六味补血胶囊的16组拆方对环磷酰胺所致血虚小鼠造血功能的影响
[摘要]目的 探讨六味补血胶囊的16组拆方对血虚小鼠造血功能的影响。
方法 将健康NIH雄性小鼠190只随机分为19组，分为阳性组、空白组、模型组、拆方组（拆方1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16组），每组10只。
阳性组给予复方阿胶浆，每次0.3 ml/20 g；空白组和模型组给予生理盐水，每次0.3 ml/20 g；拆方1～16组小鼠按相应配伍剂量连续灌胃28 d，1次/d，每次0.3 ml/20 g。
结果 血红蛋白、红细胞、网织红细胞各指标模型组均值低于空白组，（P毕业论文网 [关键词]六味补血胶囊；外周血象；血虚小鼠；环磷酰胺 [中图分类号] R932 [文献标识码] A [文章编号] 1674—4721（2016）06（c）—0012—04 [Abstract]Objective To explore the impact of 16 demolition groups of six kinds of Buxue capsule on hematopoietic function of blood deficiency mice.Methods 190 health NIH male mice were divided into nineteen groups，namely positive group，black group，mode group，demolition groups （including demolition group 1，2，3，4，5，6，7，8，9，10，11，12，13，14，15，16），with each group 10 mice.Intraperitoneal injection cyclophosphamide was used to duplicate blood deficiency mice model.Positive group was given compound E Jiao Jiang （0.3 ml/20 g each time）；Blank group and model group was given normal saline （0.3 ml/20 g each time）；The rest of the 16 groups according to the corresponding dose lavage 28 days （1 time/d，0.3 ml/20 g each time）.The impact of each group on the peripheral blood indicators of blood deficiency mice was observed.Results The mean value of hemoglobin，red blood cell and reticulated red blood cell in mode group were lower than those in black group （P医学实验动物中心（动物质量合格证：44007200025367）。
1.1.2实验药品及试剂 复方阿胶浆（批号：1309029，购自山东东阿阿胶股份有限公司），环磷酰胺片（批号150301，购自通化茂祥制药有限公司），六味补血胶囊的16组拆方由深圳国源国药有限公司制备及提供。
1.1.3主要仪器 XT—2000i血细胞分析仪[希森美康医用电子（上海）有限公司]，KJMR—ⅡA血液混合器（江苏正基仪器有限公司），RQ/ZC K2E真空采血管（广州阳浦医疗科技股份有限公司）。
1.2实验方法 1.2.1实验分组 将实验动物随机分为19组，每组10只，分为阳性组、空白组、模型组、拆方组（拆方1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16组）（表1）。
1.2.2动物模型制备 参照文献[1]腹腔注射环磷酰胺制作化学药物诱发血虚证模型。
NIH小鼠适应性饲养1周后，除空白组外，模型组、阳性组、拆方1～16组小鼠在给药第5～8天、第13～16天、第22～25天腹腔注射环磷酰胺（100 mg/kg）0.4 ml/20 g。
1.2.3药物制备 当归用10倍量70%乙醇溶液回流提取2次，每次2 h，合并提取液，滤过，药渣备用，滤液静置24 h，浓缩至浸膏备用；当归药渣用10倍量水回流2次，每次1 h，合并提取液，滤过，浓缩成浸膏与上述当归浸膏合并，减压干燥后，制粒，干燥，制成1000粒，即得拆方1组。
以上六味，当归参照拆方1组制得，当归药渣与表1中拆方2～16组中熟地黄、白芍、川芎、黄芪、紫草的不同组方配伍，用10倍量水回流2次，每次1 h，合并提取液，滤过，浓缩成浸膏与上述当归浸膏合并，减压干燥后，制粒，干燥，拆方组各制成1000粒，即得拆方2～16组。
