清热合剂各提取部位群解热抗炎药效作用的比较
作者:邱枫,何晓静,肇丽梅,孙亚欣。
【摘要】 目的 比较清热合剂各提取部位群的解热抗炎药效作用。方法 分别采用2,4二硝基苯酚致热大鼠模型、内毒素致热家兔模型、二甲苯致小鼠耳肿胀及蛋清致大鼠足肿胀模型,研究清热合剂各提取部位群的解热、抗炎作用。结果 清热合剂的20%、40%和60%乙醇提取部位群均有解热抗炎作用,其中清热合剂的40%乙醇提取部位群解热抗炎作用最强。结论 清热合剂的40%乙醇提取部位群具有明显解热抗炎作用,作用效果与清热合剂原液相当。
Abstract:Objective To investigate the feverrelieving and antiinflammatory effects of Qingre mixture (QR) for oral use.Methods Animal models of ear edema induced by xylene in mice,paw edema induced by egg white and fever induced by 2,4dinitrophenol in rats and endotoxininduced fever in rabbits were made; the feverrelieving and antiinflammatory effects of the different extractions of Qingre mixture were studied.Results Extractions of Qingre mixture extracted by 20%,40%,and 60% ethanol showed a marked suppressive effects on ear edema induced by xylene in mice,paw edema induced by egg white and fever induced by 2,4dinitrophenol in rats and endotoxininduced fever in rabbits,the extraction of Qingre mixture extracted by 40% ethanol was the most effective.Conclusion Extraction of Qingre mixture extracted by 40% ethanol had feverrelieving and antiinflammatory effects,which were equivalent to the effects of Qingre mixture.
Key words:Qingre mixture; feverrelieving effect; antiinflammatory effect。
清热合剂是由黄芩、葛根、大青叶等五味中药组成的传统中药复方制剂,具有疏散风热、清热解毒、利咽止咳的功能,用于病毒性感冒或流行性感冒所见身热、头胀痛、咽喉红肿疼痛、鼻塞等症的治疗[1,2]。但由于合剂携带服用不便,久储有较多沉淀,外观性状较差和难以作为新药进入药品市场等缺点,本研究拟通过大孔吸附树脂对清热合剂粗提物进行分离纯化后将其研制成颗粒剂,使之药效更明确,降低不良反应的发生率。为了明确清热合剂各提取部位群的药效变化,确保其质量和疗效,本文通过建立大鼠、家兔发热模型、二甲苯致小鼠耳肿胀及蛋清致大鼠足肿胀模型,比较原清热合剂及分离纯化后各提取部位群的解热及抗炎作用,为确定清热合剂的有效部位群提供依据。
1 材料。
1.1 药品与试剂。
清热合剂(QR,ρ=1.35 g·mL—1),中国医科大学附属盛京医院药剂科生产,批号:20071207;阿司匹林肠溶片(50 mg/片),沈阳万隆药业有限责任公司,批号:071002;醋酸地塞米松片(5 mg/片),天津药业基团有限公司,批号:070325;二甲苯,天津市科盟化工工贸有限公司,批号:050480;内毒素,规格500 ng/2500 Eu/支,上海申索试剂有限公司,批号:20070417;羧甲基纤维素钠(CMCNa),上海昌为医药辅料技术有限公司。
1.2 仪器。
HHS电热恒温水浴锅:江苏红旗医疗器械厂;MC107BW型欧姆龙电子体温计:欧姆龙大连有限公司。
1.3 动物。
昆明种小鼠,雌雄各半,体质量25~30 g;Wistar大鼠,雄性,体质量120~150 g、180~220 g;新西兰大耳白兔,雌雄各半,体质量1.8~2.2 kg。均由中国医科大学附属盛京医院医学实验动物中心提供,合格证号:辽实动质字SCXK[辽]2003013号。
将黄芩、葛根、大青叶等五味中药各150 g,加入8倍量70%乙醇,加热回流1.5 h,趁热过滤,再加入8倍量70%(φ)乙醇,加热回流1.5 h,趁热过滤,合并两次提取液,回收乙醇至无醇味,煎煮成生药浓度为1.5 g/mL的清热合剂原液。将该清热合剂原液,经大孔吸附树脂分离,分别用3柱体积的水(水洗杂质)、20%乙醇、40%乙醇、60%乙醇、80%乙醇、95%乙醇洗脱,将各洗脱液减压蒸馏浓缩至500 mL,配成相当于生药1.5 g/mL的提取液。分别形成水(水洗杂质)A提取部位群、20%乙醇B提取部位群、40%乙醇C提取部位群、60%乙醇D提取部位群、80%乙醇E提取部位群、95%乙醇F提取部位群的6个部位群溶液。
1.5 统计学处理。
所有数据均以(±s)表示,两组间均数比较采用t检验;多组均数间的比较采用单因素方差分析(oneway ANOVA),多组均数间两两的比较采用q检验,以P0.05为差异有显著性。
2 方法与结果。
2.1 清热合剂各提取部位群对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响[3]。
取体质量25~30 g的小鼠90只,随机分为9组,每组10只。即实验组分别灌胃( i.g.) 给予清热合剂及其各提取部位群6.0 g·kg—1,阳性对照组 i.g.地塞米松5 mg·kg—1,空白对照组 i.g.等体积的0.5% CMCNa 20 mL·kg—1,连续给药3 d。末次给药后1 h,于小鼠右耳正反面均匀涂抹二甲苯30 μL /只,1 h后脱颈椎处死,用8 mm打孔器在左右耳相同部位打下耳片,扭力天平称重,计算肿胀度(mg)及肿胀抑制率(%)。表1 清热合剂及其各提取部位群对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响。
与空白组比较:*P0.05,**P0.01 由表1可见,与空白组比较,清热合剂B、C、D提取部位群对二甲苯所致的小鼠炎性耳肿胀有明显的抑制作用(P0.05或P0.01),抑制率分别为23.2%、39.7%和30.4%,清热合剂C提取部位群的抑制程度与清热合剂原液、地塞米松(5 mg·kg—1)相当。清热合剂A、E、F提取部位群对二甲苯所致的小鼠炎性耳肿胀有抑制的趋势,但作用不显著(P0.05)。