不同压力与辅料蒸制何首乌的比较研究
作者：罗跃龙，王晨晖，杨梓懿，刘平安;。
【摘要】; 目的 比较何首乌加压与常压、加辅料与不加辅料炮制的差异。方法 以二苯乙烯苷、大黄素（HPLC法定量）的含量为评价指标，采用正交设计优选加压清蒸工艺，并以加压加辅料蒸与《药典》的常压加辅料蒸进行比较研究。结果 加压清蒸工艺为A2B2C3，加压蒸制品与常压蒸制品比较，2种成分含量均高于常压蒸品；加辅料蒸比清蒸好，且以黄酒黑豆汁加压蒸法最好。结论 加压炮制何首乌可行，炖法优于蒸法，古人用黑豆蒸制首乌科学。
何首乌为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb的干燥块根。生首乌味苦、涩，性平，具有润肠通便、解毒消肿和截疟之功；制首乌味苦、甘、涩，性温，具有补肝肾、益精血、壮筋骨、乌须发之功。已知主要有效成分为二苯乙烯苷和蒽醌类成分。历代记载的何首乌炮制方法众多，约有30多种，如蒸制、黑豆制、黑豆酒制等[1]。本实验以二苯乙烯苷、大黄素含量为指标，考察何首乌加压清蒸的最佳工艺条件；并在此工艺条件下，对加压清蒸、加压加不同辅料蒸与药典法进行比较研究，现报道如下。
; 1 实验材料。
; 1．1; 药材。
; 采自湖南省湘西自治州龙山县，经药物鉴定教研室鉴定为何首乌Polygonum multiflorum Thunb，将药材洗净、切丁、干燥备用。
; 1．2; 仪器。
; KNAUER高效液相色谱议Eurochrom2000（德国诺尔仪器制造厂）；SK3300H超声波清洗器（上海科导超声仪器有限公司）；EDX—35B型座式自动电热压力蒸汽灭菌器（上海申安医疗器械厂）；FW100型粉碎机（天津市泰斯仪器有限公司）；AR1140电子分析天平（奥豪斯国际莫伊有限公司）。
; 1．3; 试药。
; 二苯乙烯苷（批号110844－200404，中国药品生物制品检定所）；大黄素（批号110756－200110，中国药品生物制品检定所）；乙醇、甲醇为色谱纯，其余均为分析纯。
; 2 方法与结果。
; 2．1．1; 正交设计; 根据预试验与文献资料，影响清蒸工艺的因素主要有：蒸制压力、时间及饮片规格，每个因素设3水平，采用L9(34)正交表进行高压清蒸工艺的优选，因素与水平见表1（饮片规格按市售何首乌饮片分为3种：小规格边长约0.5 cm的丁块、中规格边长约1.0 cm的丁块、大规格边长约1.5 cm的丁块）。
; 2．1．2; 高压清蒸品的制备; 取生何首乌适量，加入60％的水焖润6 h至透心，依表1分别加压蒸制，干燥备用。
; 2．1．3; 二苯乙烯苷的测定[2]; ①色谱条件：ODSC18色谱柱（3.9 mm×150 mm，5 ?滋m），流动相乙睛—水（25∶75）,流速1.0 mL/min，检测波长：320 nm，柱温20 ℃。②对照品溶液的制备和线性关系的考察：精密称取二苯乙烯苷对照品4.1 mg置于10 mL的棕色容量瓶中，加50％乙醇配制成0.41 mg/mL的对照品溶液，分别精密吸取2，4，6，8，10 ?滋L,注入液相色谱仪，测定吸收峰面积，以测得的峰面积积分值为纵坐标，进样量（?滋g）为横坐标绘制标准曲线，计算回归方程：
; Y=38.468X+4.261，r=0.999 3。
; 表明二苯乙烯苷在0.82~4.1 ?滋g与峰面积积分值具有良好的线性关系。③供试品溶液的制备：取各供试品（粉碎过四号筛）各约0.4 g，精密称定，精密加入50％乙醇50 mL，称定质量，加热回流30 min，放冷，再称定质量，用50％乙醇补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液，0.45 ?滋m微孔滤膜滤过，至棕色容量瓶中备用。④回收率试验：精密称取已知含量的样品5份，每份约0.4 g，精密称定，分别精密加入配制的二苯乙烯苷对照品溶液10 mL，按供试品溶液制备项下方法制备，依法测定含量，计算回收率为99.83%，RSD为0.86％。⑤供试品含量测定; 精密吸取供试品溶液10 ?滋L注入液相色谱仪，测定峰面积，计算样品中二苯乙烯苷含量，结果见表2。
; 2．1．4; 大黄素含量的测定[3]; ①色谱条件; ODSC18色谱柱（150 mm×3.9 mm，5 ?滋m），流动相：0.1%磷酸—甲醇（20∶80），流量：1.0 mL/min，检测波长：254 nm，柱温20 ℃。②对照品溶液的制备和线性关系的考察：精密称取大黄素对照品3.90 mg置于50 mL的棕色容量瓶中，加甲醇溶解成0.078 mg/mL的对照品溶液，分别精密吸取2、4、6、8、10 ?滋L，注入液相色谱仪，测定吸收峰面积，以测得的峰面积积分值为纵坐标，进样量（?滋g）为横坐标绘制标准曲线，计算回归方程：