混合质控菌种盲样的鉴定分析
张春鹏摘 要目是通盲样考核提升实验室微生物检测能力和质量管理水平依据食品卫生微生物学检验标准GB 789及评审专提供《致病菌鉴定作业指导》进行检验。
结表明盲样样品检出鼠伤寒沙门氏菌（[5]）和金黄色葡萄球菌次混合菌种鉴定项目取得了满实验结。
通参加实验室盲样考核检验人员提高了身检测水平增加了检测结可靠性。
关键词微生物 盲样 鉴定 质控 引言微生物盲样考核是对检测人员技能、实验室质量控制和管理水平检验实验室专业技术人员必须考虑实验室设备、培养基、试剂、诊断血清等因素从接种、培养、分离鉴定等环节进行严格质量控制减少主观因素对检验结影响进而保证检验结准确性。
实验评审程特别是现场评审盲样测试方式可以更直接地反映被评审实验室仪器设备和技术素质实际水平[]。
盲样有两种或以上菌株且食品检测常见致病菌要终报告得出结是所有检出菌种名称。
培养基及试剂培养基和细菌生化鉴定管广东环凯微生物科技有限公司；沙门氏菌诊断血清（60种）宁波天润生物药业有限公司；标准菌株国工业微生物菌种保藏管理心；以上试剂有效期。
3 主要仪器电热恒温水浴锅（ZK）北京市永光明医疗仪器有限公司；生化培养箱（X300B）上海新苗医疗器械制造有限公司；厌氧培养箱（G50）英国；显微镜（BX）奥林巴斯；全动微生物生化鉴定仪（VK）并配套革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌鉴定卡法国梅里埃；以上所有仪器设备检定有限期。
检测方法食品卫生微生物学检验标准GB 789及评审专提供《致病菌检测作业指导》。
3 结与分析3 增菌培养挑取质控样接种到脑心浸出液肉汤（B）培养基接种两瓶分别放生化培养箱和厌氧培养箱以36℃培养结两瓶增菌液混浊。
3 划线分离用接种环从增菌液挑取环直接划线接种到B琼脂平板、XL琼脂平板、沙门氏菌属显色琼脂平板、琼脂平板、B琼脂平板、血琼脂平板、Brrkr琼脂平板、哥伦比亚血琼脂平板、琼脂平板、L琼脂平板、李斯特氏菌显色琼脂平板、琼脂平板、肠埃希氏菌57显色琼脂平板、阪崎肠杆菌显色琼脂平板、琼脂平板观察菌落特征。
B琼脂平板、XL琼脂平板、沙门氏菌属显色琼脂平板、血琼脂平板和Brrkr琼脂平板发现种不可疑菌落分别编菌和菌菌落特征见表。
33 生化试验[]挑取上述平板型菌落接种到三糖铁琼脂斜面上置36℃培养观察生化特征并涂片染色结见表。
3 血浆凝固酶试验[3]挑取Brrkr平板上可疑菌落接种到5L B36℃±℃培养8～。
取新鲜配制兔血浆05L放入试管再加入B培养物0～03L置36℃±℃培养每半观察次观察6作阴性对照实验。
结发现培养物试管呈现凝块阴性对照出现凝块因可判定结阳性故菌可判定金黄色葡萄球菌。
35 全动微生物生化鉴定从营养琼脂平板上挑取可疑菌落用生理盐水制备成05浊菌悬液菌和菌分别使用革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌鉴定卡置VK全动微生物鉴定系统进行分析结分别显示沙门氏菌和金黄色葡萄球菌。
综合以上细菌菌落特征、菌体染色形态、生化试验、血清学和全动生化鉴定结可判断该盲样样品检出种菌即鼠伤寒沙门氏菌（[5]）和金黄色葡萄球菌。
结论与讨论实验室收到样品首先要对盲样样品状态进行确认如出现包装破损或其他异常情况应及与实施部门系这是做质控盲样前提[]。
分析鉴定程应选择多种分离增菌液和选择性琼脂平板并选择性平板上尽可能挑取各种型菌落[5]以避免漏检。
做混合菌种质控鉴定分析工作可采用常规生化试验与全动微生物生化鉴定仪相结合方式[6]进而保证对菌种结判定更准确、快捷。
盲样考核是开展认证评审重要容利用盲样测试进行现场评审能直接反映出实验室仪器设备和技术素质实际水平和出具报告能力[7]其不仅是衡量实验室技术能力关键指标还有利检测机构重视检验水平提升不断提高专业技术人員技能水平确保检测结准确性。
参考献[] 凌秀梅周浩杨红等05～06年食性致病菌能力验证结分析[]食品安全质量检测学报089（9）50855089[] GB 78906 食品安全国标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验[][3] GB 789006 食品安全国标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验[][] 李兰换李剑英份混合菌种质控盲样鉴定分析[]国煤炭工业医学杂志003（03）37375[5] 陈建琳顾永洋混合菌种盲样鉴定分析[]应用预防医学08（05）333[6] 卢艳玲靳会娟任艳平等实验室混合菌种质控鉴定分析[]国社区医师（医学专业）035（05）66[7] 陆丽丽夏捷陶贤继等检测实验室盲样考核及其质量控制[]环境科技0（）7678 相关热词 菌种鉴定混合