PTTG， c—myc和p53在非小细胞肺癌中的表达及意义
【摘要】 目的： 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)中PTTG,c—myc和p53的表达及其与NSCLC发生发展之间的关系。方法： 用免疫组化法测定60例NSCLC标本及27例正常肺组织中PTTG， c—myc和p53的表达。结果： NSCLC组织细胞中PTTG， c—myc和p53的阳性表达率明显高于正常肺组织（P0.01）。在不同组织学类型间阳性表达率差异无统计学意义（P0.05），PTTG和c—myc在不同分化程度肺癌间的阳性表达率差异有统计学意义（P0.05），淋巴结是否转移PTTG和c—myc的阳性表达率差异也有统计学意义（P0.05）。PTTG与c—myc, PTTG与p53阳性表达率呈显著正相关（P0.01），c—myc与p53阳性表达率也呈显著正相关（P0.05）。 结论： PTTG, c—myc和p53在NSCLC中有较高表达，有可能作为评估预后、指导治疗的指标。
【关键词】 非小细胞肺癌； 垂体肿瘤转化基因； c—myc； p53。
［Abstract］ Objective: To investigate the relationship between the expression of PTTG,c—myc and p53 and their role in occurance and development of non—small cell lung carcinoma. Methods： The expression of PTTG, c—myc and p53 was detected immunohistochemistrically in 60 cases of non—small cell lung carcinoma and 27 cases of normal lung tissue. Results： There was an extensive expression of PTTG, c—myc and p53 in tumor cell（P0.01）; difference was not found in groups of histology（P0.05）. The expression of PTTG and c—myc in tumor cell was both correlated with differentiated degree of lung cancer(P0.05); in non—small cell lung carcinoma with lymph node metastasis， there was a significant difference(P0.05); the positive expression of PTTG,c—myc and PTTG, p53 in non—small cell lung carcinoma had a striking positive correlation respectively(P0.01). The positive expression of c—myc and p53 also had a striking positive correlation(P0.05). Conclusion： The results indicate that PTTG,c—myc and p53 participate in occurrence and development of non—small cell lung carcinoma, and it may be the index of the prognosis appraisal and the therapeutic guidance.
［Key words］ non—small cell lung carcinoma; pituitary tumor transforming gene(PTTG); c—myc; p53。
目前，肺癌已是我国死亡率最高的恶性肿瘤。非小细胞肺癌(non—small cell lung carcinoma,NSCLC)占所有肺癌的60%～80%。由于肺癌的早期浸润和转移，预后较差。近年来人们对NSCLC的发病机制及其特异因子表达的研究在不断深入, 以期寻找有效的早期诊断及治疗靶点。本实验检测了垂体肿瘤转化基因（pituitary tumor—transforming gene,PTTG）,c—myc和p53在NSCLC中的表达，旨在探讨三者之间及与NSCLC发生发展的关系。
1 材料与方法。
1.1 材 料 标本随机取自江苏大学附属人民医院胸外科2004年1月～2006年12月间经肺部手术切除的存档蜡块87例，NSCLC 60例，正常对照肺组织27例；其中鳞癌34例，腺癌26例；高分化、中分化、低分化分别为14,21,25例；男36例，女24例；年龄38～76岁，平均57.5岁。所有病例均作淋巴结检测，其中转移者28例。所有研究对象术前均未接受放疗、化疗。
1.2 实验方法 免疫组化采用EnVisionTM法。主要试剂：EnVision免疫组化试剂盒为DAKO公司产品，羊抗人PTTG抗体和鼠抗人p53抗体为Santa Cruz产品，鼠抗人c—myc抗体购自北京中山生物技术有限公司，多聚赖氨酸、PBS、柠檬酸缓冲液均购自福州迈新生物技术公司。操作严格按照说明书规定进行。购买抗体公司提供的阳性片作为阳性对照，PBS代替一抗作阴性对照。
1.3 结果判断 PTTG和c—myc蛋白阳性反应为细胞质和细胞核出现棕黄色或棕褐色颗粒, p53蛋白阳性反应为细胞核内出现棕黄色或棕褐色颗粒。采用染色指数法计算阳性结果，综合考虑阳性细胞百分数和染色强度两个方面。在100倍显微镜下随机选取5个高倍视野，计算肿瘤细胞中阳性细胞百分数，将阳性细胞百分数在0%～5%之间转换为0分，5%～25%转换为1分，26%～50%转换为2分，51%～75%转换为3分，76%以上转换为4分；染色强度计算方法，肿瘤细胞不着色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分，如在同一病变中存在不同评分标准的视野，则取最大值和最小值的平均值作为其染色指数评分。上述两项之和即为该肿瘤细胞的染色指数评分，染色指数0～2分定义为阴性表达，3～7分定义为阳性表达。
1.4 统计学处理 应用SPSS11.0软件进行卡方检验和Spearman等级相关分析，P0.05为有统计学意义。
2 结果。
2.1 PTTG, c—myc和p53在肺癌组织中的表达 PTTG， c—myc和p53在肺癌组织中表达较为广泛。PTTG和c—myc阳性颗粒位于细胞质、细胞核，呈棕黄或棕褐色。肺鳞癌中PTTG 和c—myc 主要表达在细胞核， PTTG 和c—myc在腺癌中主要分布在细胞质。癌组织中阳性细胞呈弥漫性、巢状分布。肺癌组织p53阳性颗粒位于细胞核内，为棕黄色至棕褐色，阳性细胞呈弥漫性、局限性或散在性分布。PTTG, c—myc和p53蛋白在肺癌组织中的阳性表达率均高于正常肺组织（P0.01），见表1。 表1 PTTG, c—myc和p53在NSCLC及正常肺组织中的表达（略）。
Tab 1 Expression of PTTG, c—myc and p53 in non—small cell lung carcinoma and normal lung tissue。
2.2 PTTG, c—myc和p53的表达与NSCLC临床病理特征的关系 经χ2检验,PTTG, c—myc和p53在肺鳞癌细胞、腺癌细胞中的阳性表达率差别无统计学意义（P0.05）。PTTG,c—myc在不同分化程度肺癌中的阳性表达率差别有统计学意义（P0.05）,而p53在不同分化程度肺癌中阳性表达差别无统计学意义（P0.05）。PTTG, c—myc在淋巴结有转移的肺癌细胞中阳性表达率明显高于无转移者，差别有统计学意义（P0.05）,而p53在两者间的阳性率差别无统计学意义（P0.05）,见表2 。 2.3 PTTG, c—myc和p53之间表达相关性 经Spearman等级相关分析NSCLC中PTTG阳性表达与 c—myc呈显著正相关(r=0.516,P0.01)。PTTG阳性表达与p53呈显著正相关(r=0.418,P0.01)。c—myc阳性表达与p53呈显著正相关(r=0.309,P0.05)。