注射用复方荭草冻干粉针剂对兔离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用
作者：陶玲 沈祥春 王永林 方泰惠。
【关键词】 注射用复方荭草冻干粉针剂；,,家兔；,,缺血再灌注。
摘要：目的观察注射用复方荭草冻干粉针剂( FFHC )对离体家兔心脏缺血再灌注损伤的作用。方法采用离体兔心脏Langendorff灌流，使心脏停灌45min后复灌，模拟缺血再灌注损伤。以冠脉灌注量、灌注液LDH与CK、以及病理组织学检查为检测指标。结果FFHC高、中剂量组对心脏缺血再灌注损伤具有明显的保护作用，能提高缺血再灌注心脏的冠脉灌注量，抑制缺血再灌注损伤心肌CK和LDH外漏，拮抗缺血再灌注所造成的心肌的组织学损伤。结论FFHC对心肌缺血再灌注损伤具有一定的保护作用。
Protective Effects of FuFangHongCao Freeze—dried Powder Injection on Rabbit Heart IschemiaReperfusion Injury in vitro。
Abstract：ObjectiveTo investigate the effects of FuFangHongCao Freeze—dried Powder Injection (FFHC) on rabbit heart ischemia—reperfusion injury in vitro. MethodsTo simulate the ischemia—reperfusion model by blocking perfusion for 45 min, and then reperfusion on rabbit heart with Langendorff perfusion installation in vitro. The flux liquid of coronary artery, LDH and CK activities of perfusion liquid, and pathological histology were assayed.ResultsGroups of high and medium dose of FFHC significantly enhanced the flux liquid of coronary artery of ischemia, inhibited the CK and LDH activities of perfusion liquid, and improved the pathological histology of ischemia—reperfusion.ConclusionFFHC can protect the heart injury induced by ischemia—reperfusion.
Key words：FuFangHongCao freezedried Powder Injection; Rabbit; Cardiac ischemiareperfusion 注射用复方荭草冻干粉针剂(FuFangHongCao Freeze—dried Power Injection，FFHC)系贵阳医学院药剂学教研室根据传统苗族用药理论，结合现代制药技术及活性分析的技术与方法，研制出以贵州地产药材荭草为主药的治疗胸痹心痛的中药新药。前期的研究结果证实，其具有改善冠脉循环、降低心肌耗氧量、减轻实验性心肌缺血损伤，提示其可能具有保护心肌拮抗缺血—再灌注损伤的作用。本研究采用阻断离体家兔心脏冠脉血流45 min后复灌，模拟缺血再灌注损伤模型，从心肌酶的漏出、冠脉流量及心肌病理组织学检查等方面观察复方荭草冻干粉针剂的对心肌缺血再灌注损伤的保护作用。
1 材料。
1.1 药品及试剂注射用复方荭草冻干粉针剂 ( FFHC )为棕黄色粉末，100 mg(9 g生药)/支，由贵阳医学院药剂教研室研制，试验前用0.9%的氯化钠注射液配制成所需浓度。复方丹参注射液，规格4 g(生药)/2 ml/支，上海第一生化药业公司上海第一制药厂生产。乳酸脱氢酶(LDHL)试剂盒，肌酸激酶(CK)试剂盒，中生北控生物科技股份有限公司。
1.2 仪器 FA2104上皿电子天平，上海天平仪器厂；Vitalab 200型全自动生化分析仪，荷兰vital scientific公司；BT01100型恒流泵，保定兰格恒流泵有限公司；二道生理记录仪，成都仪器厂。
1.3 动物青紫兰家兔，雌雄各半，体重2.0~2.4 kg，均由南京中医药大学动物中心提供，动物合格证号：SYXK(苏)20020053。
1.4 统计方法所有资料采用studentt检验；P0.05为差异具有显著性，P0.01差异具有极显著性。变化率%=（X给药后X给药前）/X给药前×100%X给药后为给药后观测值，X给药前为给药前观测值。
2 方法与结果。
2.1 方法［1,2］ 家兔，体重2.0~2.4 kg，随机分为5组，每组8只，即：模型组、阳性药物组(复方丹参注射液， 3.6(生药量)/kg，下同)、FFHCⅠ( 2.2 g/kg)，Ⅱ(4.4 g/kg)，Ⅲ(8.8 g/kg) 3个剂量组。动物耳缘静脉注射肝素，15 min后击毙处死，开胸，将心脏迅速取出，移至贮有冷Locke灌流液的培养皿中，尽量洗出心脏血液，修剪后，在液面下迅速把主动脉接于灌流的套管上，并以线结扎固定。立即以通入95%的O2和5%CO2的Locks液进行灌流。灌流瓶高距心脏50~60 cm，灌流液温度保持（38.0±0.5）℃。三根电极分别插于左右心耳和心尖部，连于二道生理记录仪，持续心电监测。心脏复跳及ECG显示正常后，稳定15 min，再进行实验，该期间出现心律失常者弃去。造模采用停灌拟缺血再复灌损伤：关闭主动脉套管，使心脏停灌而致心肌缺血，45 min后松开套夹，恢复自然灌流。药物加入到灌流液中，于复灌开始5 min内灌完。
2.2 冠脉灌注量的测定在心脏下用漏斗和量筒收集流出液，记录流出液量，即为冠脉流量。停灌前，连续3次测量每分钟灌流液的流出量，以其平均值作为给药前的正常灌注量。复灌后，于5，10，15，30，45，60 min时记录冠脉灌注量。
2.3 灌出液生化测定生化仪测定灌出液中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)的活力。
2.4 组织形态学检查 实验结束后，取心脏，于10%福尔马林溶液中固定，常规取材、染色、切片，在光学显微镜下作病理组织学检查。