大黄种子发芽检验标准化研究

作者：王昌华，银福军，刘翔，秦松云，李隆云，钟国跃。

【摘要】 　　目的探讨温度、发芽床、采集部位、种子大小等因素对药用大黄种子发芽的影响。方法采用常规的发芽试验方。结果药用大黄种子发芽最适温度为20～25 ℃，发芽床选纸上，发芽前处理为温汤35 ℃浸泡6 h，植株中部采集的种子及大种子质量较优。发芽初次计数时间为置床后第10天，末次计数时间为置床后第15天，发芽势统计时间为第8天。结论温度、发芽床、浸泡时间和温度、采集部位、种子大小对药用大黄种子发芽有显著影响，其最适发芽条件可作为大黄种子的质量检验参考标准。

【关键词】 药用大黄 种子 发芽。

Abstract：ObjectiveTo study the influence of different conditions (temperature， germinating beds，gather part, seed size) on Rheum officinale Baill. seed germination．MethodsThe general germination method．ResultsThe optimum seed germination conditions of Rheum officinale Baill. were as follows：temperature 20～25 ℃，germinating—beds ［top of paper (Tp)］，dipping in the 35 ℃water for six hours were before experiment gathered mid part and big seed．The first seedling—counting time is the 10th day after the test began；the last time was on the 15th day, germinabilitycounting time was on the 8th day．ConclusionTemperature,germinating beds, marinate of temperature and time, gather part, seed size have significant influence on Rheum officinale Baill. seed germination the optimum seed germination conditions can be used as reference quality test standards.

Key words：Rheum officinale Baill.；seed；Germination 　　大黄为常用中药材，来源有药用大黄Rheum officinale，掌叶大黄R. palmatum及唐古特大黄R. tanguticum，均为《中国药典》收载的品种。其根及根茎有泻下攻积、清热泻火、解毒、活血祛淤之效［1］。在对收集的全国各地3种大黄药材成分分析的基础上，结合多次对各实验点(苗圃)种植的3～4年生大黄成分分析研究结果，初步确认药用大黄有效成分含量高，品质佳，与我国历史上大黄传统出口的产地品种基本吻合，是我国大黄品种中珍贵的优质种质资源，但由于其分布区域狭窄，尚未开展人工种植栽培，加之用量大，故目前野生种群数量急剧减少［2］。为了资源的保护、开发和可持续利用，必须解决和扩大种源。为此对本项目筛选的药用大黄优质种源种子的发芽特性进行研究，以确定其最适发芽条件，为规范大黄种子市场，增补国家及国际标准提供参考。

1 材料与仪器。

1.1 材料。

药用大黄种子由重庆市中药研究院生药室提供，采自康定的药用大黄优良种源试验基地。　　1.2 仪器。

发芽箱为重庆永生实验仪器厂生产的SHH250GS人工气候箱，发芽盒用直径15 cm培养皿，砂子为过20目的细砂，清水冲洗后，130 ℃高温烘2 h。

2 方法 　　主要参考《种子学》［3］《国际种子检验规程》［4］。

2.1 发芽温度的设定。

试验设置15，20，25，30 ℃恒温处理。每个处理100粒种子，重复4次，每25粒为1副重复。发芽床采用3层湿润滤纸，试验过程中保持滤纸湿润，每天记录种子的发芽数（下同）。

2.2 发芽床的设定。

选择25 ℃，同时用纸上（Tp）、纸间（Bp）、砂上（TS）、砂间（S）进行发芽试验，试验中保持发芽床湿润。 纸上是在培养皿中铺3层湿润的滤纸，后置种；纸间是在培养皿中铺3层湿润滤纸，置种后再在种子上铺一层湿润滤纸；砂上是在培养皿中铺3 cm厚的湿砂（砂水比为4∶1），后置种；砂间是在培养皿中铺3 cm厚的湿砂（砂水比为4∶1），置种后再盖上一薄层湿润的细砂。

2.3 发芽前处理的选择。

2.3.1 室温浸泡选择20℃，纸床（纸上）进行置床前24，48，72，96，120 h室温蒸馏水浸泡种子对照发芽，设空白对照。2.3.2 温汤浸泡选择20 ℃纸床（纸上），进行置床前35 ℃蒸馏水浸泡种子2，4，6 h，自然冷却到室温，进行对照发芽，对照组室温蒸馏水浸泡种子48 h。

2.4 发芽计数时间的设定根据适宜发芽条件下的发芽表现，确定初次计数和末次计数时间。以首次有子叶从种皮中伸出的天数为初次计数时间，以种子萌发达到最高时，以后再无萌发种子出现时的天数为末次计数时间。

2.5 最适采集部位的选择采集不同原产地药用大黄单株上、中、下部种子，进行对照发芽实验。

2.6 种子大小对药用大黄种子发芽的影响 采集不同原产地药用大黄单株种子，分别过6 mm筛子，分为大小两类种子，大种子（果实）宽6～8 mm，小种子（果实）宽4～6 mm，进行对照发芽实验。

2.7 种子及幼苗观察外观形态观测用游标卡尺测量不同单株9份药用大黄样品果实及种子的长度和宽度，用肉眼直接观察其外观形态，每份样品测20粒［5］。

在发芽期间，注意观察种苗发育过程，按照国际种子检验协会(1993)的《种苗评定手册》对大黄进行评价和归类。

2.8 统计发芽率以最终达到的正常幼苗百分率计。发芽指数（GI）以下列公式进行计算：GI=∑(Gt／Dt)。式中，Gt为在发芽后t日的发芽数，Dt为相应的发芽天数。