注射用盐酸槐定碱对血管刺激性、溶血、过敏性试验研究
作者：梁新丽 廖正根 高秀蛟 张萍 论文网。
【摘要】 目的观察注射用盐酸槐定碱是否具有血管刺激性、溶血和过敏性反应。 方法 家兔耳缘静脉注射注射用盐酸槐定碱8.3 ml/kg，qd×5 d，停药96 h后对注射部位做病理组织学检查；体外不同浓度的注射用盐酸槐定碱0.1～0.5 ml在5 ml兔红细胞混悬液中放置0.25～24 h，观察对兔红细胞悬液的溶血作用及有无红细胞凝聚作用；给豚鼠隔日腹腔注射不同浓度注射用盐酸槐定碱0.5 ml，连续注射3次，分别在第1次注射后第14天及21天从静脉给予注射用盐酸槐定碱1 ml，观察30 min内是否出现过敏反应；取大鼠，背部皮内注射含IgE的抗血清，24 h后静脉注射含注射用盐酸槐定碱的0.8%伊文思兰溶液1 ml攻击，30 min后处死动物，观察注射点皮肤蓝色反应斑点直径。结果注射用盐酸槐定碱对家兔血管内皮没有损伤和刺激作用；对兔红细胞没有致溶血作用和凝聚作用；豚鼠未出现过敏反应。结论注射用盐酸槐定碱用药血管没有刺激性反应，无溶血及红细胞凝聚现象，对豚鼠无致敏作用且大鼠无同种被动皮肤过敏作用。制剂有关安全性检测结果符合新药申报要求。
【关键词】 注射用盐酸槐定碱； 血管刺激； 溶血； 全身主动过敏反应； 被动皮肤过敏； 代写论文。
Experimental Studies of Sophoridine Hydrochloride for Injection on Vascular Stimulation, Hemolysis, and Sensitization 论文代写。
Abstract：Objective To observe whether Sophoridine Hydrochloride for Injection has vascular stimulation,hemolyzation,agglutination and sensitization. Methods The vascular stimulative assay of Sophoridine Hydrochloride for Injection was injected to rabbit at the dose of 8.3 mg·kg — 1 , qd for 5 d. Pathology histology examine of injection place after stoping remedy 96 hours was made.Hemolyzation or agglutination of it in vitro was set at the concent ration of 0. 1～0. 5 ml for 0. 5～24 h. The allergic reaction on guinea pig in vivo and rat in skin were performed.ResultsIt showed that the Sophoridine Hydrochloride for Injection had no vascular irritation and injury effect on rabbit vascular endothelial cell. No evidences of hemolyzation and aggregation on rabbit erythrocyte in vitro,and no allergic reaction on guinea pig in vivo and rat skin were observed. ConclusionThere is no vascular stimulation on rabbit vascular endothelial cell and sensitization on guinea pig in vivo, sensitization on rat in skin, and no hemolyzation oragglutination on rabbit red blood cells in vitro. These results of preparation safety will fit the new drugs application requirements. 论文网。
