超声微波协同萃取法提取杜梨果实多糖

作者：赵小亮 白红进 吴翠云 王彦芹 王星军 李雨潇 论文代写。

【摘要】 目的提取杜梨果实多糖，并测定其含量。 方法 采用超声微波协同萃取法和常规水浴提取杜梨果实多糖，并用蒽酮硫酸比色法测定多糖含量。结果超声波—微波协同萃取法比较常规水浴法提取杜梨果实多糖效果更好，两种方法提取多糖的含量分别是13.91%和12.74%；葡萄糖浓度在 25.15～100.6 μg·ml—1范围内呈良好的线性关系，平均回收率为100.5%，RSD1.59%（n=5）。结论 超声—微波协同萃取法可作为杜梨果实多糖提取的首选方法，蒽酮硫酸比色法测定多糖含量的方法准确，重复性好。 代写论文。

【关键词】 杜梨果实 多糖 超声 微波协同萃取 含量测定 论文网。

Abstract：ObjectiveTo extract the polysaccharide from the fruits of Pyrus betulaefolia Bunge，and to determine its content.MethodsUltrasonic—microwave synergistic and water bath were employed to extract the polysaccharide and anthrone—sulphuric acid colorimetry was used to determine its content. Results The re existed remarkably differences between the two methods; ultrasonic—microwave synergistic extraction was the optimal method. The polysaccharide contents of the two methods were 13.91% and 12.74% respectively. The linear range was 25.15～100.6 μg·ml—1 for glucose. The average recovery rates 100.5% (RSD 1.59%，n=5). Conclusion The ultrasonic—microwave synergistic extraction may take the first choice method.The method of anthronesulphuric acid colorimetry for determination of the polysaccharide content is stable and accurate.

代写论文。

Key words：The fruits of Pyrus betulaefolia Bunge； Polysaccharide； Ultrasonicmicrowave synergistic extraction； Content determination 　　杜梨Pyrus betulaefolia Bunge属蔷薇科Rosaceae梨属（Pyrus L.）乔木，在微酸性和碱性土壤中生长良好，尤其能耐盐碱，在瘠薄和干燥土壤中也能生长。其种子发芽率高，能抗病虫害，是防护林及沙荒地造林的珍贵树种。杜梨药用称棠梨，主治功用为敛肺涩肠、止咳止痢。常用于 治疗 久咳、久泻、久痢等［1］。《本草纲目》记载棠梨（即杜梨）“味酸、甘、涩、寒；无毒。烧熟食用，可治泄泻痢疾［2］”。根据 文献 检索， 目前 杜梨主要作为砧木、园林树种以及重要的木材来源广泛分布在我国的北部、东北部和中部各省（区），以黄河流域分布较多［1］。 　　关于杜梨的 研究 主要集中在种子萌发与幼苗生长、幼苗根系生长状况、作为砧木嫁接梨树等方面的研究，对于杜梨果实多糖的提取及含量测定方面的研究未见相关报道。本实验采用超声—微波协同萃取和常规水浴提取杜梨果实多糖，并用蒽酮—硫酸比色法测定多糖的含量，为杜梨资源的进一步开发利用提供 理论 依据。 毕业论文。

1 器材 毕业论文。

1.1 实验材料实验用杜梨于200511采自新疆塔里木盆地，经鉴定为蔷薇科植物杜梨Pyrus betulaefolia Bunge的果实， 自然 风干，去除种子及果柄，粉碎后过40目筛备用。

毕业论文。

1.2 仪器与试药SartoriusBS210S 电子 天平（北京塞多利斯天平有限公司），T6紫外可见分光光度计（北京普析通用有限公司），DZF6021型真空干燥箱（上海精宏实验仪器设备有限公司），CW2000型超声微波协同萃取仪（上海新拓微波溶样测试有限公司），RE5299型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂），115K型高速冷冻离心机（德国Sigma公司），HHS型恒温水浴锅（江苏省金坛市医疗仪器厂），索氏提取器，其他常规玻璃仪器。 　　所用试剂葡萄糖，蒽酮，95%乙醇，无水乙醇，丙酮，乙醚，浓硫酸等均为 分析 纯。 代写论文。

