降脂酮对CCl4所致急慢性肝损伤大鼠肝组织、血清中NO、NOS水平的
作者：白贞子 牛俊奇 姜艳芳 李玉香。
【摘要】 目的 通过观察降脂酮对CCl4所致急性和慢性肝损伤大鼠肝组织、血清一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）水平的影响，探讨降脂酮对大鼠急、慢性化学性肝损伤保护作用的机制。方法 大鼠分别腹腔注射50%CCl4花生油溶液1次（v/v）、皮下注射40%CCl4的花生油溶液5 w，制作急、慢性化学性肝损伤模型；降脂酮灌胃后,测定大鼠肝组织、血清NO和NOS水平的变化。结果 降脂酮可使CCl4所致急性肝损伤大鼠肝组织中NO和NOS水平明显降低，慢性肝损伤大鼠的血清和肝组织中NO和NOS水平无明显差异。结论 降脂酮对急性肝损伤大鼠的保护作用可能与NO，NOS水平有关，对慢性肝损伤的保护作用可能与NO，NOS水平无关。
【Abstract】 Objective To evaluate the effect of Jiangzhi ketone on the expressions of NO, NOS of acute and chronical hepatic injury induced by CCl4 in rats. Methods The hepatic injury models were established by intraperitoneal injection 50% CCl4 for a single time or by subcutaneous injection 40% CCl4 in rats for 5 w. The rats were treated with Jiangzhi ketone at doses of 50, 100 and 200 mg/kg body weight. The content of NO, the activity of NOS in liver tissue were also observed. Results The levels of NO, NOS of acute hepatic injury rats treated with Jiangzhi ketone were significantly decreased, but there was no obvious change in NO and NOS levels in the rats with chronic hepatic injury. Conclusions Jiangzhi ketone plays protective role in acute hepatic injury rats by decreasing the expressions of NO and NOS but is not so in chronic hepatic injury rats.
【Key words】 CCl4; Hepatic injury。
有关中药复方制剂的肝脏保护作用的研究主要集中于煎剂的疗效，其有效成分的研究较少〔1，2〕。黄酮具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、化学抑制剂和细胞色素P450抑制作用〔3，4〕。为了解中药复方制剂的作用机制，从具有保肝作用的6种中草药(黄芩、枸杞子、山楂等)中通过醇提取法提取有效成分，观察对CCl4诱导的急、慢性肝损伤大鼠肝组织、血清一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)的影响。
1 资料与方法。
1.1 药物与试剂 降脂酮（JZT）（中国科学院化学所自由基室）；水飞蓟素；CCl4。NOS、NO试剂盒（南京建成生物工程研究所）。
1.2 动物 健康Wistar大鼠，雌雄各半，4～5月龄，体重220～250 g之间（长春高新医学动物实验研究中心提供）。正常饲养1 w后，按体重随机分组。
1.3 方法。
1.3.1 降脂酮的制备 黄芩、枸杞子、山楂等复方中药制剂在70%乙醇中回流煮3次，旋转蒸发浓缩，浓缩液用蒸馏水溶解，用乙醇冲洗，旋转蒸发，抽真空后，得到降脂酮。
1.3.2 动物分组及急性肝损伤大鼠给药方法 将72只大鼠分为正常对照组、CCl4模型组、降脂酮高（4%总黄酮200 mg·kg—1·d—1）、中（2%总黄酮100 mg·kg—1·d—1）、低剂量组（1%总黄酮50 mg·kg—1·d—1）和阳性对照组(n=12)。降脂酮低、中、高剂量组及阳性药组均于成模前1 w预防性灌胃，以保证成模时体内能够达到有效药物浓度。末次给药后6 h，除正常对照组予生理盐水2 ml/kg腹腔内注射外，其余各组予等剂量50%CCl4花生油（v/v），建立急性肝损伤模型。禁食不禁水12 h，腹腔注射30 mg/kg戊巴比妥钠麻醉大鼠。取肝脏左叶组织制备匀浆，测定肝组织匀浆中NO含量，NOS活性。
1.3.3 慢性肝损伤大鼠给药方法 将78只大鼠，选择12只为正常对照组，余66只复制慢性肝损伤模型。正常对照组给予皮下注射生理盐水3 ml/kg，每隔3 d注射1次；模型组予40%CCl4方法同前正常对照组。第5周观察是否形成慢性肝损伤。造模第5周末大鼠死亡11只。取3只模型鼠确定是否造膜成功，余下52只大鼠尾静脉采血，检测丙氨酸氨基转移酶（ALT），天冬氨酸转氨酶（AST）活性，采血过程中死亡2只。根据大鼠体重、ALT活性双因素分5组，慢性肝损伤模型组、降脂酮低、中、高剂量组以及东保肝泰阳性药物对照组，各10只。正常对照组：造模第6周给予生理盐水10 ml·d—1·kg—1灌胃，模型组：同上。低、中、高剂量组予降脂酮（剂量同急性肝损伤），阳性对照组予2%东宝肝泰，连续5 w。实验第10周末，禁食不禁水12 h，称体重，30 mg/kg戊巴比妥钠腹腔麻醉大鼠，按上述方法制备肝匀浆。测定肝组织匀浆NOS活性，血清中NO含量。
1.4 统计学处理 数据以x±s表示，组间比较Studentt检验，使用Excell软件进行分析。