葛根素对酒精中毒后家兔离体小肠平滑肌活动的影响
作者:孙晖 田伟 张慧 刘红霞 范倩倩 刁汇玲。
【摘要】 目的 观察葛根素对酒精中毒后家兔离体小肠平滑肌活动的影响,探讨其解酒机制。方法 制备家兔十二指肠离体肠段标本, 采用常规离体灌注小肠平滑肌标本活动的实验方法, 记录用药前后肠段平滑肌自发收缩性活动变化。结果 乙醇使家兔小肠平滑肌收缩活动的幅度、频率明显减小,与乙醇单用相比,葛根素使以上两项指标进一步降低,并呈剂量依赖关系。结论 葛根素加强了乙醇对小肠活动的抑制作用,可能并非通过其对小肠作用达到解酒之功效。 【关键词】 葛根素;乙醇;小肠平滑肌pared with ethanol, the amplitude and frequency of smooth muscle were reduced by injected into Puerarin in dosedependent manner.Conclusion Puerarin could enhance the inhibitory effects of ethanol on small intestine smooth muscle, so it cannt alleviate alcoholism by the above effects. 【Key words】 puerarin, alcohol,small intestine smooth muscle 葛根素(puerarin,普乐林) 是豆科属植物葛根中的有效成分,据《千金方》记载有“葛根主解酒毒”之功效。据报道酒精可通过抑制小肠平滑肌的活动,延缓酒精在小肠内停留的时间,促进其吸收,进而加深酒精中毒[1]。本研究观察葛根素对乙醇处理后离体小肠平滑肌运动的影响,探讨其解酒之机制。 1 材料与方法 1.1 材料 动物: 健康家兔16只, 体重1.15~2.10 kg,雌雄不拘,由滨州医学院实验动物中心提供。仪器与药品: SMUP型生物信号处理系统(上海第一医科大学生产);HLS46平滑肌槽恒温仪(上海康为医疗科技发展有限公司品质提供);Tyrodeps(台氏)溶液, 临用时配制;葛根素注射液(山东鲁抗晨欣有限公司生产,批号为国药准字H20033187); 无水乙醇(山东青州鑫海科技开发有限公司) ;乙醇和葛根素均用Tyrodeps溶液稀释。 1.2 离体小肠平滑肌标本的制备 家兔实验前禁食24 h,自由饮水,实验时猛击其头枕部致昏, 迅速剖开腹腔, 找出胃幽门与十二指肠交界处, 以此处为起点, 取十二指肠近端20 cm肠管。先将该肠管相连的肠系膜分离, 再将拟取的肠管两端剪断,将游离的肠管取出体外, 置于盛有保持38℃的Tyrodeps溶液的烧怀中, 用注射器抽取温Tyrodeps溶液洗净肠内容物。当肠管活动明显时, 将其剪成2 cm 的肠段作为实验标本。 1.3 小肠平滑肌活动的记录方法 小肠平滑肌标本一端系于通气管钩上, 另一端垂直连接张力换能器,然后通过升降换能器的高度, 以牵张结线, 使标本垂直悬挂于38℃的10 ml恒温浴管的Tyrodeps液中,给予2 g负荷平衡组织30 min,并向其中缓慢通氧(95%O2 和5%CO2) , 速度控制在30个/分气泡。利用SMUP型生物信号处理系统记录肠平滑肌活动曲线, 观察收缩活动的幅度、频率。每次实验项目完成后, 用38℃温热Tyroedps 溶液反复冲洗肠管, 每次5 min, 共3次, 然后观察肠管活动恢复情况。 1.4 葛根素对家兔小肠平滑肌活动的影响 取8只家兔制备小肠平滑肌标本,待收缩活动稳定20 min后,累积加入葛根素并使其终浓度为2、4和8 mg/ml,加药间隔时间为5 min,观察肠平滑肌的自发收缩活动。 1.5 葛根素对乙醇作用后家兔小肠平滑肌活动的影响 取8只家兔制备离体小肠平滑肌标本,待收缩活动稳定后20 min,加入5 ml/L乙醇[1],观察乙醇对肠平滑肌自发收缩活动的影响,随后累积加入葛根素,使其终浓度为2、4和8 mg/ml,加药间隔时间为5 min,观察葛根素对酒精作用后肠平滑肌自发收缩活动的影响。 1.6 统计学处理 所有数据用x±s表示,以给药前5 min 小肠平滑肌活动的收缩幅度、收缩频率作为对照值;用方差分析和组间两两比较t检验以判断差异的显著性。 2 结果 2.1 葛根素对家兔离体小肠平滑肌活动的影响 葛根素显著抑制家兔小肠平滑肌的收缩活动,随剂量加大抑制作用加强,见表1。表1 不同浓度葛根素对离体小肠平滑肌活动的影响 2.2 葛根素对乙醇作用后家兔小肠平滑肌活动的影响 表2结果显示,经乙醇处理后,小肠平滑肌的收缩幅度及频率分别为(3.94±0.27) mm、(10.45±1.98)次/min,与对照相比显著降低;4、6和8 mg/ml葛根素与乙醇共同处理小肠标本,小肠平滑肌的收缩幅度及频率与乙醇对照相比显著下降。以上结果表明,乙醇可抑制小肠平滑肌的收缩活动,葛根素与乙醇具有协同作用,并随剂量增加此协同作用增强。表2 不同浓度葛根素对酒精作用后离体小肠平滑肌活动的影响注:乙醇对照组与对照相比,*P0.05;与乙醇对照相比,#P0.05。