生姜黄酮乙醇提取条件的优化的策略

姜属姜科，为植物姜的干燥根茎或鲜根茎，多年生草本植物。

具有散寒解表，温中止吐，回阳通脉，燥湿消痰的功效[1]除含有姜油酮姜酚等主要生理活性物质外，还含有蛋白质、多甙、维生素和多种微量元素，集营养、调味、保健于一身。

近年来一些研究表明：生姜中还含有大量的黄酮类化合物[2]黄酮类化合物是一大类天然产物，广泛存在于植物界，是许多中草药的有效成分。

李文智[3]发现将粗姜汁离心分离得到的上清液比沉淀物的抗氧化性能要大得多，造成这种差异的原因是上清液中含有黄酮类物质，本文以生姜为原料，乙醇作为提取剂，通过正交实验研究生姜黄酮的最佳提取条件，为开发利用生姜提供一定的科学依据。

1 材料与方法 　　1.1 材料、试剂和仪器 　　材料：生姜 购于南京苏果超市。

试剂：芦丁 生化试剂，上海化学试剂公司，氢氧化钠、硝酸铝乙醇、无水乙醇、亚硝酸钠均为分析纯。

仪器：鼓风干燥箱（DHG—9240A型）、高速万能粉碎机（XL—400B型）、精密电子天平（FA1204N型）、数控超声波清洗器（KQ—500DB型）、旋转蒸发器（EV351型）、循环水多用真空泵（SHB—）、紫外可见分光光度计（UV752型）、试管、10mL离心管、移液抢等。

1.2 生姜总黄酮测定方法 简历大全 样品的制备 　　生姜洗净晾干，切成5mm厚的姜片，于70℃烘干，用万能粉碎机粉碎，存放4℃冰箱中待用。

1.2.2 芦丁标准曲线的绘制[4] 　　称取芦丁0.02g，用60%乙醇溶解并定容至100mL，得浓度为0.2mg/ml芦丁标准溶液。

采用NaNO2—Al（NO3）3—NaOH络合—分光光度计法，以芦丁为标准样测定生姜提取物总黄酮含量。

吸取芦丁标准溶0.5mL、 1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0mL于6个25ml容量瓶中，加30%乙醇至5ml，加5%NaNO2溶液1ml，摇匀放置6min，加10%Al（NO3）3溶液1ml，摇匀放置6min后加1mol/LNaOH溶液10ml，加70%乙醇至刻度，摇匀放置15分钟。

以试剂作为空白，于510nm波长处测定吸光度，绘制标准曲线，得回归方程：y=12.300x+0.0200，R2=0.9988，见图1： 　　由图1可知，在0.02～0.1mg/ml范围内有良好线性关系。

1.2.3 生姜总黄酮含量的测定 　　称取生姜粉2g，用70%乙醇溶液50ml溶解，70℃水浴下回流提取3h，趁热过滤，滤渣进行二次提取，合并滤液用乙醇定容至100mL，得生姜提取液。

取提取液 1.0ml按照标准曲线反应方法，测得吸光值，带入回归方程，计算出黄酮质量浓度C。

提取率按此公式计算 　　Y=（mV100）/M100% 思想汇报 为总黄酮得率，%；m为1.0mL总黄酮的含量，mg；M为称取的生姜粉质量，mg；V为提取液总体积，mL。

1.3 单因素试验 　　按照1.2.3的试验方法，精确称量固定其他因素的条件下，考虑乙醇浓度（50%，60%，70%，80%，90%）、料液比（1：10、1：15、1：20、1：25、1：30）、浸提时间（1h、2h、3h、4h、5h）、浸提温度（30℃、40℃、50℃、60℃、70℃）四个因素做单因素试验。

1.3.1 乙醇浓度对提取率的影响 　　固定料液比1：20（g：ml）、浸提时间5h、提取温度 70℃，考察乙醇浓度分别为50%、60%、70%、80%和90%时对生姜总黄酮得率的影响。

1.3.2 料液比对提取率的影响 　　固定浸提时间5h、提取温度70℃，乙醇浓度为80%，考察料液比分别为1：10、1：15、1：20、1：25、1：30时对生姜总黄酮得率的影响。

1.3.3 浸提时间对提取率的影响 　　固定提取温度70℃，乙醇浓度为80%、料液比1：25。

考察浸提时间分别为1h、2h、3h、4h、5h时对生姜总黄酮得率的影响。

1.3.4 浸提温度对提取率的影响 　　固定乙醇浓度为80%、料液比1：25、浸提时间5h，考察浸提温度30℃、40℃、50℃、60℃、70℃时对生姜总黄酮得率的影响。

论文代写 生姜总黄酮提取正交试验 　　在单因素试验的基础上，选择乙醇浓度、料液比、浸提时间、浸提温度4个因素，采用L9（34）正交设计，对提取条件进行优化，正交试验因素水平设计见表1。

2 结果与分析 　　2.1 乙醇浓度对提取率的影响 　　由图2可知：黄酮的提取率与乙醇浓度成正比，呈上升趋势，但当乙醇浓度大于80%时，黄酮提取率下降。

由图2可知，乙醇浓度为60%～80%时提取率高于其他浓度时的提取率。

2.2 料液比对提取率的影响 　　由图3可知生姜的提取率随着料液比列的增大而提高，当料液比为1：25时提取率陡增，超过1：25后提取率增加缓慢。

2.3 浸提时间对提取率的影响 　　由图4可知：生姜黄酮类物质的提取率与浸提时间成正比。

2.4 浸提温度对提取率的影响 　　由图5可知，黄酮的提取率随着提取温度升高成上升趋势，由于黄酮类化合物的活性受温度的影响比较大，温度太高对活性造成破坏，因此，提取温度最好不要超过70℃。

2.5 生姜黄酮的正交试验与分析 　　由表2可知生姜黄酮乙醇提取的最佳提取工艺为A3B3C2D3，即乙醇浓度70%，提取温度70℃，料液比1：25，提取时间5h。

从极差R值可以看出RBRDRARC，即影响的顺序为：提取温度提取时间料液比乙醇浓度。

简历大全 结语 　　试验通过对影响生姜总黄酮提取率的各个因素进行正交试验，得出生姜中总黄酮最佳提取条件为提取温度70℃，乙醇浓度70%，提取时间5h，料液比1：25。

参考文献 　　[1]黄泰康.常用中药成分及药理手册[M].北京：中国医药科技出版社，1994.178. 　　[2]吴建华，张丽君.药用姜研究进展[J].陕西中医学院学报，2002，25（1）：61. 简历大全 本文由）选自《中外食品工业》2014年第2期，版权归原作者和期刊所有，非本站代写，如有异议请联系，本站将及时处理。

代写论文。