南虎凝胶剂抗炎镇痛作用及其作用机制
作者：孔祥艳，肖长虹，吴启富，易世宏。
Antiinflammatory and analgesic effects of Nanhu Gelata and its mechanism。
【Abstract】 AIM: To estimate the antiinflammatory and analgesic effects of Nanhu Gelata and to study its mechanism. METHODS: Xyleneinduced mouse ear edema models and carrageenaninduced rat paw edema models were used to study the antiinflammatory effects. Hotplate test in mice was used to study the analgesic effects. The contents of IL1 and TNFα in the carrageenaninduced rat paw edema tissues were measured using rat IL1β ELISA and TNFα ELISA kits to explore the mechanism of its antiinflammatory and analgesic effects. RESULTS: Nanhu Gelata significantly suppressed xyleneinduced mouse ear edema and carrageenaninduced rat paw edema. The pain threshold of hotplate test mice was remarkably improved by Nanhu Gelata. The content of IL1 and TNFα in the inflammatory tissue extracts significantly decreased. CONCLUSION: Nanhu Gelata has some significant antiinflammatory effects on acute inflammatory reactions. Nanhu Gelata significantly relieves pain reactions induced by heat. The mechanism of antiinflammatory and analgesic effects of Nanhu Gelata may be related to its effect of decreasing the IL1 and TNFα content in inflammatory tissues.
【Keywords】 Nanhu Gelata; antiinflammatory effects; analgesic effects; mechanism。
【摘要】 目的：评价南虎凝胶剂的抗炎镇痛作用，揭示其抗炎镇痛作用机制. 方法：用二甲苯致小鼠耳肿胀、角叉菜胶致大鼠足爪肿胀模型,考察南虎凝胶剂的抗炎作用； 热板法观察南虎凝胶剂的镇痛作用. 用大鼠IL1β ELISA试剂盒和大鼠TNFα ELISA试剂盒检测角叉菜胶致炎大鼠足跖肿胀组织中IL1与TNFα含量，了解南虎凝胶剂对炎性组织中IL1及TNFα的影响，揭示其抗炎镇痛作用机制. 结果：南虎凝胶剂外用给药,可明显减轻小鼠耳肿胀度,降低角叉菜胶所致大鼠足爪肿胀，明显延长热刺激小鼠痛阈值，降低炎性组织提取液中IL1及TNFα含量. 结论：南虎凝胶剂对炎症反应具有明显的抑制作用和中枢镇痛作用，其抗炎镇痛作用机制可能与其抑制IL1与TNFα产生有关.
0引言。
南虎凝胶剂是根据我科经验方，以南蛇藤为主药，虎杖、没药为臣药和佐药,提取各药主要有效成分，按一定比例配制成的凝胶剂. 南蛇藤具有清热解毒、祛风除湿、活血消肿的功效，现代药理研究显示南蛇藤中南蛇藤素、扁蒴藤素具有抗炎、抗菌、抗病毒等作用［1］. 虎杖清热祛湿，现代药理研究表明虎杖具有抗氧化、清除自由基，调节免疫功能等作用［2］. 没药能散瘀消肿止痛，是治疗外伤瘀血的常用药. 南蛇藤用于类风湿关节炎等疾病的治疗已有一定历史，但还没有外用剂型的报道. 我们采用分散性好、黏附力强、稳定性好的凝胶剂剂型［3］，不仅可以保证药效作用持久，而且应用方便. 本实验用动物疼痛和炎症模型,对南虎凝胶剂的抗炎镇痛作用及其作用机制进行了实验研究.
1材料和方法。
1.1材料。
健康成年雌性昆明种小鼠30只，体质量17～21 g，健康成年雌性Wistar大鼠24只，体质量150～200 g，由南方医科大学实验动物中心提供. 南虎凝胶剂，由南方医科大学中医风湿科与南方医科大学中药新药实验室研制; 空白凝胶剂，由南方医科大学中医风湿科实验室提供. 法斯通凝胶，为美纳里尼制药工业联合股份有限公司产品; 角叉菜胶、抑肽酶为Sigma公司产品. 大鼠IL1β ELISA试剂盒由博士德公司提供，大鼠TNFα ELISA试剂盒由晶美生物工程有限公司提供.
1.2方法。
1.2.1镇痛实验热板法: 选取体质量17～21 g，基础痛阈5 s，60 s的雌性昆明种小鼠30只，随机分为空白对照组、南虎凝胶剂组、法斯通凝胶剂阳性对照组，每组10只. 各组分别用南虎凝胶剂、法斯通凝胶和空白凝胶0.5 mL涂抹双足. 用热板仪记录反应出现时间，即从置动物到热板上始至出现舔足时止，此段时间为热板痛阈，热板温度控制在55℃～56℃. 各组分别于给药前30 min，给药后30,60和90 min测定反应出现时间，如小鼠在热板上停留60 s后仍无痛反应，按60 s计算.
1.2.2抗炎实验① 二甲苯致小鼠耳肿胀法选取体质量17～21 g的雌性昆明种小鼠30只，随机分为空白对照组、南虎凝胶剂组、法斯通凝胶剂组，每组10只. 在小鼠右耳的前后两面分别涂布二甲苯0.03 mL，左耳不做任何处理. 各组分别于致炎前与致炎后30 min右耳涂布空白凝胶、南虎凝胶剂、法斯通凝胶剂0.1 mL . 致炎后4 h脱颈椎处死动物，剪下双耳用9 mm直径打孔器分别在耳相同部位打下圆耳片，扭力天平称质量. 计算肿胀度，比较治疗组与对照组差异情况.肿胀度（％）=右耳质量—左耳质量〖〗左耳质量×100％。
② 角叉菜胶致炎大鼠足跖法选用体质量为150～200 g雌性Wister大鼠24只，随机等分为3组，空白凝胶对照组、南虎凝胶剂组、法斯通凝胶剂阳性对照组. 试验前3日各组分别给予空白凝胶剂、南虎凝胶剂、法斯通凝胶剂0.5 mL涂抹双侧后肢，2次/d. 试验前晚大鼠禁食过夜. 为保证体内水分的一致性，致炎前灌胃给水5 mL. 30 min后，大鼠双后足底皮下注射10 g/L角叉菜胶0.1 mL. 致炎前30 min和致炎后，各组分别于双后足跖部给于空白凝胶剂、南虎凝胶剂、法斯通凝胶剂0.5 mL. 在致炎前1 h及致炎后1,3,4和6 h采用毛细管放大法测定大鼠足跖体积，计算肿胀度，比较治疗组与各对照组的差别.