腰痛宁胶囊的毒理学研究
关键字： 腰痛宁胶囊 急性毒性 马钱子 士的宁 大鼠 长期毒性 摘要: 目的: 观察大鼠口服腰痛宁胶囊的急性毒性和长期毒性作用。
方法: 以SD大鼠为受试对象，采Bliss法测定口服腰痛宁胶囊的LD50 ;采用4个剂量（300，150，75，35.5mg/kg）iq SD大鼠，连续180d，观察给药90，180d时大鼠的生长发育、血液学、血液生化学、组织病理变化及停药30d时上述指标的变化。
结果: 雄性和雌性SD大鼠口服腰痛宁胶囊的LD50 为6158.95mg/kg和803.85mg/kg。
大鼠连续给药90d时，300mg/kg剂量组碱性磷酸酶、肌酐比空白对照组升高（P0.01）:白蛋白降低（P0.01）;5只大鼠肝细胞脂肪变性;2只大鼠肾脏近曲小管上皮细胞高度水肿，轻度脂肪变性，管腔变大，肾小管内可见红细胞管型，肾间质少量炎细胞浸润。
150mg/kg剂量组碱性磷酸酶升高（P0.05），总蛋白和白蛋白降低（P0.01），3只大鼠肝细胞脂肪变性。
给药180d时，对大鼠体重、摄食量、活动、外周血象、主要脏器的重量系数检查未见明显影响。
300mg/kg剂量组白蛋白降低（P0.01），总蛋白、肌酐升高（P0.0l和P0.001）;150mg/kg剂量组白蛋白降低（P0.001），总蛋白、肌酐升高（P0.05和0.001）;75mg/kg剂量组白蛋白降低，（P0.001），肌酐升高（P0.001），2只大鼠肝细胞轻度脂肪变性;37.5mg/kg剂量组白蛋白降低（P0.001），总蛋白和肌酐升高（P0.0l和0.001）。
停药30d后，大鼠体重、摄食量、活动、外周血象、重要器官脏器系数均正常。
生化指标检查，各给药组同空白对照组比较肌酐升高（P0.001）。
病理学检查各组各脏器均未发现明显改变。
结论: 不同性别的SD大鼠对腰痛宁胶囊的急性毒性反应有非常著性差异，雄性大鼠LD50 比雌性高7.66倍。
长期毒性研究表明，长期大剂量服用腰痛宁胶囊，对肾功能有一定影响并且恢复较慢，建议肾功能不好的患者慎用。
通过对腰痛宁胶囊180d用药过程中各项指标反应的观察，未见性别差异。
关键词: 腰痛宁胶囊; 急性毒性; 马钱子; 士的宁; 大鼠; 长期毒性 Abstract: Objective:To observe the acute toxicity and the long—period toxicity of Yaotongning Capsule（YTNC）in rats.Methods:LD50 were tested of YTNC in rats by Bliss methods.Four groups of rats（300.0，150.0，75.0，37.5mg/kg of YTNC）were administered with repeated gastric infusion of YTNC for180days.Body weight，hematological and hematobiochemical parameters，coefficient and histomorphological figure of organs（the heart，1iver，Spleen，1ungs，kidneys，adrenals，testes，prostate，uterus and ovary，brain，thymus）were exmined in90days，180days and30days after the cessation of YTNC.Results:The LD50 of female and male were（803.85±163.94）mg/kg and（6158.95±1021.70）mg/kg in SD rats respectively.In the long—period toxicity test，after administered repeatedly for90days，the ALP and Crea were increased，ALB were decreased，the fat in liver cells were degenerated in five rats，the epithelium cells edema of proximal convoluted tubule in two，fatly degenerated，lumens broadend and few red cells in renal tubule were observed in300mg/kg dose group.In the150mg/kg dose group，ALP were increased，TP and ALB were decreased，fat in liver cells were degenerated in three rats.After administerd repeatedly for180days，in the300mg/kg and150mg/kg dose groups，the TP and grea were increased，the ALB were decreased.In the75mg/kg dose group ALB were decreased，the crea were increased，the fat in liver cells were degenerated lightly in two rats.In the37.5mg/kg dose groups，the ALB were decreased，the TP ang crea were increased.In30days after stopping the drug，the changes of hematobiochemical，pathological and coefficient of organs could completely recover，only the crea were increased in all of the rats.Conclusion:The