浅述奶牛传染病检测和预防措施
一、材料与方法 1.材料论文联盟 乙型肝炎诊断试剂盒购于上海某生物有限公司；牛传染性胸膜肺炎补体结合反应抗原、标准阴性血清和阳性血清、溶血素补体由某生物制品厂提供；牛传染性鼻气管炎抗原、IBR弱毒株、阳性血清购于中国兽医药品监察所，阴性血清取自检查牛；奶牛血清来源于某省市的奶牛场和奶牛专业户。 2.方法 (1)酶联免疫吸附试验检测奶牛类人乙型肝炎 ①每孔加入待检样品50L，设阴、阳性对照各2孔，每孔50L，并设空白对照1孔。②手工洗板，弃去孔内液体，洗涤液注满每孔静置5s，甩干、重复5次。③每孔加入酶结合物50L(空白对照除外)，充分混匀，封板，置37℃孵育30min。④重复操作②。⑤每孔加显色剂A液、B液各50L，充分混匀，封板，置37℃孵育15min。⑥每孔加入终止液50L，混匀。⑦用酶标仪读数，取波长在450nm，先用空白孔校零，然后读取每孔D值。 (2)类人乙型肝炎病理形态学观察 用肝脏穿刺法观察类人乙型肝炎病理形态学。用长12～15cm，内径3mm的长注射针头对20头奶牛11～12肋间进行穿刺，取肝脏组织活体样本，将其保存于10％福尔马林中。同时解剖HBsAg、HBeAg双阳性奶牛，做病理切片观察。用HE、VanGieson—氏、过碘酸一苯肼Schiff(PAS)希夫氏染色法分别对肝脏组织切片.进行染色，同时用透视电镜做超微结构观察。另将一部分肝脏组织活体样本放在灭菌的平皿中，剪碎研磨，用灭菌生理盐水稀释后，吸取上清液1.5mL，置Eppendorf管中，经差数离心和饱和硫酸铵沉淀，初提物再经150、300、500g/L蔗糖梯度离心，PEG浓缩后，负染，电镜观察病毒颗粒。
毕业论文 (3)补体结合反应检测牛传染性胸膜肺炎 血清(包括被检血清(样品血清)、阳性血清(补体结合试验标准血清)、阴性血清(补体结合试验标准血清)、致敏红细胞(对照)、抗原(对照)孔分别加入抗原(补体结合试验抗原)，阴性血清对照孔、致敏红细胞对照孔不加抗原；然后分别加入补体，致敏红细胞对照孔不加补体；再加入灭菌巴比妥缓冲液，振荡混匀后置37℃水浴30min；再加入6％致敏红细胞(绵羊红细胞与15个单位的溶血素混合液)，振荡均匀后置37℃30min，2000r/min离心5min，观察结果。 二、试验结果 1.奶牛乙型肝炎 (1)奶牛肝功能检测 对HBsAg、HBeAg双阳性的奶牛进行肝功能检测，在10头双阳性中有8头的谷氨酸丙酮转氨酶(GPT)谷氨酸草酰酸转氨酶(GOT)，GPT在400～600U/L之间，表现为急性病毒性乙型肝炎(AHB)。2头奶牛血清GPT缓慢上升，缓慢下降，GPT在200300U/L之间，表现为慢性病毒性乙型肝炎(CHB)。 (2)奶牛乙型肝炎病毒形态学观察 将HB—sAg、HBeAg双阳性奶牛肝脏组织做电镜观察，发现肝脏组织中有密集的HBV颗粒，包括大球形Dane颗粒、小球形颗粒、管球形颗粒3种。这些颗粒与人HBV的颗粒相似(图1)。 (3)奶牛乙型肝炎病理组织学观察 代写论文 病牛肝脏主要表现为肝细胞的变性：胞浆疏松、气球样变(水肿变性)、脂肪变性、嗜酸性变、毛玻璃样变，肝细胞坏死，炎症细胞浸润，肝实质细胞增生和间质组织增生(图2、3)。 (4)奶牛乙型肝炎超微结构观察 肝细胞胞浆内线粒体变性、坏死、溶解、消失。核膜的双层膜不清晰或破裂，核孔增大。胶质纤维变性、严重肿胀、变性、坏死(图4、5)。 2.奶牛传染性鼻气管炎 传染性鼻气管炎抗体滴度测定结果 对29份阳性反应奶牛血清中和抗体滴度进行测定，血清两倍递增稀释，从1：1～1：32，结果均为阳性反应(中和指数在50％以上为阳性)(表1)。 三、治疗 目前奶牛乙型肝炎、传染性鼻气管炎尚无有效的治疗药物，只有对症治疗。为防止细菌的继续感染，可应用抗病毒药物和广谱抗生素或磺胺类药物进行治疗，高热时可注射复方氨基比林20～40mL。同时，也可强心、补液、解毒治疗，如林格氏液1000～3000mL/次，安钠加2～5g/次、VC2～4g/次，每日2次。如关。