芪倍合剂对溃疡性结肠炎大鼠白细胞介素8、肿瘤坏死因子α的

【摘要】 ［目的］　建立溃疡性结肠炎（UC）大鼠模型, 研究芪倍合剂对大鼠溃疡性结肠炎（UC）的治疗作用及对肿瘤坏死因子α(TN Fα)、白细胞介素8（IL8) 产生和表达的影响。［方法］用三硝基苯磺酸(TNBS) 法制备大鼠UC模型,采用酶联免疫吸附(EL ISA) 方法测定大鼠血清中 TNFα、IL8水平。［结果］芪倍合剂组和柳氮磺胺吡啶组TNF α、IL 8明显低于模型组,有统计学意义（P0.01 ）。［结论］　芪倍合剂可显著降低UC大鼠血清TNF α、IL 8 的水平,有治疗UC 的前景。

【关键词】 溃疡性结肠炎 芪倍合剂 肿瘤坏死因子 α 白细胞介素 8。

溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种反复发作的的肠道慢性非特异性炎症和溃疡性病变。其病因和发病机制至今尚未明确, 国内外研究多集中于感染、免疫、遗传等因素, 其发病与免疫功能紊乱有关已得到普遍认可,而具有免疫调节作用的细胞因子(cytokines,CK) 在UC 的发病过程中起重要作用,白细胞介素8（IL8)和肿瘤坏死因子α（TNFα）等促炎症细胞因子已是公认的能介导UC 发病的细胞因子,通过不同途径参与肠黏膜炎症形成的起始阶段和发展过程,是介导UC 发病的关键因素之一［1］。笔者在临床上应用芪倍合剂治疗UC 取得了良好的效果。而以芪倍合剂治疗UC 的实验性研究尚未见报道,因此,笔者通过观察芪倍合剂对溃疡性结肠炎大鼠模型血清IL8、TNFα的影响,以探讨该方治疗UC 的作用机制。

1 材料与方法。

1.1 材料 实验动物：健康SD大鼠40只, 体重200～220 g 雌雄各半，由新乡医学院动物中心提供。药物：芪倍合剂为我院根据张仲景之大黄附子汤加味研制的一种灌肠剂,由黄芪、大黄、五倍子、白及等 8味中药组成（批号070824）。柳氮磺胺吡啶（SASP),上海信谊嘉华药业有限公司,（批号061204)。试剂与仪器：2、4、6 三硝基苯磺酸(TNBS, sigma 公司); 无水乙醇(分析纯,北京化工厂)。TNFα试剂盒（北京科美东雅生物技术有限公司), IL8试剂盒（北京科美东雅生物技术有限公司）。LD4 2A 高速离心机，2550 型酶联免疫检测仪，724 微机型可见分光光度计,840 型高效液相色谱仪。

1.2 方法。

1.2.1 大鼠TNBS 性结肠炎模型的制备 适应性喂养1 周,按完全随机设计法将 40只大鼠分为 4 组,每组 10 只,分别为正常组、模型对照组、SASP 组和芪倍合剂组。除正常组外，参照文献［2］法造模: 将大鼠禁食24 h 后, 以10% 水合氯醛腹腔注射麻醉（300 mg/kg), 一次性将TNBS（100 mg/kg) 和0.25 ml 的50% 乙醇溶液用橡胶输液管(外径2 mm） 缓慢注入距大鼠肛门约8 cm 处的结肠肠腔内。

1.2.2 给药 造模后第3 d, 各组开始给药,连续4周。芪倍合剂组按2 ml/(100g·d)—1灌肠。SASP组按0.04 g/(100 g·d)—1 灌肠,正常组和模型组以等体积0.85氯化钠灌肠。

1.2.3 观察指标与测定方法 4周后,各组大鼠经 10 %水合氯醛(400 mg/ kg) 麻醉,颈动脉取血,待测血清分别供 IL8 和TN Fα测定。检测程序严格按试剂盒使用说明进行, 采用双抗体夹心法检测大鼠结肠组织IL8 和TN Fα值。

1.3 统计学处理用SPSS 10.0 软件进行, 数据均采用t检验、方差分析q检验。

2 结果。

2.1 各组病理改变 正常组大鼠结肠黏膜上皮完整、连续,腺体排列规则、结构清楚,无溃疡、无糜烂点及淋巴细胞浸润。模型组大鼠结肠黏膜可见多个溃疡出现,糜烂点散在多个分布,黏膜淋巴细胞浸润严重,杯状细胞减少明显。SASP治疗组与芪倍合剂组在溃疡数、糜烂点个数均较模型组明显减少,同时炎症细胞浸润和杯状细胞减少程度也减轻。

2.2 各组大鼠血清 TNFα、IL – 8水平比较结果见表1。

表1 各组大鼠血清 TNFα、IL 8 水平比较（略）。

与正常组比较, 1）P0.01与模型组比较,2）P0.01。