肝肾双排法对染铅大鼠驱铅作用的实验观察

作者：刘琳琳 马融 张喜莲 王亚雷 晋文蔓 蒋明辉。

【摘要】 目的 探讨肝肾双排法对染铅大鼠排铅作用。方法 运用醋酸铅灌胃制作铅中毒模型，实验大鼠随机分为8组，利胆补肾颗粒高、中、低剂量组、依地酸钙钠组、依地酸钙钠＋利胆醇组、利胆醇组、模型组、空白对照组。药物治疗5周后，观察治疗前后各组大鼠血、尿、粪中铅的含量变化。结果 在降低血铅含量和增加尿铅排出量中，疗效依次为依地酸钙钠＋利胆醇组、依地酸钙钠组和利胆醇组；在增加粪铅排出量方面，疗效依次为依地酸钙钠＋利胆醇组、利胆醇组、依地酸钙钠组。利胆补肾颗粒高、中剂量组排铅作用优于西药组；其疗效与中药含量呈正相关。结论 肝肾双排法具有促进铅毒由肾－尿道及肝－肠道两条途径排泄，从而降低血铅含量，增加尿、粪铅的排出量。

【关键词】 铅中毒； 血液/分析； 尿分析; 粪便/分析； 动物,实验。

【Abstract】 Objective To explore the effect of GanShenShuangPai (SGLD) in eliminating lead.Methods Lead poisoning model was made by filling the stomach with the acetic lead. All rats were randomly divided into eight groups: LDBS highdose group,LDBS middledose group,LDBS lowdose group,EDTACaNa2 group,EDTACaNa2+Livona group（combination of western medicine group）,Livona group,plumbum dyed model control group and blank control group(normal control group). After all the leadpoisoned rats were treated with medicine for 5 weeks,the change of the concentration of lead in blood, urine and excrement was observed. Results On reducing the concentration of lead in blood and increasing volume ejection of urine lead,the curative effect decreased from the EDTACaNa2+Livona group, to the EDTACaNa2 group and then to the Livona group; on increasing the volume of ejection of excrement lead, the curative effect decreased from the EDTACaNa2+Livona group to the Livona group and to the EDTACaNa2 group.Conclusion GanShenShuangPai can promote lead discharg from kidneyurinary passage and liverintestinal tract. It reduces the concentration of lead in blood and increases ejection volume of urine and excrement lead.

【Key words】 Lead poisoning; Blood/Analysis； Urine analysis； Feces/Analysis； Animals，laboratory。

铅是一种造成人体多系统、多器官损伤的重金属元素，尤其是神经毒性最为明显。由于儿童自身生长发育特点，铅代谢与成人明显不同。在同一环境相同接触水平中，儿童对铅接触途径多，易感性强，吸收率比成人高6倍［1］,排泄率相对较低，而且骨骼中的铅向血液和软组织流动性大，更易造成铅在体内的蓄积，由此可见铅对儿童的危害更为明显［2］。因此,预防和治疗儿童铅中毒，减少铅损害，具有重要的现实意义。笔者以铅的排泄途径为切入点，在由肾脏经尿道排铅的基础上，提出促使肝细胞分泌胆汁，增加肠道排铅的新途径，结合中医基础理论，创立“肝肾双排”新治法，并据此研究出利胆补肾颗粒。本文以动物实验为基础，通过观察“肝肾双排法”对染铅大鼠驱铅效果，初步探讨肝肾双排法的驱铅作用及驱铅途径，为临床广泛应用提供实验依据。

1 材料与方法。

1.1 材料。

1.1.1 实验动物 SPF级健康SD大鼠96只，雌雄各半，体质量（45±5）g，购自解放军军事医学科学院实验动物中心（动物许可证号：SCXK（军）2002001）。分笼饲养，自由饮食，控制室温在25 ℃左右，湿度55％左右。适应性喂养7 d后开始实验。

1.1.2 实验药品 醋酸铅（分析纯，天津市瑞金特化学品有限公司，批号：20070208）：用去离子水配成铅含量为4 g/L的溶液；利胆补肾颗粒(主要成分：茵陈、柴胡、大黄、茯苓、泽泻、郁金、枸杞子、何首乌、甘草，天津中医药大学第一附属医院药剂部)：按照高、中、低给药剂量用去离子水配成，生药含量分别为2.025，1.350，0.675 g/mL的溶液；依地酸钙钠（天津鑫耀氨基酸有限公司，国药准字：H12020890，批号：0511241）；利胆醇［广州星群（药业）股份有限公司，国药准字：H44023173，批号：20060403］。

1.1.3 实验器材及检测设备 聚四氟乙烯消化罐（成都科林分析技术有限公司），MILESTONE ETHOS 1型微波消解器（意大利Milestone公司），IRIS Advantage等离子发射光谱仪（美国热电公司）。

1.1.4 主要试剂 水合氯醛（分析纯，天津福晨化学制剂厂）；浓硝酸（优纯级，天津市化学试剂五厂）；双氧水（分析纯，天津市赢达稀贵化学试剂厂）；1 g/L铅标准溶液（GBW08619）、1 g/L钙标准溶液［GBW(E)080118］、1 g/L锌标准溶液（GBW08620）、1 g/L铁标准溶液（GBW08616）、1 g/L镁标准溶液［GBW(E)080126］、1 g/L铜标准溶液（GBW08165）均购自国家标准物质研究中心。

1.2 实验方法。

1.2.1 模型制作 将96只大鼠按随机数字表法选出12只作为空白对照组，用去离子水按10 mL/kg灌胃，每日1次，持续5周。其余大鼠用醋酸铅溶液按10 mL/kg灌胃染铅，每日1次，持续5周。染铅结束后用毛细玻璃管取大鼠目内眦静脉血。将血放入经过去离子水处理过的盛有肝素钠的炮弹管中，微波消化，测定血铅含量。若血铅含量＞100 μg/L，证明铅中毒造模成功。

1.2.2 动物分组 将84只大鼠按随机数字表法分为7组，利胆补肾颗粒高、中、低剂量组、依地酸钙钠组、利胆醇组、依地酸钙钠+利胆醇组、模型组，每组12只。

1.2.3 给药方法 利胆补肾颗粒高、中、低剂量组：将利胆补肾颗粒水溶液按照20.25，13.50，6.75 g/kg灌胃，每日1次，持续5周。依地酸钙钠组：将依地酸钙钠按照0.05 g/kg腹腔注射，每周连续4 d，停3 d，持续5周。利胆醇组：将利胆醇按照0.02 mL/kg灌胃，每日1次，持续5周。依地酸钙钠+利胆醇组：按照依地酸钙钠组和利胆醇组给药方法分别给药。模型组：去离子水按照10 mL/kg灌胃，每日1次，持续5周。

1.2.4 检测方法 本实验中血、尿、粪样本的前处理采用微波消解法。血、尿、粪样本中的铅含量测定采用等离子原子发射光谱法。观测大鼠血、尿、粪中的铅含量。

1.3 统计学分析 实验数据用±s表示，采用SPSS 13.0进行统计处理。实验数据组间比较均用单因素方差分析(oneway ANOVA)；治疗前后比较均用配对t检验（PairedSample T Test）。