白及甘露聚糖抗胃溃疡及抗炎、镇痛作用的实验研究

【摘要】 [目的]观察白及甘露聚糖抗炎、镇痛及抗实验性胃溃疡作用。[方法]从白及中分离白及甘露聚糖。采用二甲苯诱导小鼠耳廓肿胀法、小鼠毛细血管通透性进行抗炎试验;采用小鼠醋酸扭体法、热板法进行镇痛实验观察;采用冷水应激、幽门结扎等方法进行胃溃疡试验。[结果]白及甘露聚糖小鼠耳廓肿胀有明显对抗作用;对小鼠毛细血管通透性有一定对抗作用;白及甘露聚糖能明显抑制热板和醋酸所致小鼠疼痛,减少热板引起的小鼠疼痛反应和减少扭体次数。大鼠幽门结扎实验显示,白及甘露聚糖(3mg/只)能有效降低溃疡指数(P0.05);大鼠应激性溃疡实验显示,白及甘露聚糖(3mg/只)能有效降低溃疡指数(P0.01)。[结论]:白及甘露聚糖具有良好抗炎和一定镇痛作用及对实验性胃溃疡有较好治疗作用。

【关键词】 白及甘露聚糖 抗炎 镇痛 胃溃疡

白及为多年生草本植物,是常用的止血药物,研究表明,白及块茎中含大量粘胶类物质,一般认为,自芨的止血作用正是与其所含粘胶类成分有关[13]。本文拟对白及甘露聚糖抗炎镇痛及抗胃溃疡药理作用进行研究。

1 材料   (1)药品与试剂:白及购自浙江省中医院。雷尼替丁胶囊:由杭州民生药厂生产,批号20070112,为本实验西药阳性对照药。阿斯匹林:由无锡阿斯特拉公司产,批号20070318。(2) 动物:ICR种小鼠,雌雄各半,体重18~22g。SD种大鼠,雌雄各半,体重200~220 g。均由浙江中医药大学实验动物中心提供。

2 方法。

2.1 白及甘露聚糖的提取 白及块茎烘干、破碎,用95%乙醇连续抽提两次,残渣干燥后,在残渣中加入蒸馏水浸泡2h,不断搅拌,水浴抽提2次,合并抽提液,离心除沉淀,上清液浓缩至小体积,加入三倍量95%乙醇,4℃静置过夜,用Sevag 法除去蛋白质,真空干燥得白及粗多糖。用甲醇分级沉淀和DEAE纤维素柱层析得白色干燥甘露聚糖粉末。

2.2 白及甘露聚糖镇痛抗炎作用研究。

2.2.1 白及甘露聚糖小鼠扭体的影响[4] ICR小鼠,雌雄各半,随机分成6组,按照白及甘露聚糖剂量组4mg/只、中剂量组2mg/只、低剂量组1mg/只,阿斯匹林组8mg/只,空白对照组(等容积水)灌胃给药15d,末次灌胃给药1h后,腹腔注射0.6%醋酸(HAC),0.2ml/只,记录15min内动物扭体次数。

2.2.2 白及甘露聚糖小鼠热板反应的影响[4] ICR小鼠,雌雄各半,随机分成6组,按照白及甘露聚糖剂量组4mg/只、中剂量组2mg/只、低剂量组1mg/只,阿斯匹林组8mg/只,空白对照组(等容积水)灌胃给药15d,末次给药后15、30、60min分别将小鼠放在(55±0.5)℃的热板上,测定小鼠痛阈值。如60sec小鼠仍无反应,其痛阈以60sec计算,记录实验数据。

2.2.3 白及甘露聚糖小鼠耳廓肿胀的影响[4] ICR小鼠,雌雄各半,随机分成6组,按照白及甘露聚糖剂量组4mg/只、中剂量组2mg/只、低剂量组1mg/只,阿斯匹林组8mg/只,空白对照组(等容积水)灌胃给药15d,末次给药0.5h后,将二甲苯20μl滴涂于左耳,15min后将动物处死,用直径8mm打孔器在左、右耳相同部位打孔,分别称重,计算重量差值,记录实验数据。

2.2.4 白及甘露聚糖小鼠毛细血管通透性的影响[4] ICR小鼠、雌雄各半,随机分成6组,按照白及甘露聚糖剂量组4mg/只、中剂量组2mg/只、低剂量组1mg/只,阿斯匹林组8mg/只,空白对照组(等容积水)灌胃给药15d,末次给药后0.5h,尾静脉注射10%伊文氏蓝生理盐水溶液0.2ml,再腹腔注射醋酸(HAC)1ml,30min后取腹腔液于620nm测光密度,以光密度值作组间统计学处理,记录实验数据。

2.3 白及甘露聚糖对胃溃疡的治疗作用。

2.3.1 白及甘露聚糖对幽门结扎性溃疡的影响[4] SD大鼠,雌雄各半,随机分成5组,按照白及甘露聚糖剂量组12mg/只、中剂量组6mg/只、低剂量组3mg/只,阿斯匹林组70mg/只,空白对照组(等容积水)连续灌胃15d,在末次给药前48h禁食,自由饮水,末次给药1h后,用乙醚麻醉动物,打开腹腔,结扎幽门。手术18h后,开腔取胃,向胃腔内注入1%甲醛6ml,将胃浸入1%甲醛中,10min后沿胃大弯剪开胃,观察胃部的溃疡情况,记录胃部溃疡点数,以溃疡点数为指数计算溃疡抑制百分率和溃疡发生百分率。

2.3.2 白及甘露聚糖对应激性溃疡的影响[4] SD大鼠,雌雄各半,随机分成5组,按照白及甘露聚糖剂量组12mg/只、中剂量组6mg/只、低剂量组3mg/只,雷尼替丁组6mg/只,空白对照组(等容积水),连续灌胃给药15天,在末次给药前25h禁食自由饮水,在禁食至24h,各组末次给药,将动物垂直浸入25℃水中,深度至动物剑突,24h后取出处死,结扎幽门和贲门后取出胃。向胃内注入1%甲醛10ml,再将胃浸泡于1%甲醛液中10min。沿胃大弯剖开,观察溃疡情况,拍照记录,记录胃粘膜损伤长度,并以胃粘膜损伤长度总和为溃疡指数。

2.4 统计学处理 采用t检验,所有数据以x±s表示。

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