不同预充液对处于机械应力下的红细胞的保护作用
作者：胡强,于坤,张燕婉,王红月,龙村。
【摘要】 目的 比较红细胞处于不同预充液中，受到相同程度机械应力作用时的溶血情况。方法 10个单位浓缩红细胞（200 ml），每袋均分为4份，各50 ml，分别加入50 ml乳酸钠林格氏液（L组）、5%人血白蛋白（A组）、4%琥珀酰明胶注射液（G组）和6%羟乙基淀粉注射液（H组）。混匀后，将其预充于以滚压泵驱动的循环装置上，以1 L/min的流量室温下循环4 h。分别于循环开始时、1 h、2 h、3 h、4 h取血标本2 ml，离心后取上清液，测定游离血红蛋白（Free Hb）和乳酸脱氢酶（LDH）水平，于循环开始和结束时取血标本测定血气、血红蛋白浓度和乳酸脱氢酶（LDH）。红细胞形态学变化采用伊红染色后光镜下观察。结果 4组游离血红蛋白和乳酸脱氢酶水平循环后各时点均较基础值有不同程度升高，差异有显著性（p0.05）。循环后各时点A组和G组游离血红蛋白和乳酸脱氢酶水平均较其他两组低,4 h差异有显著性(p0.05)。红细胞形态在A组和G组维持较好。结论 受到机械应力时，人血白蛋白和琥珀酰明胶对红细胞的保护作用较好。
Protective Effects of Priming Solutions on Erythrocytes Exposed to Mechanical Stress。
Abstract: OBJECTIVE To investigate the protective effects of priming solutions on erythrocytes exposed to mechanical stress. METHODS Free haemoglobin and LDH release from packed red blood cells in 4% fluid succinylated gelatin, 5% albumin solution, 6% hydroxyethyl starch and Sodium Lactate Ringer‘s Injection was investigated in vitro during circulation with a roller pump from a heart—lung machine for 4 hours at a flow rate of 1.0 L/min at room temperature. RESULTS Erythrocyte osmotic fragility was similar among all groups. Free haemoglobin and LDH concentrations became progressively higher in every group. 4% fluid succinylated gelatin appears to have potent erythrocyte protective properties similar to those of albumin. CONCLUSION This effect could decrease mechanical haemolysis during extracorporeal circulation if modified fluid gelatin or albumin solution is used as part of a priming solution.
Key words：Erythrocyte;Haemolysis; Hydroxyethyl starch; Succinylated gelatin; Albumin。
随着心血管手术的普遍开展，体外循环（Extracorporeal circulation，ECC）技术也越来越多的被各级医院所应用。ECC期间红细胞破坏是不可避免的，红细胞膜很薄，在机械作用或高渗透压下，由于表面张力的影响或压力的突然变化会发生破裂，或因老化发生溶解，从而释放其内容物（主要为血红蛋白），会对机体造成一系列不良影响。
通常用血浆中游离血红蛋白（free haemoglobin）的含量表示ECC中的血液破坏程度［1］。血浆游离血红蛋白的正常值是0～5 mg/dl。在活体中，血浆中破坏的游离血红蛋白会被肾脏和网状内皮系统清除。ECC导致的游离血红蛋白浓度中等程度增高时，机体有清除它的能力，正常的网状内皮系统可清除约0.1 mgHb/(kg·min)。当经肾脏滤过血红蛋白的浓度在100 mg/dl以上时，出现血红蛋白尿；当达到300 mg/dl时，可导致肾功能损害。溶血因其与一氧化氮结合会导致血管收缩，还会促进全身炎性反应。引起红细胞损伤的因素很多，包括机械因素和生化因素，血浆蛋白的稀释使红细胞脆性增加，采用晶体和血浆代用品进行血液稀释广泛应用于ECC，本研究旨在探讨一定的机械应力下红细胞在不同预充液中的溶血情况。
1 材料与方法。
1.1 预充液。
乳酸钠林格氏液（上海百特医疗用品有限公司）；5%人血白蛋白（上海莱士血制品有限公司）； 4%琥珀酰明胶注射液（血定安，沈阳贝朗医药有限公司）和6%羟乙基淀粉注射液（贺斯，北京费森尤斯卡比有限公司）。
1.2 实验方法 10个单位浓缩红细胞（200 ml），每袋均分为4份，每份50 ml，分别加入50 ml乳酸钠林格氏液（L组）、5%人血白蛋白（A组）、4%琥珀酰明胶注射液（G组）和6%羟乙基淀粉注射液（H组），混匀，将其预充于一ECC装置，此装置由一个一次性储血袋（山东威高集团有限公司，200 ml）、一段1/4英寸硅胶泵管（北京普惠公司，20 cm）、连接管路（北京普惠公司）组成。采用STOCKERT—Ⅱ型双头泵（STOCKERT公司，德国）。调节泵管松紧度，使泵后连接管内的液面垂直高度于泵头上方75 cm处，调节至液柱每min下降2.5 cm。随机配置两种混合液开始以1 L/min的流量室温下循环4h［2］。将尚未使用红细胞放入冰箱保存，待4 h后，取出配置另两种混合液，再使用同一台双头泵以1L/min的流量室温下循环4 h［2］。
1.3 观测指标。
分别于ECC开始时、1 h、2 h、3 h、4 h取血标本2 ml，离心后取上清液，测定游离血红蛋白（Free Hb）和乳酸脱氢酶（LDH）水平，于ECC开始和结束时取血标本测定血气、血红蛋白浓度。观测ECC结束时即ECC 4 h后的红细胞形态。
1.4 检测方法。
游离血红蛋白用联苯胺显示法测定。乳酸脱氢酶用南京建成生物制品研究所提供的试剂盒检测。红细胞形态学变化采用伊红染色后光镜下观察。
1.5 统计学方法。
利用SPSS 10.0统计软件包进行处理。计量资料采用均数±标准差表示，组间比较采用配对t检验，组间比较采用多个独立样本的秩和检验 ，P0.05为差异显著。