自动酶免疫分析系统中微板置放顺序对结果影响的观察
【关键词】 酶联免疫吸附试验。
［摘要］ 目的：评估RSP 100BEP Ⅲ自动酶免疫分析系统中微板置放顺序对检测结果的影响。方法：评价基本性能，该系统的不精密度；与经典方法比较分析不准确度。将乙肝6项标志物微板置于不同序号检测，以观察该系统中微板置放顺序对结果的影响。结果：RSP 100BEP Ⅲ自动酶免疫分析系统性能良好；对于微板置放顺序，双抗体夹心法和中和法无明显差异，而对竞争抑制法检测结果有显著影响。结论：RSP 100BEP Ⅲ自动酶免疫分析系统可提高酶免疫分析方法的精密度，减轻劳动强度。但应注意竞争抑制法ELISA存在时效性，必须用RSP 100加样后立即以BEP Ⅲ进行后续处理。
自动酶免疫分析系统在血站系统应用较为普及，针对血源筛选试验的夹心法ELISA检测报道较多［1,2］。我们于2002年引进RSP 100BEP Ⅲ自动酶免疫分析系统，应用于临床免疫学实验室常规ELISA(包括夹心法、竞争法、中和法)工作，1年多来使用表明，医院临床实验室所面对的检测项目和分析模式具有多样性，有必要进行深入探讨。
1 材料与方法。
1.1 样本 观察样本采用无溶血、无黄疸、无脂血的血清。乙肝质控物由卫生部临床检验中心提供。
1.2 仪器 自动酶免疫分析系统 RSP100样本分配器(简称RSP100)，瑞士Tecan公司产品。BEPⅢ酶免疫分析仪(简称BEP Ⅲ)，德国DADEBEHRING公司产品。经典方法所用仪器1575 洗板机和550酶标仪，美国BIO－RAD公司产品。
1.3 试剂 试剂A由月亮湾(深圳)生物科技有限公司提供；试剂B由英科新创(厦门)科技有限公司提供。
1.4 方法。
1.4.1 自动酶免疫分析系统(仪器法)的检测参数和流程严格按照试剂盒说明书编制。检测过程中，先以RSP100分配样本，再置入BEP Ⅲ自动完成全部后续分析及报告结果。经典法的质控物设定、各操作步骤和结果判定均严格按照试剂盒说明书用人工执行。
1.4.2 基本性能评价。
1.4.2.1 不精密度分析 在同一微板上将一份混合阳性血清分别以仪器法和经典法重复检测20孔HBsAg，计算批内CV；并将该混合血清分装20份用仪器法连续检测20 d，获得吸光度以计算批间CV。
1.4.2.2 与经典方法比较分析不准确度 在同一天分别采用仪器法和经典法检测67份血清HBsAg、HBcAb和HBeAb，比较两者阳性百分率(%)。
1.4.3 微板置放顺序观察 以检测乙肝6项标志物为例，将各项目微板编出不同序号，在RSP100分配血清后，组合不同顺序置入BEP Ⅲ中，其中1号位微板项目在7号位重复检测，观察1号位与7号位由于等待处理时间对HBsAg、HBcAb和HBeAb吸光度和阳性率的影响。
1.4.4 统计学分析 统计学处理由SPSS软件完成。