腊肠杆菌中几丁质酵素的选育与表现的研究
摘要：本研究由Bacillus cereus NCTU2的染色体DNA选殖得几丁质酵素(ChiNCTU2)之基因，并成功的接进载体pPCR上。经由定序，几丁质酵素(ChiNCTU2)之基因共有1083个核苷酸，相当於360个胺基酸。经与Genebank基因资料库上B. cereus ChiA比对，发现两段基因有27个核苷酸不一样，导致7个胺基酸的差异。经与先前纯化酵素之N端序列比较推测，其前27个胺基酸为讯息胜肽，剩余之333个胺基酸形成胞外酵素，分子量为36184 Da. 简历大全 此酵素经胺基酸序列比对，在醣类水解酵素中，属於家族18,其蛋白质结构应为(/)8的结构，且仅具有单一催化区域(catalytic domain)，而不具备其他的辅助区域。 毕业论文 此基因被建构於pRSET A载体上并以大肠杆菌[BL21(DE3)]表达之。其中含讯息胜肽之基因，(p)chi/21,无法大量表现几丁质酵素，但去除讯息胜肽之基因，(m)chi/21,则可表现出蛋白质，可惜所得到之酵素为包涵体而不具活性。尝试利用透析的方式对包涵体进行蛋白质再摺叠，尚未找到可以使几丁质酵素恢复活性之条件。 另外，ChiNCTU2此刻正被建构於Bacillus megaterium之表现系统，本报告亦将涵盖此系统之先期研究成果。 思想汇报 简历大全 代写论文 目录 开题报告 第一章 绪论。
前言 思想汇报 几丁质(chitin) 总结大全 /hTml/zongjie/。
论文代写 几丁质酵素(chitinase)的概述及其种类 总结大全 /hTml/zongjie/。
1—3.2几丁质酵素在演化上的分类 开题报告 几丁质酵素的水解反应机制 作文 几丁质酵素的活性测定方法。
开题报告 几丁质酵素与几丁寡醣之应用 论文网 几丁质酵素的应用 思想汇报 乙醯几丁质寡醣的性质与应用 枯草杆菌属(Bacillus spp. )重组基因表现系统。
以枯草杆菌属作为生产重组蛋白质的宿主细胞。
论文网 表现系统之简介 代写论文 研究目的 开题报告 第二章 实验方法与步骤 概述 思想汇报 一般叙述。
简历大全 药品、器材与仪器总览 总结大全 /hTml/zongjie/。
2—1.3几丁质酵素活性之测定 论文网 几丁质酵素的基因选殖及定序 总结大全 /hTml/zongjie/。
2—2.1 B. cereus NCTU2染色体DNA的纯化 论文代写 几丁质酵素基因的选殖 思想汇报 几丁质酵素基因与pPCR载体的接合(ligation) 论文网 基因片段之定序(cycle—sequencing 毕业论文 系统中几丁质酵素之表现 论文网 与表现型载体(expression vector)pRSET A的接合(ligation) 质体DNA之转型。
毕业论文 重组几丁质酵素诱导表现之测试 毕业论文 重组几丁质酵素之活性测试 总结大全 /hTml/zongjie/。
2—3.5重组蛋白质在细胞内的分布情形 作文 重组几丁质酵素的再折叠(Refolding) 论文代写 概述——文献回顾。
作文 重组几丁质酵素的再折叠 代写论文 系统中几丁质酵素之表现 简历大全 质体DNA 之建构。
论文代写 原生质体(protoplasts)的制备 毕业论文 质体DNA的转型 论文网 质体DNA的纯化 简历大全 蛋白质表现之测试。
思想汇报 第三章 结果与讨论 作文。