Key words：Sophoridine Hydrochloride for Injection; Stimulation of vas cular; Hemolysis; ASA; PCA 妇科恶性肿瘤是最常见的肿瘤之一,它严重 影响 了妇女的生活质量和生命时间。槐定碱是从苦豆子中提取的单体生物碱，纯度高达99．5％ 以上，槐定碱(Sophoridine)及其制剂盐酸槐定碱注射液(Sophoridine Hydrochloride Injection) 是由江西中医学院研制、拥有自主知识产权国家一类抗癌新药，已于20050822获国家食品药品监督管理局(SFDA)颁发的新药证书及药品批准文号。盐酸槐定碱注射液临床上用于恶性滋养细胞瘤、恶性淋巴瘤、消化道癌、肺癌、鼻咽癌、鼻腔鳞癌、乳腺癌等恶性肿瘤。疗效确切，毒副作用极低，不降低红细胞，不抑制骨髓。与同类产品比较，可明显降低患者 治疗 痛苦和辅助治疗的 经济 负担。注射用盐酸槐定碱是以人工槐定碱为原料制成的冻干粉针剂，本 研究 按照国家药品监督管理局注射剂研制指导原则有关安全性试验项目要求进行了血管刺激、溶血、过敏实验,为临床 应用 提供依据［1］。 论文代写。
1 材料。
1.1 药物注射用盐酸槐定碱：江西中医学院中药 现代 制剂 教育 部重点实验室提供。 5%葡萄糖注射液，四川科伦，批号：060219E；甲醛，上海实意化学试剂有限公司，批号：20050328；白蛋白，上海伯奥生物 科技 有限公司，批号：050114；牛血清白蛋白，上海伯奥生物科技有限公司，批号：050119；白百破三联疫苗，武汉生物制品研究所，批号：20060202—4；伊文思兰， 中国 医药(集团)上海化学试剂公司，批号：F20030114。
毕业论文。
1.2 受试动物 日本大耳白家兔，体重2～3 kg，雌雄兼用，由南京市江宁区青龙山动物繁殖场供给；荷兰豚鼠，体重200～250 g，雄性，由南京市江宁区青龙山动物繁殖场提供，许可证号：SCXK（苏）2002～0027。 SD大鼠，体重180～220 g，雄性，购于上海斯莱克实验动物责任有限公司，动物合格证号：SCXKC（沪2003－0003）。 代写论文。
2 方法［2～6］。
2.1 血管刺激性实验实验开始前，动物预先饲养1周以观察其活动表现，动物室温度22～24℃，湿度40%～60%，取家兔3只，右侧耳缘静脉以无菌操作方法注射浓度为10 mg/ml的注射用盐酸槐定碱8.3 ml/kg，左侧耳缘静脉注射等体积5%葡萄糖注射液，1次/d，连续给药5 d。上述两组均分别于末次给药后96 h，肉眼观察注射部位有无红肿、充血等刺激现象，处死动物，以耳缘静脉注射点至向心方向，连续取3段血管连同周围组织，每段1 cm，用10％甲醛溶液固定，常规脱水，石蜡包埋，切5 μm薄片，HE染色，光镜下做组织学检查，另一侧对照血管也同法处理。 毕业论文。
2.2.1 2％兔红细胞混悬液制备取健康家兔1只，自心脏取血约20 ml，置于三角瓶中，用玻璃棒搅拌，除去纤维蛋白，然后将血移入刻度离心管内，加入生理盐水10 ml，混匀后离心5 min（2 000～2 500 r/min），去除上清液，再加生理盐水混匀离心，反复洗涤3～4次，至上清液无色透明，将所得红细胞按其容积用生理盐水稀释成2%的混悬液。
2.2.2 方法取干净试管7支，编号排列于试管架上，按表1配比量依次加入2%兔红细胞混悬液和生理盐水，混匀后，置于37℃恒温箱中30 min，然后分别加入不同量的药液（第6管为阴性对照管，第7管为阳性对照管），摇匀，置37℃恒温箱中进行温育，观察15，30，45 min，1，2，3，24 h有无溶血及凝集情况。 论文网。
结果判定： 全溶血：溶液澄明红色，管底无细胞残留。 部分溶血：溶液澄明红色或棕色，管底有少量红细胞残留。 无溶血：红细胞全部下沉，上层液体无色澄明。 凝集：虽不溶血，但出现红细胞凝集，振摇后不能分散。 代写论文。
2.3 全身主动过敏实验实验开始前，动物预先饲养1周以观察其活动表现，动物室温度22～24℃，湿度40%～60%，取48只健康雄性豚鼠，随机分成 5％葡萄糖注射液组、阳性药物组（白蛋白组）、注射用盐酸槐定碱大剂量组、小剂量组，每组12只。分别给各组豚鼠隔日腹腔注射5％葡萄糖注射液、白蛋白25 mg/kg，注射用盐酸槐定碱4，16 mg/kg，体积为0.5 ml，共注射3次，然后每组内分成两批，于第1次给药后14 d及21 d分别静脉注射5％葡萄糖注射液、白蛋白50 mg/kg，注射用盐酸槐定碱16 ，64 mg/kg，体积为1 ml，观察豚鼠在静脉注射后30 min内有无表2中的兴奋不安、抓鼻、竖毛、呼吸困难、痉挛、休克甚至死亡等过敏反应症状。 代写论文。