生地黄多糖的微波提取及含量测定

【摘要】; 目的; 从生地黄提取多糖,并测定其含量。; 运用微波技术用水提醇沉法提取生地黄多糖,用酚—硫酸比色法测定多糖含量。结果; 测得生地黄多糖含量13.4186%,平均回收率为98.94%,RSD=1.34%(n=5)。结论; 运用微波技术从生地黄提取多糖,反应速度加快,实验结果令人满意。

; 【关键词】; 微波技术;; 生地黄;; 多糖;; 提取;; 含量测定

Microwave technique extraction and content determination of polysaccharide of rehmannia glutinosa libosch root。

; 【Abstract】; Objective ; extraction and content determinations polysaccharides of Rehmannia glutinosa Libosch root.; Methods; Microwave technique applied in polysaccharides of Rehmannia glutinosa Libosch root were obtained by hotwater extraction and ethanol precipitation,content determination with phenol—vitriolic colorimetry.; Results; The polysaccharides content of Rehmannia glutinosa Libosch root is 13.418%,recovery rate is 98.94%.; Conclusion; Microwave technique applied in the polysaccharides of Rehmannia glutinosa Libosch root has been obtained for the first time.

; 【Key words】; microwave technique;rehmannia glutinosa libosch root;polysaccharide;extraction;content determination;。

; 生地黄为玄参科植物地黄Rehmannia glutinosa Libosch.的干燥块根,别名地髓、生地、干地黄等,地黄根茎主要含梓醇、地黄素、糖类、氨基酸、维生素A等成分。生地黄有败毒抗癌、清热凉血、养阴生津、医疮消肿、促进免疫、降压、抑制皮肤癣菌等作用,可用于传染性肝炎、功能性子宫出血等。

; 微波技术的,近年来得到很大。微波具有穿透力强、选择性高、加热效率高等特点。微波辐射(MWI)可以大大加快反应速度(最高达1240倍),反应时间以分、秒计[3]。微波技术应用于植物细胞破壁,有效地提高了收率[4],亦取得了令人可喜的进展。

; 本实验运用微波技术对生地黄用石油醚、乙醚除去脂溶性杂质,用80%乙醇提取除去所含单糖、低聚糖及甙类等干扰性成分后,再运用微波技术用水提纯沉淀法制得生地黄多糖,并采用酚—硫酸比色法对其多糖含量进行测定[5],取得了令人满意的结果。

1; 仪器、试剂及样品。

; UV—2401 PC 紫外分光光度计(日本岛津),MCL—3型连续微波反应器(四川大学无线电系)。葡萄糖(AR)105℃干燥恒重苯酚(AR),硫酸(AR)。; 生地黄:购买于石河子市药店,干燥品,粉碎待用。;。

;2; 标准曲线的绘制。

; 2.1; 标准葡萄糖溶液的配制 ; 精确称取干燥恒重葡萄糖25.2mg,加适量水溶解,转移至250ml 容量瓶中,加水至刻度,摇匀,配成浓度为100.8μg/ml标准葡萄糖溶液备用。

; 2.2; 5%苯酚试剂的配制 ; 取苯酚100g,加铝片0.1g和NaHCO3 0.05g,蒸馏,收集182℃馏份,称取7.5g,加水150ml溶解,置棕色瓶内放冰箱备用。

; 2.3; 标准曲线绘制 ; 精确量取葡萄糖标准溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7ml置干燥试管中,分别加水使成1.0ml,再分别加入5%苯酚溶液1.6ml,摇匀,然后加浓H2SO4 7.0ml,充分摇匀,室温放置25min,在400~600nm处测定其最大吸光度,同时做一空白。

; 将上述实验数据做回归处理得回归方程:A = 0.0691C + 3×10—3; R2 = 0.9981 r=0.99905。

; 3; 生地黄多糖提取及精制。

; 生地黄破碎后,称取30g,置500ml烧瓶中,将此烧瓶放入MCL—3型连续微波反应器中,依次用300ml石油醚(60~90℃)、乙醚和80%乙醇回流提取,调整功率560W、500W、400W、350W,反应时间20min。残渣挥干溶剂后,再放入MCL—3型连续微波反应器中,继续以水回流提取20min,调整功率630W、600W、560W、450W。减压浓缩至一半体积,加入0.1%活性炭,脱色,过滤,滤液加入95%乙醇使溶液含醇80%,静置过夜,过滤,残渣用乙醚、无水乙醇反复洗涤,得生地黄多糖。60℃ 烘干备用。

; 4; 换算因素测定

; 精确称取60℃干燥恒重生地黄多糖20mg,水溶解后定容到100ml容量瓶中,摇匀,作为多糖储备液。

; 精确量取多糖储备液0.20ml,加水至1.0ml,按测定标准曲线同样的方法测其吸光度值。按下式换算因素:

; f = W/CD。

; 式中:W为多糖重量(μg),C为多糖液中葡萄糖的重量(μg),D为多糖的稀释倍数。测得f=2.9115。

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