1.2.4给药方法 六味补血胶囊原处方成人口服量15粒/d（0.48 g/粒），拆方1～16组按照表1组方配伍小鼠连续灌胃28 d，1次/d，每次0.3 ml/20 g（拆方1组按4.29 g/kg，拆方2组按6.55 g/kg，拆方3组按5.43 g/kg，拆方4组按6.10 g/kg，拆方5组按8.70 g/kg，拆方6组按12.79 g/kg，拆方7组按10.46 g/kg，拆方8组按12.30 g/kg，拆方9组按6.30 g/kg，拆方10组按11.16 g/kg，拆方11组按8.42 g/kg，拆方12组按13.04 g/kg，拆方13组按18.73 g/kg，拆方14组按14.74 g/kg，拆方15组按14.51 g/kg，拆方16组按13.74 g/kg给药，小鼠耐受量按照25倍计即小鼠每日给药量需60 mg/20 g[2]）；空白组和模型组给予生理盐水，每次0.3 ml/20 g；阳性组给予复方阿胶浆，每次0.3 ml/20 g。
1.3检测指标 19组小鼠于给药后12 h，随机取各组小鼠，腹主动脉取血，用抗凝采血管取血1 ml，用血细胞分析仪自动检测血红蛋白、红细胞、网织红细胞。
1.4统计学处理 采用SPSS 16.0 one—way ANOVA进行统计学处理。
2结果 六味补血胶囊的16组拆方对血虚小鼠外周血象的影响如下。
模型组血红蛋白、红细胞、网织红细胞各指标模型组均值低于空白组（P14组>15组>8、9组>5组>11组、12组>15组>13组与模型组比较，差异均有统计学意义（P11组>8组>15组>12组>14组>13组，与模型组比较，差异均有统计学意义（P11组>16组>9组>6组>12组>8组，与模型组比较差异均有统计学意义（P 本试验阳性组用药选择复方阿胶浆，由于其临床上明确的补气补血疗效，可以衡量拆方1～16组的治疗效果，使之具有公认性、可信性以及便于结果分析。
拆方1～5组，以当归为核心分别从熟地黄、白芍、川芎、芪草（黄芪、紫草）中分别选一味药组方，5组中外周血象值低于阳性组，与模型组、全方组比较差异无统计学意义；拆方6～11组以当归为核心，分别从熟地黄、白芍、川芎、芪草（黄芪紫草）中分别选二味药组方，拆方9组（当归、白芍、川芎）和拆方11组（当归、川芎、黄芪、紫草）与模型组比较差异有统计意义；从全方组中去除一味药得到拆方12～15组，拆方12、14、15组与全方组、模型组比较，差异有统计学意义，红细胞、网织红细胞、血红蛋白值与拆方1～11组比较，升高。
本课题组通过多组拆方药效实验可以证明六味补血胶囊全方配伍的合理性、可行性。
[参考文献] [1]何晓燕，李真贞.白芍对血虚小鼠补血作用的研究[J].时珍国医国药，2009，20（4）：999—1000. [2]黄继汉，黄晓晖，陈志杨，等.药理试验中动物间和动物与人体间的等效剂量换算[J].中国临床药理学与治疗学，2004， 9（9）：1069—1072. [3]马增春，高月，刘永学，等.环磷酰胺所致血虚证小鼠骨髓CD34+细胞的变化[J].中国中医基础医学杂志，2001，7（7）：42—43. [4]李伟霞，黄美艳，唐于平，等.当归、川芎和归芎药对中主要芳香酸类成分在血虚大鼠体内的代谢研究[J].中华中医药杂志，2013，28（5）：1212—1218. [5]李伟霞，唐于平，郭建明，等.比较评价当归川芎配伍对急性血瘀大鼠血液流变学及凝血功能的影响[J].中国中西医结合杂志，2012，32（6）：806—808. [6]朱妍，徐畅.熟地黄活性成分药理作用研究进展[J].亚太传统医药，2011，11（7）：173—175. [7]郭平，王升启.四物汤及其单味药补血作用的研究进展[J].山东中医杂志，2005，24（2）：121. [8]李媛，肖海英，李艳辉.四物汤配方颗粒汤剂对化学损伤性血虚小鼠免疫器官的影响[J].中国中医药现代远程教育，2011，9（2）：215—216. [9]赵烨，刘红宁，朱卫丰，等.对补气生血配伍理论研究概况的反思[J].中国实验方剂学杂志，2011，17（7）：272—274. [10]聂金娜，蔡万德，王迪.八珍汤及其所含方剂对血虚小鼠造血功能的影响[J].长春中医药大学学报，2007，23（2）：17—18. [11]罗年翠，丁雯，钱大玮，等.当归补血—活血药对功效取向研究[J].中国实验方剂学，2013，19（4）：240—245. [12]李霞，马家骅，李楠，等.当归补血汤相状态的研究[J].中国实验方剂学杂志，2011，17（2）：1—5. [13]袁军清，袁六妮，周可军.升血丸补血作用的实验研究[J].现代中西医结合杂志，2010，19（4）：411—412. [14]吴发宝，陈希元.黄芪药理作用研究综述[J].中药材，2004，27（3）：232—234. [15]李红.紫草加活血益气下胎汤对药物流产后阴道出血的影响[J].山东中医杂志，1992，18（12）：540—541.