壳聚糖对黄芩水提液净化除杂工艺的研究
作者：万焱，王启帅，杜绍亮，杨云。
【摘要】 目的筛选壳聚糖对黄芩水提液的最佳纯化工艺，从而优化黄芩苷的提取工艺。方法以黄芩苷得重（得重= 粗品黄芩苷重量×黄芩苷浓度）为衡量指标，运用正交实验考察不同影响因素对絮凝效果的影响，同时采用HPLC测定其含量对工艺进行系统评价。结果壳聚糖对黄芩水提液絮凝的最佳工艺条件：体系pH5，搅拌时间10 min，体系温度40℃，絮凝剂浓度0.5%。结论壳聚糖对黄芩水提液具有较强的絮凝作用，该方法简单可行，可提高黄芩药材的利用率。
黄芩Scutcnana Baicalensis Georgi为唇形科植物黄芩的干燥根［1］，主要功效为清热燥湿、泻火解毒、止血安胎。黄芩中主要成分为黄酮类化合物，其中含量较高的有效成分有黄芩苷(Baicalin)、汉黄芩苷(Wogonoside)、黄芩素(Baicalein)、汉黄芩素(Wogonin)等。目前代谢研究表明，黄芩苷和汉黄芩苷为前药，黄芩素和汉黄芩素为二者的真正药效物质基础。药理学研究表明，黄芩具有多种药理作用，如抗菌、抗病毒、抗炎、抗变态反应、抗氧化、清除氧自由基、抗癌、抗肿瘤、抗凝、抗血栓形成和保护肝脏、心脑血管、神经元等作用，目前临床主要用于抗炎和抗菌。在现代中药生产中，经常使用酸沉法从中药黄芩中提取粗品黄芩苷来代替黄芩。但在黄芩水提液的酸沉过程中，水提液中的一些有机大分子杂质如淀粉、果胶、蛋白质等会随有效成分一起沉降下来，这就造成粗品黄芩苷中含有许多无效成分，降低了疗效。如果用传统的纯化工艺，黄芩苷的得率又得不到保证,进而造成了原药材的大量浪费。壳聚糖作为长链高分子碱性多糖，在稀酸中可形成活性基团—NH3+，对溶液中带负电荷的成分如蛋白质、树胶、鞣质、单宁、部分多糖等［2］进行吸附，从而达到对黄芩水提液净化除杂的作用,在保证产量的前提下实现提高黄芩苷含量的目的。
1.1 仪器 LC—20AT 型HPLC（岛津公司）；88—1型定时恒温磁力搅拌器（上海司乐仪器有限公司）；中速自动平衡微型离心机（北京医用离心机厂）；ZK—82型真空干燥箱（上海市实验仪器总厂）；德国Sartorius BS224S电子天平；METTLER AE240电子分析天平（瑞士）及实验过程所需的玻璃仪器。
1.2 试剂壳聚糖（济南海得贝生物公司）；甲醇（色谱纯）；双重蒸馏水;其他试剂均为分析纯。
2 方法。
2.1 壳聚糖絮凝剂的配制用1%的乙酸为溶剂，分别配制浓度为0.5%,1.0%，1.5%的壳聚糖溶液，充分溶胀后作为絮凝剂，备用。
2.2 黄芩水提液的制备 筛选合格的黄芩干燥根，蒸透后切片。称取黄芩饮片100 g，分别加10倍，8倍量水煎煮2次，1 h/次，纱布过滤，合并两次滤液，平分4份，待用。
2.3 黄芩苷粗品的制备［3］黄芩水提液→加入壳聚糖→静置过夜→离心→上清液水浴加热至40℃→盐酸调pH1.5→40℃恒温1 h→静置过夜→倾去上清液→沉淀水洗至pH 6→减压抽滤→60℃真空干燥→即得。
2.4 单因素实验分别以体系温度、体系pH、搅拌时间、壳聚糖用量以及壳聚糖的浓度为考察因素，在不同水平下进行单因素实验，以期筛选出影响絮凝效果的主要因素和水平。从而为正交实验设计提供依据。