LD 50 of ying in male were significantly different from female in SD rats.LD 50 in male rats was7.66times as much as in female rats.YTNC administration by long—period and large dose slightly injury the renal function in rats，but the injury was slowly reversible.It is proposed that the patients suffer from renal function harmful trends would administrate carefully.It is safe to administrate the prescribed dose of YTNC. Key words: Yaotongning Capsule; Acute toxicity; Long—period toxicity; Rat; Strychnos nux—vomica L.;Strychnine 腰痛宁胶囊为常用中成药，是国家中药保护品种。
具有消肿止痛、疏散寒邪、通经活络的作用，在治疗腰椎间盘突出、腰椎增生、坐骨神经痛、腰肌纤维炎、慢性风湿性关节炎等疾病时具有独特的疗效 ［1］。
因处方中含有马钱子等毒性中药，为给临床用药提供安全的实验依据，本文对腰痛宁胶囊进行了毒理学研究。
1 材料和方法 1.1 实验材料 1.1.1 动物 SD大鼠120～150g，180～220g由河北省实验动物中心提供，合格证号:第04036。
1.1.2 药物 腰痛宁胶囊，由承德中药集团提供，批号:20000920。
1.2 实验方法 1.2.1 大鼠LD50 的测定 选用SD大鼠，经过预实验发现雌、雄大鼠口服腰痛宁胶囊的急性毒性反应差异很大，因此将雌、雄大鼠分别分组实验。
将雌性SD大鼠分1150.00，977.50，830.90，706.20，600.30，510.03及433.707个组，组间剂量比为1∶0.85;将雄性SD大鼠分成8290.00，6800.00，5580.00和4570.00mg/kg4组，组间剂量比为1∶0.82，每组10只，体重180～220g;禁食不禁水12h，根据预先设计的剂量，按体重灌胃给药1次，给药体积为20ml/kg，给药后观察即刻及每日动物存活情况及一般表现，连续2周。
记录动物死亡数，死亡动物立即尸检，如发现有肉眼可见的病理改变时，做病理检查。
用DAS软件，按Bliss法计算LD50。
1.2.2 SD大鼠的长期毒性实验 将大鼠按性别和体重随机分成5组，空白对照组和A、B、C、D腰痛宁胶囊组，A组（300mg/kg）和B组（150mg/kg）每组40只大鼠，C组（75mg/kg）和D组（37.5mg/kg）每组30只大鼠，雌雄各半，给药体积为l ml/100g体重，各组均灌胃给药，每周灌胃6d，对照组灌胃等体积蒸馏水，连续给药180d，给药前及给药期间每周称动物体重1次，并按平均体重调整给药剂量。
实验期间每天观察大鼠一般状态、体征、摄 食量、饮水及粪便状况。
给药90d，于末次给药后24h，空白对照组、A组和B组各抽取大鼠10只（雌、雄各5只）、给药180d，于末次给药后24h空白对照组和各给药组各抽取14只大鼠（雌、雄各7只）、停药后30d各组抽取6只大鼠（雌、雄各3只），用乌拉坦麻醉，从腹主动脉取血，检查血液学和血液生化学指标。
血液学检查项目为:血色素（Hb）、血小板（PLT）、红细胞计数（RBC）、网织红细胞计数、白细胞计数（WBC）、白细胞分类（DC）、凝血时间。
血液生化学检查项目为:天门冬氨酸氨基转换酶（AST）、丙氨酸氨基转换酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、尿素氮（BUN）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、血糖（GLU）、总胆红素（T—BIL）、肌酐（Crea）、总胆固醇（T—CHO）。
取血后，将各组动物处死，立即剖取动物脑、心、肝、脾、肺、肾、胸腺、甲状腺、肾上腺、子宫卵巢、睾丸、前列腺称重，根据体重计算器官重量系数。
并取心、肝、肾、脾、肺、脑、肾上腺、甲状腺、胸腺、睾丸、附睾、卵巢、子宫、前列腺等脏器进行肉眼观察后用10%的甲醛溶液浸泡固定，作组织切片，H—E染色，光镜下检查组织病理学变化。
2 实验结果 2.1 大鼠的急性毒性 SD大鼠口服腰痛宁胶囊后几分钟内出现激惹现象，随后呼吸急促，流涎，全身抽搐，四肢强直，惊厥，雌性大鼠在灌胃后5～145min之间死亡，平均死亡时间为（38.28±43.47）min，LD50 为803.85mg/kg，95%置信限为726.05～889.99mg/kg。
雄性大鼠在灌胃后5～135min内死亡，平均死亡时间为（52.45±37.36）min，LD50 为6158.95mg/kg，95%置信限为5669.25～6690.94mg/kg。
表1 雌性SD大鼠经口急性毒性实验（略） 2.2 SD大鼠的长期毒性实验 2.2.1 腰痛宁胶囊对大鼠一般情况的影响 在腰痛宁胶囊连续给药期间，给药开始3周内，各给药组大鼠出现激惹反应，神经高度紧张，只要有小的刺激，即可产生直立反应。
3周后此现象消失。
各给药组与对照组比较动物的活动、体重、摄食量、大便和毛发光泽等相似，未发现异常情况。
A组给药第一周死亡3只大鼠，给药全程共死亡8只大鼠（死亡率20%），B组给药第1，2周大鼠各死亡1只，全程共死亡6只（死亡率15%），C组死亡1只（死亡率3.3%），D组死亡2只（死亡率6.6%），空白对照组死亡0只，肉眼尸检未见脏器异常。
表2 雄性SD大鼠经口急性毒性实验（略） 2.2.2 腰痛宁胶囊对大鼠体重增长的影响 实验结果见表3～6。
表3 腰痛宁胶囊对大鼠体重的影响（略）表4 腰痛宁胶囊对大鼠体重的影响（略） 表5 腰痛宁胶囊对大鼠体重的影响（略）表6 腰痛宁胶囊对大鼠体重的影响（略）。