维甲酸纳米粒滴眼液抑制后发性白内障的实验研究
作者：王梓，栾洁，李长生，陆杨艳，夏强，顾宁。
［摘要］目的: 研究维甲酸（RA）纳米粒滴眼液对兔后发性白内障形成的影响及对兔眼的毒性作用。 方法: 18只新西兰白兔被随机分为A、B、C3组，进行晶状体囊外摘除术。A组为空白对照组，B组术后滴300μg・ml —1 的RA纳米粒滴眼液，C组术后滴700μg・ml —1 的RA纳米粒滴眼液。术后观察12周，行后囊膜混浊（PCO）评分及照相，比较各组晶状体PCO情况;光镜观察晶状体上皮细胞增殖情况并观察药物的毒性作用。 结果: 术后12周A、B、C组发生PCO的眼数分别为10、6、4眼。B组和C组PCO发生率低于A组，差异有显著性（均为P0.05），两用药组之间PCO发生率无显著差异（P0.05）。组织病理学检查显示，A组的晶状体上皮细胞增殖较B组和C组明显，各组虹膜及睫状体均未出现慢性炎症反应。 结论: RA纳米粒滴眼液能有效抑制晶状体上皮细胞的增殖，预防兔后发性白内障的形成，无明显毒性，并且使用方便，具有临床应用价值。
［关键词］ 维甲酸;纳米粒;晶状体上皮细胞;后发性白内障;兔 随着显微手术技术及设备的不断完善，白内障囊外摘除（extracapsular cataract extraction，ECCE）或超声乳化（phacoemulsification）联合后房型人工晶状体植入术已成为白内障的主要复明手术，严重手术并发症明显减少，后发性白内障［又称后囊膜混浊（posterior cap—sular opacification，PCO）］已成为影响术后视功能的主要并发症。本研究在对新西兰大白兔行晶状体摘除术后应用维甲酸（retinoic acid，RA）纳米粒滴眼液滴眼，观察晶状体后囊膜等眼部组织的变化，了解RA纳米粒滴眼液对后发性白内障的预防效果。
1 材料与方法 1.1 RA纳米粒滴眼液 RA纳米粒滴眼液由东南大学生物医学工程系研究室研制，粒径12nm，微孔滤器过滤后备用。
1.2 动物与分组 成年健康的清洁级新西兰大白兔18只，体重2.0～2.5kg，月龄2～4个月，雌雄不限，眼部检查无异常，随机分为A、B、C3组，每组6只（12眼）:A组为空白对照组，B组为300μg・ml —1 RA纳米粒滴眼液组，C组为700μg・ml —1 RA纳米粒滴眼液组。
1.3 术前准备 手术前2d用0.25%氯霉素眼液滴眼，每日3次。 术前30min使用复方托品酰胺眼液点眼，每5min1次，共5次。2%戊巴比妥30mg・kg —1 静脉麻醉，0.5%碘伏常规消毒术眼。
1.4 手术步骤 开睑器开睑，0.5%碘伏冲洗结膜囊，用3.2mm穿刺刀做透明角膜切口，前房内注入黏弹剂，截囊针开罐式截囊，直径约5mm。扩大角膜切口至5mm，水核分离，然后圈套器娩出晶体核，双腔针吸出残余皮质及黏弹剂，切口层间注水至水密状态。术毕结膜下注射庆大霉素2万U加地塞米松2.5mg。
1.5 术后处理 （1）术眼每天滴0.25%氯霉素眼液加0.5%醋酸可的松眼液4次，共4周。治疗组每天分别滴300μg・ml —1 RA纳米粒滴眼液3次和700μg・ml —1 维甲酸纳米粒滴眼液3次，共12周。 （2）术后第1、2、3、7、14天和4、6、12周于裂隙灯显微镜下检查术眼伤口、结膜、角膜、虹膜和前房的情况。房水混浊分级:0级，房水清晰透明，Tyndall现象（—）;1级，房水Tyndall现象（+），较少或无纤维素性渗出，窄裂隙1个视野内可见1～10个光点;2级，房水Tyn—dall现象（++），明显纤维素性渗出，窄裂隙1个视野内可见11～30个光点;3级，房水明显混浊伴大量纤维素性渗出或前房积脓。
（3）术后第2、4、8、12周在裂隙灯显微镜和直接眼底镜下检查PCO情况。按Odrich后发性白内障评分法［1］ 对后发性白内障进行分级，并且对后囊膜进行照相。 （4）术后12周处死动物，摘取眼球，沿睫状体扁部全层环形剪开，取完整的眼前段组织（包括角膜、虹膜、睫状体、后囊膜）及视网膜组织，10%的甲醛固定24h，常规脱水、浸蜡、石蜡包埋及切片，常规HE染色，普通光镜检查。 1.6 统计学处理 采用SPSS10.0统计软件包进行统计处理。
2 结果 由于手术过程中B组中有1眼后囊膜破裂，饲养过程中A组和C组均有1只兔子死亡，均排除在实验之外。最后A组有10眼，B组有11眼，C组有10眼。
2.1 术后结膜反应情况 术后前3d，所有术眼均有不同程度的结膜充血，1周左右充血逐渐消退。术后第1、7天各组结膜充血程度差异无显著性（P0.05）。 2.2 术后角膜反应情况 术后1周内所有眼的切口周围角膜水肿相对较重，绝大多数兔眼的术后反应是角膜轻度或中度水肿，但都在1周左右自行消失。术后第1、7天，各组角膜水肿程度差异无显著性（P0.05）。所有术眼均无角膜上皮缺损、角膜炎等情况发生。