不同发酵时期大麦青贮品质和微生物多样性变化

公司产品）封口，封口后置于室温下避光保存。分别在青贮第2d、青贮第14 d、青贮第60 d采样，样品分别标记为D2、D14、D60，D2和D14各取3袋，而D60取6袋，其中3袋用作青贮第60 d样品的分析，另外3袋青贮饲料开启后，将其混匀后置入IL聚乙烯罐中，罐口用双层纱布包裹，防止苍蝇等污染和水分散失.空气可自由进入罐中，置于室温条件下保存，有氧暴露后第5 d（A5）进行取样。取每袋的中间部位作为样品，其中一部分冻存于50 ml的无菌离心管中，—80℃保存，主要进行后期微生物多样性检测;一部分装入封口袋于—20 ℃条件下保存，进行发酵品质测定;另外一部分（约10 g）用于微生物（包括乳酸菌、酵母菌、好氧细菌）数量的计数。剩余青贮饲料用于营养成分的测定。

1.2 青贮样品发酵品质及微生物数量的测定。

分别于4个不同青贮阶段取20 g大麦青贮样品，加入180 ml蒸馏水充分混匀，通过捣碎机搅拌lmm，采用4层纱布和定性滤纸进行过滤，获得浸出液，于—20℃冰箱中保存待测，测定pH值，以及乳酸、乙酸、丙酸和乙醇的含量。pH值用MettlerToledo型pH计测定，乳酸、乙酸、丙酸、乙醇采用安捷伦1260高效液相检测系统测定，配备示差检测器和Carbomix@ H—NP;色谱性，流动相为2.5 mmol/LH2S04，流速为0.5 ml/min，温度为55℃。