犬Oddi括约肌狭窄模型的建立及其胆道动力学的变化

作者：李宝山 李智华 刘永康 禹建峰 何中林 李晓武 徐世荣。

【摘要】 目的 建立犬Oddi括约肌(sphincter of Oddi，SO)狭窄模型，探讨其胆道动力学的变化。方法 禁食16～18 h成年杂种犬麻醉后，超声测量胆总管管径。实验组行经腹切开十二指肠，机械性损伤SO致其狭窄；对照组仅行经腹切开十二指肠，术毕饲养。定期检查肝功能，4周后再次麻醉下行超声测量胆总管管径及开腹行SO测压。最后切取SO及周围组织行病理检查。结果 实验组术后4周肝功能TBIL、DBIL、GGT、ALP明显高于术前，超声测量胆总管管径大于术前，病理检查发现括约肌组织纤维化，而对照组均无明显变化。与对照组相比，实验组胆总管及SO基础压明显升高，SO收缩幅度降低，收缩频率升高，收缩时间缩短。结论 SO狭窄模型成功建立；Oddi括约肌狭窄后其胆道动力学发生明显改变。

【关键词】 Oddi括约肌； 狭窄； Oddi括约肌测压； 胆道动力学。

【Abstract】 Objective To establish models of sphincter of Oddi (SO) stenosis to observe their biliary dynamic changes in dogs. Methods After fasting for 16—18 hours, the adult mongrel dogs were anesthetized and performed with ultrasonograph to determine the size of the common bile duct (CBD). In the experimental group, the dogs‘SO accepted mechanical damage by dissecting duodenums of the dogs. While in the control group, only sham operation was done. Liver function was checked periodically by serum examination. All dogs accepted ultrasonograph and sphincter of Oddi manometry (SOM) to determine the size of CBD and biliary dynamics respectively at postoperative four weeks. Biopsy of SO and adjacent tissue was done for pathological analysis after the second operation. Results In the experimental group, the levels of TBIL, DBIL, GCT, and ALP were higher than those before operation, and the size of CBD was larger than that before operation. SO fibrosis was found in the experimental group by pathology but not in the control group. Compared with the control group, there could be found significant increase of basal pressures of CBD and SO, decrease of the amplitude of SO and increase of the frequency of SO contraction in the experimental group. Conclusions The SO stenosis model is established successfully, when the stenosis of SO causes significant changes of biliary dynamics, with increase of basal pressure and contraction frequency, decrease of amplitude and shortening of contraction time.

【Key words】 Sphincter of Oddi; Stenosis; SO manometry; Biliary dynamics。

Oddi括约肌功能失调或障碍(sphincter of Oddi dysfunction,SOD)可能是胆道、胰腺及胃肠道疾病发生的重要诱因之一。近有学者建议将其分为Oddi括约肌(sphincter of Oddi,SO)狭窄和SO功能紊乱两种情况［1］。前者为括约肌的部分或全部狭窄，由慢性炎症和纤维化所致；后者为括约肌高压带的周期性功能阻滞,是括约肌痉挛、肥大或去神经所致。在实践中两者很难区分，统称SOD。本实验通过人为机械性损伤，模仿临床SO狭窄产生机制，制作犬SO狭窄模型，探讨器质性狭窄对胆道动力学的影响，总结规律，为临床SOD的诊断提供依据。

1 材料与方法。

1.1 材料。

1.1.1 实验动物：健康成年杂种犬16只，雌雄不限，体质量11～13 kg，由第三军医大学动物实验中心提供。随机分为实验组和对照组，每组8只。

1.1.2 实验仪器：SOM系统、三腔测压管购自美国WilsonCook Medical公司；PC polygram HR高分辨、多通道胃肠功能测定仪购自瑞典CTDSynetics Medical公司；自制的损伤工具由ERCP造影管不规则缠绕铜丝改制而成。

1.2 方法。

1.2.1 动物模型的建立：实验犬禁食18 h(可自由饮水)，速眠新与氯胺酮肌注复合麻醉(按体积比3∶2配药，给药量0.15 ml/kg)后固定于手术台上［2］，右侧肋缘下切口进腹。实验组均行十二指肠系膜对侧切开十二指肠，寻找乳头，自制损伤工具插入胆道人为机械性损伤SO(伸拉各10次，模拟排石过程)后缝合十二指肠，关腹。术后禁食、抗炎、补液2 d，相同条件下饲养4周。对照组仅行开腹十二指肠切开缝合术，不做损伤，其余操作同实验组。

1.2.2 检测指标和方法。

(1)超声：所有动物第1次术前和术后4周分别在麻醉下行彩超测量胆总管管径。

(2)肝功能：所有动物术前、术后1、3、7、14、28 d分别抽血查肝功能。检测指标包括：ALT、AST、GGT、ALP、TBIL、DBIL。

(3)病理：所有实验动物术后4周测压完毕后处死，切取SO标本用10%甲醛溶液浸泡，石蜡包埋，再进行HE染色，切片。光镜下将纤维化程度分轻、中、重度3种［3］。轻度：平滑肌内散在胶原纤维、炎性细胞浸润，平滑肌排列尚规则；中度：平滑肌中已含有较多胶原纤维和结缔组织，平滑肌组织排列不规则；重度：肌肉组织仅呈孤立小岛状，很难发现肌纤维束，周围大量胶原纤维和结缔组织，有透明变性。为达到模型的一致性，本实验将中、重度纤维化纳入实验组标准，轻度予以剔除。

(4)SO测压方法和原理［4］：以十二指肠内压作为调零点，测压管插入SO，先使测压孔置于胆总管内，低顺应性毛细管灌注系统将灭菌纯化水以每分钟0.2 ml的速度灌注入三腔测压管内腔。SO及胆总管的压力经灌注的液体传至胃肠功能测定仪，转换为数字信号记录到计算机内保存，然后采用pullthrough法缓慢向十二指肠拖出，记录SO的周期性蠕动收缩波。记录指标包括：胆总管压力、SO基础压、SO收缩幅度、SO收缩频率、SO收缩时间。每只动物记录时间为60 min。