RP—HPLC法测定补血口服液中异嗪皮啶的含量
【关键词】 补血口服液;刺五加;异嗪皮啶;RP—HPLC法。
补血口服液是由黄芪、刺五加等多种中药组成的复方制剂，具有益气补血、扶正固本之功效。临床用于癌症化疗、放疗，苯、放射线等原因引起的白细胞减少症以及贫血症等。刺五加为方中之臣药，笔者采用反向高效液相色谱法（RP—HPLC）测定其中异嗪皮啶的含量，方法准确，重现性好。
1 仪器与试药 论文代写。
日立—635型高效液相色谱仪，SAGE色谱工作站;乙腈为色谱纯，磷酸为优级纯，其它试剂均为分析纯;异嗪皮啶对照品（供鉴别用）购于 中国 药品生物制品检定所，批号:0837—9701，高效液相色谱归一化法测定其含量为98.37%;益气补血口服液测定样品由吉林省靖宇凯维有限公司提供。
毕业论文。
2 色谱条件 色谱柱:HpersilODS（250×4.6）mm，5μm（USA）;流动相:乙腈—0.1%磷酸溶液（10:90）;流速:1.0ml.min;检测波长:344nm;柱温:室温;理论塔板数以异嗪皮啶峰 计算 ，应不低于7000。
代写论文。
3 供试溶液制备 对照品溶液:精密称取异嗪皮啶对照品适量，加甲醇制成每毫升含80μg的溶液作为对照品溶液。供试品溶液:精密吸取本品25ml，缓缓加入无水乙醇70ml，边加边振摇，静置，分取上清液，残渣加水10ml，充分振摇，使残渣溶散，缓缓加入无水乙醇30ml，边加边振摇，静置，分取上清夜，残渣加水5ml，充分振摇，使残渣溶散，缓缓加入无水乙醇15ml，边加边振摇，静置，分取上清夜，合并上清夜，蒸干，残渣加水30ml使溶解并转移至分液漏斗中，加醋酸乙酯萃取5次，每次25ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇使溶解并定容至5ml量瓶中，作为供试品溶液。阴性对照液:按处方比例配制缺刺五加的阴性对照品，吸取25ml，同样品溶液的制备方法制得阴性对照液。
经UV—2201分光光度计扫描，异嗪皮啶在342.0nm波长处有最大吸收。中国药典2000年版中异嗪皮啶的液相测定波长（肿节风项下）［1］为344nm，故选择测定波长为344nm。 4.2 系统适用性试验 论文代写。
依据上述条件，分别精密吸取上述3种溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，测得异嗪皮啶对照品及样品、阴性对照品的色谱图（图略），理论塔板数以异嗪皮啶峰计算，n=7441，阴性对照无干扰。
毕业论文。
4.3 流动相的选择 代写论文。
试验比较了乙腈—0.1%磷酸溶液（20:80）［1］ 、（18:82）、（15:85）、（10:90）4种比例的流动相，结果以后者分离效果为好，故选后者。 代写论文。
4.4 线性关系考察 精密吸取对照品溶液（84.32μg.ml）2、4、6、8、10μl，按上述色谱条件测定，以峰面积积分值为总坐标，进样量为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程为:y=187226.64x+2685.70，r=0.9993。结果表明异嗪皮啶在（0.169～0.843）μg范围内呈良好的线性关系。