佛手粗多糖的提取及总糖的含量测定|总糖和粗多糖关系
【摘要】 本文采用水提醇沉法从佛手中提取粗多糖,硫酸—苯酚法测定佛手粗多糖中总糖的含量,结果表明佛手中粗多糖回收率为28.33%,总糖的含量为95.21%,平均回收率为100%,RSD=1.30。
� 【关键词】佛手;多糖;比色法;含量测定 �� Extraction and determination of coarse polysaccharide from foshou ZHANG Yan—tong,JI Yao—hua,XING Wen—shan.Changchun Medical College for Professional Training Changchun 130031, China � 【Abstract】 The content of total polysaccharide in the coarse polysaccharide extraction from foshou was determined with phenol—sulfuric acid method.The results showed that the coarse polysaccharide extraction was 28.33%and the content of total polysaccharide was 95.21%.The average recovery was 100.11%.RSD=1.30.� 【Key words】Foshou;Polysaccharide;Phenol—sulfuric acid method;Content determination 佛手为芸香科植物佛手的干燥果实,具有舒肝理气、和胃止痛的功效[1]。
其中含有多种化学成分,近年来的药理实验研究表明,佛手糖能提高机体免疫力[2],但佛手粗多糖中总多糖的含量尚未见报道,本文仅对水提醇沉法所得佛手粗多糖中总糖进行含量测定。
� 1 仪器与药品� 1.1 仪器 TU1901双光束紫外—可见分光光度计(北京普析通用仪器责任有限公司)。
� 1.2 材料 佛手购自长春市药材公司。
� 1.3 试剂 葡萄糖标准品(上海试剂三厂),其他试剂均为分析纯。
� 2 方法与结果� 2.1 佛手粗多糖的提取 取佛手药材用90%乙醇浸泡后渗漉,然后将剩余药渣用水煎煮3次,过滤,合并3次滤液,浓缩至浸膏状,加乙醇放置过夜,抽滤,将沉淀分别用95%乙醇、丙酮和乙醚洗涤,即得佛手粗多糖,产出率约为28.33%。
� 2.2 标准曲线的制备 以干燥至恒重的葡萄糖为标准品,精密称定,用蒸馏水溶解定容,使其浓度为113.8 μg /ml。
� 精密吸取标准溶液10、20、40、60、80、100 μl,分别置于具塞试管中,各加蒸馏水使体积为1 ml,再加苯酚试液1.0 ml,摇匀,迅速滴加浓硫酸5.0 ml,摇匀后置于沸水浴中加热15 min,取出冷却至室温;另取蒸馏水1 ml,加苯酚和硫酸,同上操作为空白对照。
用TU1901双光束紫外—可见分光光度计于490 nm处测定吸收度,建立回归方程:A=0.077 14+0.011 4w r=0.9987。
� 2.3 总多糖样品液的制备 取干燥至恒重的佛手粗多糖约25 mg(5份),精密称定,溶解后转入500 ml容量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度,摇匀,使其浓度相当于50 μg/ml 的样品液供分析用。
� 2.4 佛手总多糖的含量测定 精密吸取样品液1 ml,按标准曲线项下方法测定吸收度,根据回归方程,求得佛手粗多糖中总糖平均含量为95.21%,cv=3.33。
� 2.5 回收率试验 精密吸取样品液0.5 ml(5份),再分别精密加入浓度不同的标准葡萄糖溶液0.5 ml,依样品测定方法测定吸收度,计算回收率平均值为:100.11%,RSD=1.30,n=5。
2.6 精密度试验 精密称取同一样品液,按标准曲线项下的操作方法连续重复测定5次,RSD=1.02,n=5。
� 参考文献 [1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典.人民卫生出版社,2005:124.� [2] 黄玲,张敏.佛手多糖对小鼠功能的影响.河北中西医结合杂志,1999,8(6):872—873.�。