不同浓度Van Gieson染色液对细胞染色的研究
【摘要】 目的 不同浓度VG 氏染色液对细胞培养后的染色效果的研究，寻求理想的配置浓度。方法 大鼠肝星状细胞（HSC—T6）培养，细胞爬片，经乙醛刺激细胞活化后，通过HE、VG 氏染色，观察胶原纤维和肌源性成分的染色效果。结果 VG染液：A液（1%酸性品红水溶液）、B液（苦味酸饱和水溶液），临用前分别按A∶B=2∶1、1∶1、1∶2三种配方中肌性纤维和胶原纤维都染成不同程度的品红色。A∶B=1∶9配方中肌性纤维染成黄色，胶原纤维染成红色。A∶B=5∶95、1∶99配方中两者都染成黄色。结论 A∶B=1∶9此种染色两种成分明显，效果最佳,其余比例染色效果呈单一色，无鉴别作用。
VG氏(Van Giesan)染色方法在病理诊断中是最常应用的一种特殊染色，鉴定胶原纤维和肌源性成分起着重要的作用［1］。但是对细胞染色的研究报道很少，本文对不同浓度VG 氏染色液对细胞培养后的染色效果进行探讨，寻求理想的配置浓度。
1 材料与方法。
1.1 材料。
细胞来源于泸州医学院中心实验室的大鼠肝星状细胞（HSC—T6），正常细胞培养再经乙醛刺激24h，95％的酒精固定。VG染液：A液（1%酸性品红水溶液）、B液（苦味酸饱和水溶液）；HE染液均由该实验中心提供。
1.2 方法。
1.2.1 细胞培养 大鼠肝星状细胞（HSC—T6）经10%胎牛血清DMEM培养基正常传代培养稳定后，细胞爬片，长至融合度70%时，0.4%胎牛血清DMEM培养基同步化处理12h，200uM乙醛刺激24h, 95％的酒精固定。
1.2.2 染色。
HE染色5～10min，稀盐酸酒精进行分色，淡氨水使胞核蓝化3～5min，用VG染液染5～10min。弃去染液，直接用95% 酒精快速分化，用滤纸吸干。二甲苯透明，中性树胶封固。VG染液：A液（1%酸性品红水溶液）、B液（苦味酸饱和水溶液），临用前分别按A∶B=2∶1、1∶1、1∶2、1∶9、5∶95、1∶99的比例混合使用。
2 结 果。
通过对国内外染液配制比例配方中选出有代表性的6种进行染色比较，可以看出A∶B=2∶1、1∶1、1∶2三种配方中肌性纤维和胶原纤维都染成不同程度的品红色（见图1、2），无差异性，起不到鉴别的作用。A∶B=1∶9配方中肌性纤维染成黄色，胶原纤维染成红色（见图3），此染色效果最佳。A∶B=5∶95配方中肌性纤维和胶原纤维都染成不同程度的黄色（见图4）。A∶B=1∶99配方中两者都染成黄色。故由此认为A∶B=1∶9配方染色效果最佳。