维三七桂利嗪胶囊各剂量组均能延长小鼠断头后的喘息时间，缩小局灶性脑缺血大鼠脑梗死范围，改善神经症状，减轻光镜下脑组织缺血性损伤。结论; 二维三七桂利嗪胶囊对急性脑缺血损伤具有保护作用。 毕业论文。
关键词：二维三七桂利嗪胶囊；急性脑缺血；神经保护作用 ABSTRACT: Objective; To investigate the effects of divitamins notonginseng and cinnarizine capsule(DNCC) on acute cerebral ischemia. Methods; ICR mice were administered three doses of DNCC(420, 210, and 105mg/kg; ig.) for ten days, then the gasping time after decapitation was recorded. After three doses of DNCC(292, 146, and 73mg/kg; ig.) were given respectively for ten days in rats, the effects of DNCC on the infarct size, histological changes and neurological function scores caused by focal cerebral ischemia which was induced by middle cerebral artery occlusion were investigated. Results; DNCC prolonged the gasping time of mice after decapitation and improved the neurological function scores, cerebral ischemia injury and decreased the infarct size in rats. Conclusion; DNCC has a protective effect against acute cerebral ischemia. 毕业论文。
KEY WORDS: divitamins notonginseng and cinnarizine capsule; acute cerebral ischemia; neuroprotective effect。
毕业论文。
二维三七桂利嗪胶囊(divitamins notonginseng and cinnarizine capsule, DNCC)是由桂利嗪、三七总皂苷、维生素E和维生素B6组成的中西药复方制剂，临床主要用于治疗缺血性脑血管病。实验证明钙通道阻滞剂能对抗缺血后脑内的低氧高糖状态，缩小脑梗死范围。三七总皂苷能减少大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)术后24h脑梗死范围，改善神经功能障碍及行为异常，减轻脑水肿，明显提高SOD活力，减轻脑梗死区的炎症反应。维生素E能提高缺血后机体的抗氧化能力，缩小脑梗死范围。但以上述成份组成的药物――DNCC对于脑缺血的影响尚未见报道。我们选择DNCC作为受试药物，分别采用小鼠断头法和线栓法诱导大鼠MCAO造成急性脑缺血模型，观察DNCC对于急性脑缺血的影响。 毕业论文。
1; 材料与方法 毕业论文。
1.1; 动物、药品与试剂; ICR小鼠，雌雄各半，体重18—22g；SD大鼠，雄性，体重200—300g，均由西安交通大学医学院实验动物中心提供。自然光周期饲养，大鼠术前8h禁食，自由饮水。二维三七桂利嗪胶囊(DNCC)，批号为030608；单组份桂利嗪(cinnarizine)，批号030651；单组份参三七提取物(extracts of panax notoginseng, EPN)，内含三七总皂苷54.46%，批号030506，以上药品均由丽珠集团丽宝生物化学制药有限公司提供。桂利嗪胶囊(cinnarizine capsule, CC)，批号011001，丽珠集团利民制药厂生产。2，3，5三苯基氯化四氮唑(TTC)，批号F20030102，中国医药集团上海化学试剂公司生产。水合三氯乙醛，批号000530，北京市旭东化工厂生产。 毕业论文。
1.2; 仪器; GPS型双极电凝器，上海医用激光仪器厂生产；FA1004型电子天平，上海精密科学仪器有限公司生产；SHHW21420型三用电热恒温水浴箱，天津泰斯特仪器有限公司生产。 毕业论文。
1.3; 对小鼠脑缺血后存活时间的影响; ICR小鼠随机分为11组，每组13或14只，分别为阴性对照组(control)，阳性对照组(CC 390mg/kg)，大、中、小剂量DNCC组(DNCC 420mg/kg，210mg/kg，105mg/kg)，与DNCC大、中、小剂量相当的三个剂量的单组份桂利嗪组(cinnarizine 36mg/kg，18mg/kg，9mg/kg)和与DNCC大、中、小剂量相当的三个剂量的单组份参三七提取物组(EPN 72mg/kg，36mg/kg，18mg/kg)。各组分别以蒸馏水、桂利嗪胶囊(390mg/kg，相当于桂利嗪原料药45.5mg/kg)、大剂量(420mg/kg)、中剂量(210mg/kg)、小剂量(105mg/kg)的DNCC、与DNCC大、中、小剂量相当的三个剂量的单组份桂利嗪(分别为36mg/kg、18mg/kg、9mg/kg)及与DNCC大、中、小剂量相当的三个剂量的单组份参三七提取物(分别为72mg/kg、36mg/kg、18mg/kg)灌胃，连续10d，于末次给药后1h用剪刀在小鼠耳后2mm处快速断头，使头落到预热至37℃的水浴箱上，记录张口喘气的维持时间。
毕业论文。
1.4; 大鼠分组及脑缺血模型的制作; SD大鼠随机分为假手术组(sham)、模型对照组(model control)、阳性对照组(CC 270mg/kg，相当于原料药31.5mg/kg)、DNCC大剂量组(DNCC 292mg/kg，含桂利嗪原料药25mg/kg)、中剂量组(DNCC 146mg/kg)、小剂量组(DNCC 73mg/kg)及与DNCC大剂量相当的单组份桂利嗪组(cinnarizine 25mg/kg)，每组8—13只动物。连续灌胃10d，于末次给药后1h参考Longa等建立的方法，腹腔注射水合三氯乙醛(0.3mg/kg)麻醉大鼠，分离颈部各动脉，将头端光滑呈鼓锤状的4—0单丝尼龙线由左颈总动脉缓慢插入左颈内动脉颅内段，线栓插入深度由颈内动脉起始处算起约18—22mm，稍感阻力即止。假手术组将线栓插入翼腭动脉。模型成功的标志为: 动物清醒后出现以右前肢为主的偏瘫。术后未出现神经功能缺失体征或24h内死亡者剔除。 毕业论文。
1.5; 神经行为指标评分; 大鼠于术后8h进行神经行为学评分：①提鼠尾离地面约一尺，观察前肢情况。正常大鼠两前肢对称地伸向地面。有右肩内旋，右前肢内收者，评为4分。否则0分。②将大鼠置平滑地面上，分别推左(或右)肩向对侧移动，检查抵抗推力的阻力。正常大鼠双侧阻力明显对称。左肩向右侧移动时，发现阻力下降者，根据下降的程度不同，评为0—3分。③将大鼠两前肢置一金属网上，观察两前肢的肌张力。正常大鼠两前肢肌张力明显对称。发生右前肢肌张力下降者，根据下降的轻重，评为0—3分。根据以上评分标准，满分为10分，分数越高表明其神经行为障碍就越严重。
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1.6; 脑梗死范围的测定; 于术后24h处死大鼠开颅取脑，将新鲜全脑冠状切面等分为6片，于37℃水浴中10g/L的TTC磷酸缓冲液染色20min后，用FA1004型电子天平称其质量，计算脑梗死范围。脑梗死范围＝(梗死区重量/全脑重量)×100%。
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1.7; 脑组织病理检查; 于MCAO 24h 处死大鼠开颅取脑，用200mL/L甲醛将标本固定，将大脑冠状切面等分为6片，取第三脑片梗死侧石蜡包埋，切片，HE染色，光学显微镜下观察病理改变。 毕业论文。