苦参素对实验性肝癌增生细胞核抗原和白细胞的影响
【摘要】 目的探讨苦参素对实验动物性肝癌增生细胞核抗原(PCNA)和白细胞的影响，为肝癌化疗中白细胞降低寻找有效的防治方法。方法将48只肝癌大鼠模型随机分成两组，实验组给以苦参素灌胃。对实验组和对照组进行白细胞、PCNA检测。结果实验组白细胞计数高于对照组；PCNA在对照组中阳性表达20例，在实验组中阳性表达7例。结论苦参素能抑制肝癌细胞的增殖，能有效预防白细胞的降低。
【Abstract】ObjectiveTo explore the effect of Kurarinone on PCNA and WBC in liver cancer animal model.To search effective treatment for leukopenia attributable to chemotherapy in liver cancer. Methods48 liver cancer animals were divided into two groups and treatment group was treated with Kurarinone. PCNA and WBC were examined in two groups. ResultsThe numbers of WBC in treatment group were more than control group.There are 7 cases expressing PCNA in treatment group,but 20 cases in control group. ConclusionKurarinone can repress growth of liver cancer cell and reduce leukopenia attributable to chemotherapy in liver cancer.
【Key words】 Kurarinone； Liver cancer； PCNA； WBC。
苦参素(kurarinone)是氧化苦参碱和极少量氧化槐果碱的混合物，是从豆科植物苦豆草(Sophoro alopeeuroides L)的种子苦豆子或豆科植物苦参(Sophoro flavescens Ait T)的根中提取的生物碱。现代药理研究表明，苦参素具有抗肿瘤、抗病毒、抗炎、调节免疫等作用，对中枢神经系统、心血管系统等方面亦有明显的药理作用［1］。为探讨苦参素的抗肿瘤作用，本研究通过对肝癌小鼠进行苦参素灌胃，并对治疗后肝组织增生细胞核抗原(PCNA)以及血液白细胞进行检测。
1材料。
实验用48只SD大鼠，6周龄180～200 g(广东医学院动物实验中心)；苦参素注射液(江苏正大天晴药业股份有限公司，批号：20021004)；AAF(Sigma公司，批号A7015)；小鼠抗大鼠PCNA单克隆抗体(福州迈新技术公司)。
2方法。
2.1动物造模将48只雄性SD大鼠给以二乙基亚硝胺(DEN) 35 mg/kg灌胃，2次/周，共16周，16周后所有大鼠停用DEN。
2.2实验方法将两组肝癌动物模型随机分成实验组和对照组各24只，实验组给以苦参素100 mg/kg灌胃，1次/d，共1周。两组大鼠在20周时处死，对血液中白细胞进行检测，WBC计数按照《全国临床检验操作规程(1990版)》推荐方法进行。对肝脏组织进行PCNA检测，具体方法如下：肝组织的石蜡切片经脱蜡、脱水、消除内源性过氧化物酶的活性后，0.01%枸橼酸盐缓冲液中进行抗原热修复；依次滴加10％正常羊血清封闭，一抗(1∶50) 4℃过夜，二抗 (1∶200)室温1 h，ABC液室温1 h，DAB显色，苏术素复染，脱水透明封片，显微镜下观察，拍照，胞核染为棕黄色为阳性，每张切片随机选取5个高倍视野测定阳性细胞数，平均阳性细胞＞10个即为PCNA表达阳性。对两组所测的白细胞进行统计学检验，对PCNA阳性表达的大鼠例数进行统计学检验。