鲎试验检测甘氨酰谷氨酰胺中细菌内毒素的方法学研究

【摘要】; 目的：确定甘氨酰谷氨酰胺细菌内毒素鲎试验检查法的可行性。方法：供试品干扰试验后，采用凝胶鲎试验对样品中的细菌内毒素进行检测。结果：三批样品稀释至20 mg/mL、10 mg/mL时，对细菌内毒素的检测均无干扰作用，样品中细菌内毒素的含量均小于0.025 EU/mg。结论：所建立方法检查甘氨酰谷氨酰胺的细菌内毒素可行。 毕业论文。

【关键词】; 甘氨酰谷氨酰胺；细菌内毒素；鲎试验；干扰试验 毕业论文。

细菌内毒素检查是药品一个非常重要的安全指标。特别对注射用原料药和注射用制剂药。近年来，世界各国越来越多地以细菌内毒素检查法检查药品和生物制品中致热物质来代替兔法进行热原检查。甘氨酰谷氨酰胺（Glycyl?Glutamine）溶解度大，进入人体内迅速水解为甘氨酸和谷氨酰胺而发挥作用。谷氨酰胺是人体内的一种条件必需氨基酸。临床上谷氨酰胺、酪氨酸与支链氨基酸以二肽形式应用于急性胰腺炎、肝、肾、骨骼肌患者的相应氨基酸供应，如复方氨基酸（15）双肽注射液。《中国药典》2005年版尚未收载该品种。我们对3批样品进行了细菌内毒素检测，以考察该方法的可行性。

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1; 药品与试剂 ; 　　　　甘氨酰谷氨酰胺（四川思达康药业有限公司，批号：050701、050702、050703）；细菌内毒素标准品（中国药品生物制品检定所，批号：2004?2）；细菌内毒素检查用水（湛江安度斯生物制品有限公司，批号：0504300）；鲎试剂（湛江安度斯生物制品有限公司，λ=0.25 EU/mL,批号：0510311），鲎试剂（湛江博康海洋生物有限公司，λ=0.25 EU/mL，批号：0602072）。 毕业论文。

2; 方法与结果 毕业论文。

2.1; 鲎试剂灵敏度的复核 ; 　　　　照文献［1］附录规定的方法，对实验所用的鲎试剂（TAL）进行灵敏度复核。结果鲎试剂的实测灵敏度均在0.5～2.0 λ之间，符合规定。正式实验时取λ作为鲎试剂的灵敏度［2］。 毕业论文。

2.2; 样品细菌内毒素限值的确定 ; 　　　　参照《中国药典》确定样品的细菌内毒素限值（L），L=K/M，K为人用每公斤体重每小时最大可接受的细菌内毒素剂量，非放射性药品静脉途径给药时K值为5 EU/(kg·h)，M为人用每公斤体重每小时的最大供试品剂量，以mg/(kg·h)表示，人均体重按60 kg计算，甘氨酰谷氨酰胺现在临床最大用量约为50 mg/kg。L值应为6 EU/mg。参照《中国药典》2005年版二部甘氨酸原料细菌内毒素的限度值（0.02 EU/mg）［1］和临床用量，根据生产控制从严的实际情况，综合生产、临床用药和检验的实际情况，将甘氨酰谷氨酰胺的L值定为0.025 EU/mg。

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