2 方法与结果 论文网。

2.1 多糖的提取与精制 代写论文。

2.1.1 常规水浴提取称取过40目筛杜梨果实干燥粉末一定量，置于索氏提取器中，加入95%乙醇回流提取，去除色素及脂溶性物质，残渣室温挥干溶剂。取此干粉10 g，3份，加入蒸馏水100 ml，在80℃水浴中提取30 min，滤过，滤渣采用同法再提取一次，合并两次滤液及洗涤液，定容至200 ml容量瓶中。所得提取液，一部分作为供试样品，用于含量测定，其余减压浓缩到约50 ml，冷却后搅拌下加入4倍体积的95% 乙醇，静置过夜，4 000 r/min条件下离心20 min，收集沉淀，沉淀经无水乙醇、丙酮及乙醚多次洗涤，后在60℃真空干燥箱中干燥，得精制杜梨果实多糖。 毕业论文。

2.1.2 超声—微波协同萃取法提取按照2.1.1项下方法处理杜梨果实，称取处理过的材料10 g，3份，加入蒸馏水100 ml，用超声微波协同萃取法提取，超声功率50 W，频率40 kHz，微波频率2 450 MHz，温度80℃。提取两次，所得提取液，一部分作为供试样品，用于含量测定，其余照2.1.1项下方法操作，得精制杜梨果实多糖。 论文代写。

2.2 多糖含量的测定 论文网。

2.2.1 蒽酮—硫酸溶液的配制精密称取0.300 7 g蒽酮，缓慢加入浓硫酸完全溶解后转移至100 ml棕色容量瓶中定容，得3.007 mg·ml—1蒽酮硫酸溶液，现配现用。

代写论文。

2.2.2 最大吸收波长的选择精密吸取一定浓度的样品溶液1ml加入具塞试管，加入4.00 ml蒽酮硫酸溶液，摇匀后迅速浸于冰水浴中冷却，后浸于沸水浴中，盖上塞，自水浴重新煮沸起，准确煮沸7 min后立即取出，用自来水冷却10 min后于520～720 nm波长范围内测定吸光度［3］，确定了其最大吸收波长为620 nm。

2.2.3 标准曲线的制备精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖对照品100.6 mg，置100 ml容量瓶中，加蒸馏水溶解，定容，得1.006 mg·ml—1葡萄糖标准溶液。分别移取2.50，5.00，7.50，10.00 ml的标准溶液置于100 ml 容量瓶中定容。量取1 ml系列标准溶液于具塞试管中，以1 ml蒸馏水作空白，分别加入4 ml蒽酮硫酸溶液，立即摇匀，置于冰水中，冷却后一起置于沸水，盖上塞，自再次沸腾加热7 min，之后在流水放置10 min冷至室温后，于620 nm处测定吸光度值［4］，以葡萄糖浓度（C）对其吸光度（A）作回归处理，得回归方程：A=0.006C+0.005 4，r=0.999 6（n=4）。葡萄糖浓度在25.15～100.6μg·ml—1范围内与吸光度呈良好的线性关系。

2.2.4 显色时间的考察取1.006 mg·ml—1葡萄糖标准溶液及样品溶液按标准曲线制备项下的方法测定其吸光度，每隔20 min测定1次，结果表明，标准溶液及样品溶液显色时间一致，且在2 h内稳定。 代写论文。

2.2.5 换算因子的测定精密称取干燥恒重的杜梨果实多糖精制品13.2，23.4 mg两份，置于100 ml容量瓶中，加蒸馏水溶解定容，摇匀。精密量取1 ml，照标准曲线的制备项下的方法操作，测定在620 nm处的吸光度，根据线性回归曲线方程求出质量浓度，代入下式 计算 换算因子［5］，求得f分别为0.5200，0.5243，取其平均值0.522 2。 论文网。