香附对未孕大鼠离体子宫肌收缩的影响
作者：李志强，马力扬，徐敬东，杨慧霞。
【摘要】 目的 探讨香附对未孕大鼠离体子宫平滑肌条运动的影响及其机制。方法 选用Wistar雌性未孕大鼠60只，体重250—300g，用Biolap410生物机能仪记录正常子宫平滑肌肌条收缩运动，并分别用苯海拉明(2×10—6mol/L)、酚妥拉明(2×10—6mol/L)、异搏定(2×10—7mol/L)、吲哚美辛(2×10—5mol/L)作用于肌条5min后，加入香附水煎醇沉液(以下简称香附)以及单用香附，观察对离体子宫平滑肌运动的影响并分析作用机制。结果 香附减弱未孕大鼠离体子宫平滑肌的收缩运动，收缩波的频率减慢，振幅减小，持续时间缩短。结论 香附减弱未孕大鼠离体子宫平滑肌的收缩运动，该作用可能是通过前列腺素的合成与释放，与L型钙通道、H1受体、α受体无关。
【关键词】 大鼠；离体子宫平滑肌；香附；苯海拉明；酚妥拉明；异搏定；吲哚美辛。
Effect of nutgrass galingale rhizome decotion on contractile activity of uterine smooth muscle strips of nonpregnant rats in vitro。
ABSTRACT: Objective To study the effects of nutgrass galingale rhizome decotion on contractile activity of uterine smooth muscle strips of nonpregnant rats. Methods We selected 60 Wistar nonpregnant rats of weight 250—300g to record the effects of nutgrass galingale rhizome decotion (1.0g/L, 2.0g/L, 4.0g/L, 8.0g/L) on contractile activity of uterine smooth muscle strips of nonpregnant rats with Biolap 410 Biological System. Four antagonists, diphenhydramine(2×10—6mol/L), phentolamine (2×10—6mol/L ), verapamil (2×10—7mol/L), and indomethacin (2×10—5mol/L) were used to study their mechanisms respectively. Results Water extract of nutgrass galingale rhizome (4×10—3kg/L) could significantly weaken uterine contractile activity of nonpregnant rats, lessen the frequencies, shorten the duration and lower the amplitude of contractile activity. Conclusion The effect of nutgrass galingale rhizome on contractile activity of uterine smooth muscle strips in rats may be mainly associated with prostaglandin synthese or release nothing with Lvoltagedependant calcium channels, H1 receptor or α receptor.
KEY WORDS: rat; isolate uterine smooth muscle; nutgrass galingale rhizome; diphenhydramine; phentolamine; verapamil; indomethacin。
香附，异名雀香、莎草根等，为莎草科植物莎草(Nutgrass galingale rhizome)的干燥根茎。本品味辛、微苦、微甘，性平，具有行气解郁、调经解痛之功效。香附醇提取物对注射酵母菌及内毒素引起的大鼠发热有明显的解热作用，并有起效快、持续时间长的特点[12]。此外，其挥发油对小鼠正常体温有明显的降温作用。其解热镇痛有效成分可能为三萜类化合物，香附的有效成分为α香附酮，香附流浸膏能抑制豚鼠、家兔、猫、犬等离体已孕及未孕子宫的收缩[3],但有效作用机制尚未明确。本研究将探讨其可能机制。
1 材料与方法。
1.1 动物及离体子宫肌条标本准备 成年未孕Wistar大鼠60只，体重250—300g，由兰州医学院实验动物室提供(合格证书：医动字第3676494号)。动物于实验前72h皮下注射乙烯雌酚0.5mg/kg，人工造成动情期以提高子宫对药物的敏感性。猛击大鼠头部致晕厥，游离卵巢及子宫分叉处之间的中段子宫，沿系膜纵轴剖开子宫角，经Krebs缓冲液漂洗后，平铺固定在盛有石蜡的培养皿中，加入Krebs液并持续供给950mL/L O2和50mL/L CO2混合的标准气体。在石蜡盘中，用固定的两片平行刀片沿平滑肌纤维的纵行方向取宽2mm的肌条，用大头针固定两端，以肌条平展为宜，用手术缝线将肌条扎紧打结，另一端打结后再结一个直径约0.5cm的环以备悬挂。扎线后的肌条长约5—8mm。将肌条分别安置在盛有5mL 37℃ Krebs 液的CW3恒温平滑肌肌槽中。
1.2 药品及配制 香附购于甘肃省黄河中药材批发市场，经过兰州医学院生药教研室周印锁教授鉴定后，按常规制备为1000g/L的水煎剂，于4℃冰箱内冷藏保存。使用时用250g/L NaHCO3调pH值为7.3—7.4，并稀释至其终浓度为100g/L。苯海拉明(江苏兴化制药厂，批号：00032331)，针剂20g/L；酚妥拉明(上海旭东海普药业有限公司，批号：20000502)，针剂10g/L；异搏定(上海禾丰制药有限公司，批号：00701)，针剂5g/L；吲哚美辛(江苏太仓制药厂，批号：990113)，于50g/L的NaOH溶液中溶解后，以10mol/L的盐酸滴定至pH为7.4，四种药品分别制备为2×10—6mol/L、2×10—6mol/L、2×10—7mol/L、2×10—5mol/L终浓度的溶液。
1.3 实验分组及方法 将大鼠随机分为5组，每只大鼠取4条平滑肌标本，将肌条按1.1中制备并分别安置在恒温平滑肌肌槽中，每个肌槽中分别盛有5mL 37℃ Krebs液。肌条在1g的前负荷下温育，每20min更换一次5mL新鲜的Krebs液(37℃)，待肌条的自发活动平稳后再加入药物。肌条平稳的自发活动设为正常对照组，之后累计加入香附100g/L50μL使其终浓度(指溶于肌槽中5mL溶液后的浓度)分别为1.0、2.0、4.0、8.0g/L，为单用香附组。肌条的自发活动平稳后分别加入苯海拉明、酚妥拉明、异搏定、吲哚美辛5min后，再加入香附(2.0g/L)为受体拮抗剂+香附组(给药组)。