HPLC法同时测定复方利血平氨苯蝶啶片中3组分的含量

【摘要】; 目的 建立测定复方利血平氨苯蝶啶片中氢氯噻嗪、硫酸双肼屈嗪和氨苯蝶啶含量的方法。方法 采用高效液相色谱法，以氰基柱(4.6 mm × 250 mm，10 μm)为色谱柱，以0.01 mol/L庚烷磺酸钠溶液（用体积分数20%磷酸调节pH值至2.7）乙腈（体积比85∶15）为流动相，流速1.0 mL/min，检测波长为316 nm。结果 氢氯噻嗪、硫酸双肼屈嗪和氨苯蝶啶分别在60～180 μg/mL的浓度范围内有良好的线性关系(r=0.999 9)；氢氯噻嗪、硫酸双肼屈嗪和氨苯蝶啶平均加样回收率分别为100.2%、100.1%和100.3%，RSD值分别为0.36%、0.85%和0.83% （n=9）。结论 本方法简便、快速、准确度高，可用于复方利血平氨苯蝶啶片的质量控制。

【关键词】; 高效液相色谱法；复方利血平氨苯蝶啶片；氢氯噻嗪；硫酸双肼屈嗪；氨苯蝶啶　　Abstract:Objective To establish an HPLC method for simultaneous determination of hydrochlorothiazide, dihydralazine sulfate and triamterene in compound reserpine triamterene tablets. Method Samples were analyzed on a reversedphase CN column (4.6 mm × 250 mm，10 μm) with 0.01 mol/L sodium heptanesulfonate (adjusted with 20% H3PO4 to pH2.7)acetonitrile (85∶15) as mobile phase. The flow rate was 1.0 mL/min and the detection wavelength 316 nm.; Results The calibration curves were linear over the range of 60～180 μg/mL(r=0.999 9) for hydrochlorothiazide, dihydralazine sulfate and triamterene. The average recoveries were 100.2% (RSD=0.36%, n=9) for hydrochlorothiazide, 100.1% (RSD=0.85%, n=9) for dihydralazine sulfate, and 100.3% (RSD=0.83%, n=9) for triamterene. Conclusion The method is simple, sensitive and accurate, which could be used for the quality control of compound reserpinetriamterene tablets.

Key words:HPLC；compound reserpinetriamterene tablets；hydrochlorothiazide；dihydralazine sulfate； triamterene。

复方利血平氨苯蝶啶片是由氢氯噻嗪、硫酸双肼屈嗪、氨苯蝶啶和利血平制成的复方制剂，用于治疗轻、中度高血压，氢氯噻嗪和氨苯蝶啶合用能增强利尿作用，硫酸双肼屈嗪和利血平合用对降压效果有协同作用，收载于国家药品标准:化学药品地方标准上升国家标准第十三册［1］。原标准用HPLC法分析，分别用不同波长，不同溶剂各自测定氢氯噻嗪、硫酸双肼屈嗪和氨苯蝶啶的含量，方法费时、麻烦。有关高效液相色谱法测定复方降压片中三组分含量的研究曾有报道［2］，但该方法是测定利血平、氢氯噻嗪和氯氮革的含量，现国家标准处方已删去氯氮革成分。本文参考国家标准,采用高效液相色谱法同时测定复方利血平氨苯蝶啶片中的氢氯噻嗪、硫酸双肼屈嗪和氨苯蝶啶的含量，方法快速、简便、准确，稳定性、重现性好，适用于本品的质量控制。

1; 仪器与试药。

1.1; 仪器。

; 岛津LC10AT型高效液相色谱仪，SPD10A型紫外检测器，HW2000色谱工作站。

1.2; 试药 ; 　　　　氢氯噻嗪对照品（批号：10039—200001）、硫酸双肼屈嗪对照品（批号：100514—200301）、氨苯蝶啶对照品（批号：100429—200401）均由中国药品生物制品检定所提供；乙腈为色谱纯，庚烷磺酸钠、磷酸为分析纯，水为去离子水，复方利血平氨苯蝶啶片（北京双鹤药业有限公司生产，批号分别为070603 D，071004 D，071012 C）。

2; 方法与结果。

2.1; 色谱条件 　　色谱柱：Spherisorb CN柱（4.6 mm × 250 mm，10 μm）；流动相：0.01 moL/L庚烷磺酸钠溶液（用体积分数20%磷酸调节pH值至2.7）乙腈（体积比85∶15）；柱温：40 ℃；流速：1.0; mL/min；检测波长：316 nm；进样量：20 μL。

2.2; 溶液的制备。

2.2.1; 对照品溶液的制备;。

精密称取105 ℃干燥1 h后的氢氯噻嗪对照品和80 ℃减压干燥4 h后的硫酸双肼屈嗪对照品和氨苯蝶啶对照品适量，加甲醇水（体积比30∶70）超声处理使溶解并制成各含0.12 mg/mL的对照品溶液。

2.2.2; 供试品溶液的制备;。

取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于氢氯噻嗪12.5 mg），置100 mL量瓶中，加甲醇水（体积比30∶70）适量，超声处理20 min，放冷，加甲醇水（体积比30∶70）稀释至刻度，摇匀，离心（3000 r/min）10 min，取上清液为供试品溶液。取甲醇水（体积比30∶70）为空白溶液。 ; 　　取对照品、供试品和空白溶液，按上述色谱条件各进样20 μL，记录色谱图，见图1。

2.3; 线性试验 ; 　　　　精密称取氢氯噻嗪、硫酸双肼屈嗪和氨苯蝶啶对照品各30 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇水（体积比30∶70）适量，超声处理并稀释至刻度，摇匀，精密量取2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL分别置20 mL量瓶中，加甲醇水（体积比30∶70）稀释至刻度，摇匀，各进样20 μL，按上述色谱条件测定。以峰面积（A）对浓度（ρ）进行回归， 得回归方程氢氯噻嗪为ρ=0.0001293A+5.606，r=0.999 9；硫酸双肼屈嗪为ρ=0.0002904A+24.531， r=0.999 9；; 氨苯蝶啶为ρ=0.000106A+10.779， r=0.999 9；表明3种成分在60～180 μg/mL的浓度范围内线性关系良好。