胼胝体切断对健侧C7移位术后跨大脑两半球功能重组影响的实验研究
【摘要】 明确胼胝体在健侧C7移位术后跨大脑两半球功能重组过程中所起的作用。[方法] 将45只SD大鼠随机分为正常对照组、健侧C7移位模型术后和胼胝体切断术后3个月、5个月、7个月、10个月共9组。采用运动皮层内微电极电刺激技术,定量评价大鼠患肢正中神经代表区在双侧初级运动皮层(MI)内的可塑性变化。[结果]健侧C7移位正中神经术后3个月,患肢正中神经代表区在双侧MI均未出现,术后5个月则仅出现于患肢同侧MI,术后7个月在双侧MI均出现,术后10个月则只出现于对侧MI。而胼胝体切断术后5、7和10个月,患肢正中神经代表区均只出现于患肢同侧MI。[结论]在健侧C7移位大鼠模型上证实术后10个月内运动皮层出现了跨大脑两半球的功能重组,胼胝体在该重组中起关键的通道作用。
Abstract [Objective]To explore the role of callus during transhemispheric reorganization progress after contralateral seventh cervical nerve root transfer to the affected median nerve [Method] Forty—five adult male Sprague—Dawley rats were devided into nine groups A non—operative group served as control , two adult rat models were set up, including the nerve transfer model of contralateral C7 cervical nerve root to median nerve, as well as the callosotomy model Each model included 4 groups according different intervals of examination Intracortical microstimulation was used to study the plastic changes of the affected median nerve representation region in bilateral primary motor cortex (MI) at different intervals, namely 3, 5, 7 and 10 months postoperatively [Result] After stimulating bilateral MI, median nerve representation region of the affected forelimb appeared only in the ipsilateral MI instead of contralateral MI at 5 months after the nerve transfer At 7 months it appeared in MI of both hemispheres Yet at 10 months it appeared merely in the contralateral MI However, the median nerve representation region of affected forelimb appeared merely in the ipsilateral MI at 5, 7 and 10 months after callosotomy [Conclusion] Transhemispheric reorganization was confirmed to appear in MI Transhemispheric reorganization that had taken place in the motor cortex is confirmed to be realized via the corpus callosum。
Key words: brachial plexus;spinal nerve roots;nerve injuries;nerve transfer;functional reorganization。
臂丛神经损伤的治疗方法很多[1,2],其中顾玉东院士首创的健侧C7神经根移位术为研究大脑的可塑性提供了独特的人体模型。作者已在大鼠模型上找到了健侧C7移位术后发生跨大脑两半球功能重组的脑电生理依据[3],然而,胼胝体在该重组过程中是否起作用,尚不清楚。为此,作者在健侧C7移位患侧正中神经大鼠模型的基础上直视下切断了胼胝体,来探讨胼胝体在这种跨大脑两半球功能重组中的作用。
1材料与方法。
11模型制作及动作分组。
111胼胝体切断模型的建立。
左侧全臂丛根性撕脱、健侧C7移位正中神经手术完成后,将大鼠俯卧位固定于立体定位仪上,常规消毒、铺巾。自双外耳道连线与矢状缝交叉点前10 mm处向后做正中纵行切口(长约15 mm),确定前囟前3 mm至前囟后6 mm。显露硬脑膜后,显微镜下用虹膜刀U型切开硬脑膜和软脑膜后,用2 mm宽的特制脑压板沿纵裂将左侧额叶皮层拉开,将前囟前048 mm至前囟后452 mm的胼胝体在直视下切断,胼胝体是色泽白亮的横行白质,镜下容易辨认,见到胼胝体下方的纵行皮层,即判断切断成功。用10/0无创缝线缝合硬脑膜,关闭切口。
112动物分组。
选用体重250~300 g的SPF级雄性SD大鼠45只(由复旦大学动物科学部提供),随机分为9组,每组5只。分为正常对照组、健侧C7移位患侧正中神经模型、胼胝体切断模型术后3、5、7、10个月组,共9组。
12刺激前的动物准备、刺激方法均同前[3]。
13绘图。
将每只大鼠双侧MI采集到的所有位点使用Origin 61绘图软件绘图,构建出MI各代表区位点的散点图,标记出患肢正中神经代表区。
14观察指标。
电刺激大鼠双侧MI时,记录诱发患肢前臂旋前、屈腕或屈指动作的位点总数,作为各组之间比较的变量。电刺激结束后,取标本作大脑冠状面连续冰冻切片(厚约30 μm),将切片常规尼氏染色,观察胼胝体是否完全切断。
15统计学处理。
多组数据的统计学处理均采用单因素方差分析(ANOVA)的S—N—K法。两组数据的比较采用t检验。P005被认为差异有显著性。统计软件为SPSS130。
2结果。
21两种模型大鼠的生物学观察。
健侧C7移位大鼠在术后7个月健肢活动时出现患指的屈曲,10个月患指出现主动抓握食物,而胼胝体切断大鼠术后10个月内均出现患指的屈曲。
22健侧C7移位术后患肢正中神经代表区的可塑性变化结果同前。[3]。
散点图中的阴影部分表示在MI的左前肢(患肢)正中神经代表区。如图1所示为正常双侧MI的代表区,可见左前肢正中神经代表区的位点总数平均280±084个,且均位于患肢对侧的MI。术后3个月,左前肢(患肢)正中神经代表区在双侧MI均未出现。图2所示为胼胝体切断术后5个月时双侧MI各代表区位点的散点图,可见左前肢(患肢)正中神经代表区几乎占据左侧MI整个右前肢代表区。图3所示为胼胝体切断术后7个月时双侧MI各代表区位点的散点图,可见左前肢正中神经代表区面积也几乎占据了左侧MI整个右前肢代表区。图4所示为胼胝体切断术后10个月时双侧MI各代表区位点的散点图,同样,左前肢正中神经代表区仅出现于左侧MI的右前肢代表区内,且面积明显缩小。左侧MI左正中神经代表区面积的比较发现,左侧MI左正中神经位点总数分别为:术后5个月(2440±114个)、7个月(1800±158个)、10个月(360±055个)组。各实验组与正常对照组之间多组间两两比较的结果显示:各组之间有显著差异(F=47888,P00001)。术后5个月组的位点数目显著多于7个月组的(P005),后者的位点数目又显著多于正常对照组和术后10个月组(P005),而正常对照组的位点数目与术后10个月相比无显著差异(P005)。因为每个位点所代表的面积是025 mm2,代表区位点的数目就代表了代表区的面积。结果表明胼胝体切断术后,只出现于左侧MI的左正中神经代表区面积有随时间延长逐渐缩小的趋势。