艾迪注射液对裸鼠人胃癌移植瘤的抑瘤作用研究

作者：张金娟，温彩兰，张贵林。

【摘要】 目的： 观察艾迪注射液对裸鼠人胃癌移植瘤的抑瘤作用。方法： 将人胃癌细胞BGC823接种于裸鼠右腋皮下，建立荷瘤裸鼠模型；将荷瘤裸鼠随机分为5组：模型组、环磷酰胺组和艾迪注射液高、中、低剂量组，各组动物按相应药物和剂量给药，连续14 d；末次给药后处死动物，剥取瘤块，称重计算抑瘤率并作组织学观察。结果： 艾迪注射液高剂量组的抑瘤率为61.84%，光镜下可见大片状的坏死区。结论： 艾迪注射液对裸鼠人胃癌细胞BGC823具有抑制作用。

【关键词】 艾迪注射液； 胃癌细胞BGC823； 小鼠，裸。

［Abstract］ Objective: To observe the anticancer effects of Aidi injection (Ad). Methods: Gastric cancer model of nude mice were established by transplanting human gastric cancer cell line (BGC823) into hypoderm at mouse right armpit, and then the cancerbearing mice were divided into 5 groups: model group, cyclophosphamide (CTX) group, and 3 Ad treated groups (highdose, middledose, and lowdose groups). Physiologic saline, CTX, Ad were given to peritoneal cavity of mice of different groups respectively for 14 days. The mice were sacrificed by decapitation, and tumor tissues were weighted and observed with histological technique afterwards. Tumor growth inhibitory rates were calculated. Results: The tumor weighing showed that after administration, tumor growth in highdose Ad group was apparently slower, with an inhibitory rate of 61.84% (P0.05). Histochemistry analysis indicated the transplanted tumor was poorly differentiated gastric cancer, and necrosis could be observed within tumor tissues, especially in CTX and Ad treated groups. Conclusion: Ad has inhibitory effect on transplanted human gastric cancer in nude mice.

［Key words］ Aidi injection; gastric cancer cells (BGC823); mice, nude 　　中医认为斑蝥具有攻毒蚀疽、破血散结的作用。斑蝥中的斑蝥素及其衍生物对多种肿瘤有肯定的治疗效果[1]。艾迪注射液是以斑蝥为君药、配以人参、黄芪及刺五加等多位中药,经现代科学方法提取精制而成的一种广谱抗癌中药复方制剂。目前尚未见用艾迪注射液对人胃癌荷瘤裸鼠模型进行研究的相关报道，2007—2008年以接种人胃癌细胞BGC823的荷瘤裸鼠为模型，研究艾迪注射液的抑瘤作用，为艾迪注射液临床应用提供实验依据。

1 材料与方法。

1.1 材料。

1.1.1 受试药物。

艾迪注射液，贵州益佰制药股份有限公司提供，批号20060807。每支10 ml，每1 ml相当于0.301 5 g生药。

1.1.2 瘤株。

人胃腺癌细胞BGC823（低分化）由中科院上海细胞库提供。

1.1.3 受试动物。

BALB/c(nμ/nμ)裸小鼠，SPF级，7周龄，上海斯莱克实验动物中心提供，合格证号SCXK(沪)2003—0003。裸鼠用带过滤罩的鼠盒饲养于清洁级动物室内的层流柜中，饮水、饲料、垫料均作无菌处理。动物室光照充足，温度26～28 ℃，相对湿度40%～60%。

1.1.4 其它材料。

环磷酰胺：江苏恒瑞医药股份有限公司，批号07083021；改良型RPMI1640培养基：海克隆生物化学制品(北京)有限公司，批号NSE0042；优级胎牛血清（天津市灏洋生物制品科技有限责任公司），DJ系列洁净动物饲养柜（空气层流柜，苏杭实验动物科技发展公司），超净工作台（苏州净化设备有限公司），CO2培养箱（ 2001HY6003型，Thermo Forma公司），倒置显微镜（CK40型，日本Olympus公司）。

1.2 方法。

1.2.1 荷瘤裸鼠模型。

将人胃癌细胞BGC823于体积分数10%灭活胎牛血清的RPMI1640培养液中 (青霉素100 U/ml，链霉素100 mg/L)，在37 ℃、5%CO2、饱和湿度条件下培养。收集对数生长期细胞，用0.4%台盼蓝染色、检测细胞活力高于95%，调整成浓度为1.0×107/ml的细胞悬液。无菌条件下将细胞悬液以0.2 ml/只接种于裸鼠右腋皮下，继续饲养2周，建立荷瘤裸鼠模型。

1.2.2 分组与给药。

将荷瘤裸鼠按瘤块大小随机分为：模型组（等容积生理盐水）、环磷酰胺组（20 mg/kg）、艾迪注射液高剂量（9.45 g/kg）组、艾迪注射液中剂量（4.72 g/kg）组和艾迪注射液低剂量（2.36 g/kg）组，每组6只。环磷酰胺隔日腹腔注射1次，其余各组均按相应药物和剂量每天腹腔注射1次，连续14 d。

1.2.3 测定抑瘤率。

末次给药后次日，脱颈椎处死动物，剖取瘤体组织，电子天平称重瘤块，按公式[2]计算抑瘤率。抑瘤率=（模型组平均瘤重—实验组平均瘤重）/模型组平均瘤重×100%。

1.2.4 形态学观察。

取部分剥离的瘤组织以10%中性福尔马林固定，石蜡包埋、制成4 μm厚的切片、HE染色、光镜下观察瘤组织细胞形态。