高效液相色谱测定丹参滴注液中丹酚酸B含量

作者：税丕先 庄元春 何兵 朱烨。

【摘要】 目的建立一种用高效液相色谱（HPLC）法测定丹参滴注液中丹酚酸B的含量的方法。方法色谱柱Dikma Kromasil C18 (5 μm, 100A 250 mm×4.6 mm)；流动相为甲醇—乙腈—甲酸—水(30∶10∶1∶59)；流量为0.8 ml·min—1；检测波长286 nm；柱温30℃；进样量20 μl。结果丹酚酸B的加样提取平均回收率为99.03％，RSD为1.02％，重复性实验的RSD为1.8l％。结论该方法简便可靠，结果稳定，重复性好，该方法可用于测定丹参滴注液中丹酚酸B的含量。

【关键词】 丹酚酸B 含量测定 高效液相色谱法 丹参滴注液。

丹参滴注液收载于国家中成药标准汇编内科心系分册，由丹参中提取的水溶性化合物总丹酚酸制得。总丹酚酸具有抗肝纤维化、抗动脉粥样硬化和改善记忆功能障碍等作用［1］，由丹参素、丹酚酸A、B、E，原儿茶醛等各种芳香酚酸类化合物组成。丹参滴注液标准中对丹参素钠、原儿茶醛进行了高效液相色谱含量测定，对其中含量高、活性强的丹酚酸B未进行含量测定。我们参照有关文献［2，3］，用高效液相色谱柱测定丹参滴注液中丹酚酸B的含量，取得满意效果。

1 器材。

1.1 仪器与试药 戴安高效液相色谱仪（P680A四元泵，PDA—100二极管阵列检测器，TCC—100柱温箱，Chromeleon色谱工作站）。丹酚酸B对照品(中国药品生物制品检定所提供。批号：111562—200302)，丹参滴注液（安徽华源生物药业有限公司生产。规格：250 ml，16 g。批号：061112，061115，061118，061120，061201)。甲醇、乙腈为色谱纯(天津四友公司)，水为重蒸馏水，甲酸为分析纯。

1.2 色谱条件Dikma Kromasil C18 (5 μm, 100A 250 mm×4.6 mm)；流动相：甲醇—乙腈—甲酸—水(30∶10∶1∶59)；流量：0.8 ml·min—1；检测波长286 nm；进样量20 μl。

2 方法与结果。

2.1 溶液的配制。

2.1.1 对照品溶液的配制 取丹酚酸B对照品约5 mg，精密称定，置50 ml量瓶中，用水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5 ml，置50 ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，得10 mg·L—1 的对照品溶液。　　　　2.1.2 供试品溶液的配制 精密量取丹参滴注液(批号061112)10 ml，置50 ml量瓶中， 加水至刻度，摇匀，即得。

2.1.3 阴性样品溶液的制备按丹参滴注液制备方法和“2.1.2”项制得不含丹参的阴性对照品溶液，备用。

2.2 测定方法 精密吸取上述供试品溶液与对照品溶液各20 μl，分别注入高效液相色谱仪，记录色谱图。按外标法以峰面积计算样品的含量。

2.3 方法学验证。

2.3.1 标准曲线的制备 精密称取丹酚酸B对照品适量，配成1 g·L—1的标准储备液；分别吸取10，20，40，80，100 μl分别置于5个1 ml量瓶中，以水稀释至刻度，混匀后分别进样20 μl，记录色谱图见图1。以色谱峰面积(A)对成分浓度(C)作回归统计，回归方程为：A=—9 863.5+13 282.6C，r=0.989 6，线性范围12.56～142.40 mg·L—1。