芦荟对小鼠恶性腹水模型的影响
作者： 陈丽宏，路凡，沈新，陈葳，李旭，黄剑峰，杨春荣。
Effect of Aloe on rat models of malignant ascites。
【Abstract】 AIM: To investigate the effect of Aloe, a kind of traditional Chinese drug, on the rat models of malignant ascites. METHODS: The malignant ascites model of Balb/c rat was induced by S180 cells and then was treated with the different doses of whole leaf, gel and peel of Aloe for 2 weeks. The therapeutic effect was evaluated by comparing the change of rat body mass, protein content in ascite and changes of S180 cell cycle in the rats. RESULTS: The Aloe delayed the rapid increase of the body mass in rat models（P0.05）and decreased the albumin in ascites（P0.05）. The analysis of cell cycle displayed that the G1 phase cells were decreased and the S phase cells were increased in the Aloe treatment group compared with those in the blank group. CONCLUSION: Aloe showsa great potential in the treatment of malignant ascites.
【Keywords】 Aloe; mice, inbred BALB C; malignant ascites; cell cycle。
【摘要】 目的: 探讨中药芦荟对小鼠恶性腹水模型的影响. 方法： 将S180细胞接种于Balb/c小鼠腹腔，制备小鼠恶性腹水模型；分别用芦荟全叶汁、凝胶汁、皮汁的不同剂量组灌胃治疗2 wk，同时设阳、阴性对照；检测治疗前后小鼠的体质量、腹水蛋白质含量的变化，用流式细胞仪分析腹水中S180细胞的细胞周期变化. 结果： 芦荟全叶汁、凝胶汁、皮汁的高、低剂量组均可使模型小鼠体质量的快速增长减缓（P0.05）、腹水中白蛋白含量减少（P0.05）；S180细胞周期中： G1期细胞减少，S期细胞增多，与未治疗组比较有统计学差异（P0.05）. 结论： 芦荟对恶性腹水的治疗有良好的应用前景.
【关键词】 芦荟；小鼠，近交BALB C；恶性腹水；细胞周期。
0引言 芦荟是百合科多年生、常绿、肉质草本植物. 作为一种天然药用植物，具有杀菌、抗炎、免疫、抗肿瘤、解毒等多种作用. 恶性腹水可出现腹胀、胃纳下降，甚至呼吸困难等症状. 本文旨在探讨芦荟对恶性腹水的影响，以探讨芦荟对治疗恶性腹水的可能性.
1材料和方法。
1.1材料。
S180肉瘤细胞株（腹水型肉瘤细胞），西安交通大学第一医院分子生物学中心提供，常规在体培养传代，定期抽取腹水，离心弃上清后加入冻存液，液氮冻存. Balb/c小鼠48只，全部为雌性，体质量18~22 g，由第四军医大学实验动物中心提供. 环磷酰胺，由上海华联制药有限公司生产，批号： 000211. 芦荟凝胶汁，将芦荟鲜叶清洗后在无污染条件下剥皮，剥皮后的凝胶捣碎、减压过滤，取过滤液备用. 芦荟皮汁，将芦荟鲜叶清洗后在无污染条件下剥皮，取皮层捣碎、减压过滤，保留过滤液备用. 芦荟全叶汁，将芦荟凝胶汁和芦荟皮汁均匀混合. 日立7170型全自动生化分析仪，西安交通大学第一医院检验中心提供，用于蛋白测定. 流式细胞仪，美国Colllter公司生产，西安交通大学第一医院分子生物学实验中心提供，用于细胞周期测定.
1.2方法。
1.2.1小鼠恶性腹水模型将S180肉瘤细胞复苏后用生理盐水稀释成1∶4的混悬液，无菌条件下注射到小鼠腹腔，每鼠注入0.2 mL，制备小鼠恶性腹水模型.
1.2.2灌胃小鼠腹腔注射S180肉瘤细胞3 d后给与灌胃治疗. 将48只Balb/c小鼠随机分为全叶汁高剂量组（A1组），全叶汁低剂量组（A2组），凝胶汁高剂量组（B1组），凝胶汁低剂量组（B2组），皮汁高剂量组（C1组），皮汁低剂量组（C2组），药物对照组（D组）和空白对照组（E组）共8组，每组6只. A1亚组、B1亚组、C1亚组分别灌服芦荟凝胶汁、芦荟皮汁和芦荟全叶汁，20 mg/kg；A2亚组、B2亚组、C2亚组分别灌服生理盐水稀释过的芦荟凝胶汁、芦荟皮汁和芦荟全叶汁（生理盐水占2/3，芦荟浸出液占1/3），20 mg/kg；D组灌服环磷酰胺，20 mg/kg，E组灌服生理盐水，20 mg/kg，均为1次/d， 14 d.
1.2.3指标15 d时处死小鼠，称量体质量. 无菌条件下抽取腹水，一部分用全自动生化分析仪测定蛋白总量、白蛋白、球蛋白、A/G比值. 另一部分用流式细胞仪检测： 1000 r/min离心5 min，弃上清；3 mL PBS洗涤1次，离心去除PBS；加入冰预冷的700 mL/L的乙醇固定，4℃, 1~2 h；离心弃去固定液，3 mL PBS重悬5 min；400目的筛网过滤1次，1000 r/min离心5 min，弃去PBS；用碘化丙啶（PI）染液1 mL染色，4℃避光30 min；上机检测腹水中S180细胞的细胞周期.统计学处理： 实验结果采用完全随机设计的方差分析,均数两两比较采用Dunnett检验. 以α=0.05为检验水准，通过SPSS 11.5数据统计软件计算结果.